一種純化原花青素的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種原花青素的純化方法。
技術(shù)背景
[0002]原花青素是廣泛存在于植物界中的一種多酚類物質(zhì)，它是不同數(shù)量的黃烷-3-醇聚合而成的聚合物的總稱。大量研究結(jié)果表明，低聚原花青素具有較強(qiáng)的抗氧化、抗輻射、抗過敏、抗菌抑菌以及預(yù)防心血管疾病、抑制腫瘤的能力，目前研究最多最廣的是葡萄籽原花青素。由于原花青素的諸多生理活性，現(xiàn)已被廣泛用于醫(yī)藥、保健品、食品及化妝品等領(lǐng)域。通?？梢圆捎脗鹘y(tǒng)吸附樹脂的方法純化得到原花青素產(chǎn)品，但是工藝技術(shù)耗時長，同時純度不高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的在于針對目前在純化原花青素的過程中所存在的時間長以及純度不高的問題，提供一種采用制備液相色譜系統(tǒng)純化高純度原花青素的新方法，該方法包括以下步驟:
a.將原花青素提取粗品溶于水后進(jìn)行過濾，一般將原花青素粗品配制成飽和溶液，具體實施時，可根據(jù)實際溶解效果進(jìn)行調(diào)整；
b.取配制好的原花青素溶液，用填充好固定相填料的動態(tài)軸向壓縮柱進(jìn)行分離，收集原花青素對應(yīng)譜帶的餾分；
c.將步驟b中收集的對應(yīng)譜帶洗脫液中的溶劑蒸干，即可得到色譜純?yōu)?8.5%的原花青素單體。
[0004]本發(fā)明的有益效果是可直接采用提取后的原花青素粗品來制備，不需要大量的前處理過程，簡單、易控制，工藝技術(shù)簡化，適用于大規(guī)模制備。高效液相色譜測定中，純度高于98.5%，完全可用于藥物的開發(fā)。
【具體實施方式】
[0005]實施例1
1.取Ig原花青素粗品溶于水,配制成飽和溶液,置于過濾裝置中，過濾除去固體顆粒；
2.將原花青素溶液泵入動態(tài)軸向壓縮柱制備色譜系統(tǒng)，柱填充尺寸為Φ50Χ250πιπι，填料為十八烷基硅膠，粒徑為l(T30um，上樣量lg。流動相的體積比為30:70，當(dāng)原花青素洗脫完畢后，流動相切換成高比例乙腈，將后端雜質(zhì)沖出，一個分離周期結(jié)束。采用的紫外可見光度檢測器的檢測波長為280nm，收集保留時間在45?47min的餾分，經(jīng)HPLC分析純度彡 98.8%。
[0006]實施例2
1.取2g原花青素粗品溶于水,配制成飽和溶液,置于過濾裝置中，過濾除去固體顆粒；
2.將原花青素溶液注入動態(tài)軸向壓縮柱制備色譜系統(tǒng)，柱填充尺寸為Φ50X250mm，填料為十八烷基硅膠，粒徑為2(T45um，上樣量2g。流動相的體積比為25:75，當(dāng)原花青素洗脫完畢后，流動相切換成高比例乙腈，將后端雜質(zhì)沖出，一個分離周期結(jié)束。采用的紫外可見光度檢測器的檢測波長為280nm，收集保留時間在55飛8min的餾分，經(jīng)HPLC分析純度彡 98.3%。
[0007] 實施例3
1.取12g原花青素粗品溶于水,配制成飽和溶液,置于過濾裝置中，過濾除去固體顆粒;
2.將原花青素溶液注入動態(tài)軸向壓縮柱制備色譜系統(tǒng)，柱填充尺寸為Φ200 X 250mm，填料為十八烷基硅膠，粒徑為l(Tl5um，上樣量12g。流動相的體積比為27:73，當(dāng)原花青素洗脫完畢后，流動相切換成高比例乙腈，將后端雜質(zhì)沖出，一個分離周期結(jié)束。采用的紫外可見光度檢測器的檢測波長為280nm，收集保留時間在6(T75min的餾分，經(jīng)HPLC分析純度彡 98.1%。
【主權(quán)項】
1.一種原花青素的純化方法，其特征在于包括以下步驟: (1)將原花青素提取粗品溶于水后進(jìn)行過濾，除去微小的固體不溶物，得到濾液作為分離粗品； (2)將過濾產(chǎn)物通過進(jìn)樣泵或者進(jìn)樣閥注入制備色譜系統(tǒng)； (3)采用乙腈/水做流動相，洗脫得到原花青素單體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是:所述的原花青素提取粗品為水提取或有機(jī)溶劑沉淀后所得。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征是:所述色譜系統(tǒng)采用動態(tài)軸向壓縮柱，且所填充固定相為十八烷基硅膠填料。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征是:流動相中乙腈與水的體積比(V/V)范圍為20:80?40:60，且水中加入乙酸。
【專利摘要】本發(fā)明公開一種原花青素的純化方法，采用原花青素提取粗品為原料，優(yōu)化條件得到合適的柱分離條件，進(jìn)一步放大到動態(tài)軸向壓縮工業(yè)制備色譜系統(tǒng)上分離，得到高純度的原花青素。本發(fā)明的優(yōu)點是，提取后粗品直接使用動態(tài)軸向壓縮工業(yè)制備色譜分離即可達(dá)到較好的分離提純效果，操作簡單，周期短，效率高，純度可達(dá)98.5%以上。
【IPC分類】C07D311-62
【公開號】CN104788418
【申請?zhí)枴緾N201410027927
【發(fā)明人】張宇, 祁威, 沈健增
【申請人】江蘇漢邦科技有限公司
【公開日】2015年7月22日
【申請日】2014年1月22日