一種紅蔥活性成分的提取工藝的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種天然素的提取方法，具體地涉及一種涉及紅蔥的活性成分的提取工藝。
【背景技術(shù)】
[0002]紅蔥為鳶尾科紅蔥屬植物，為民間草藥；別名紅蔥頭、小紅蒜；藥用部位全草、鱗莖。紅蔥味苦性涼，主治風濕性關(guān)節(jié)痛、跌打腫痛、瘡毒、吐血、咳血、痢疾和閉經(jīng)腹痛等癥。迄今為止，只從紅蔥中分離出十幾個化合物，有萘酚類、萘酮類、蒽醌類和葡萄糖苷類，它們
為紅蔥的主要活性成分，其中的一些成分具有抗菌、增加冠狀動脈血流量、抑制人類免疫缺陷病毒、抑制人體拓撲異構(gòu)酶II等多種藥理活性。
[0003]紅蔥在防治心血管系統(tǒng)疾病方面極具開發(fā)價值，上海藥物所的陳政雄、黃慧珠等發(fā)現(xiàn)紅蔥臨床上有良好的治療冠心病的作用，并從中分離得到能顯著增加冠狀動脈血流量的有效成分。紅蔥的主要成分紅蔥酚和紅蔥醌均具有顯著增加冠狀動脈血流量的作用，可用于治療冠狀動脈紊亂的心臟疾病。本發(fā)明人的前期研究實驗結(jié)果表明，紅蔥可以提高冠狀動脈的血流量，并可升高一氧化氮合成酶活性調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮依賴性因子一氧化氮的作用。一氧化氮是血管生成信號傳導過程中的一個關(guān)鍵分子，能促進血管內(nèi)皮的生成。紅蔥還有一定的抗氧化活性和降低血脂作用，紅蔥通過多靶點作用于心血管疾病的不同環(huán)節(jié)，
協(xié)同治療，副作用小，克服了合成藥物靶點單一，毒副作用大的缺點。本發(fā)明人經(jīng)過多年的研究，從紅蔥中分離出多個化合物，其中一部分為新化合物，確定了以萘酚類和萘酮類為紅蔥的主要活性部位。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提出一種質(zhì)量穩(wěn)定、路線簡單、適于規(guī)?；a(chǎn)的有效部位的純化工藝。本發(fā)明采用天然藥物化學和分子藥理相結(jié)合的方法，研究紅蔥治療心血管疾病的有效物質(zhì)基礎(chǔ)，明確紅蔥中成分的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)以及活性情況。在稻瘟霉篩選體系的指導下，對紅蔥的化學成分進行了活性跟蹤分離。本發(fā)明提取工藝簡單，具有藥物質(zhì)量容易控制，口服劑量小，病人順從性高等優(yōu)勢，克服了傳統(tǒng)藥物“黑、大、粗”和成分不清的缺點。
[0005]本發(fā)明提供了一種從紅蔥中提取活性成分的提取工藝，內(nèi)容主要包括:粉碎、提取、濃縮、萃取、分離等步驟。其具體工藝如下:
(1)粉碎取紅蔥干燥藥材4kg，粉碎成粗粉；
(2)提取粗粉用65%乙醇20L浸泡40分鐘，水浴85°C加熱回流2小時，過濾分離提取液和濾渣，回流提取3次，最后合并提取液；
3)濃縮減壓回收至稠膏，加水4L混懸；
(4)萃取分別用氯仿、正丁醇萃取，得到氯仿層96g，正丁醇層98g，水層104g；
(5)分離利用稻瘟霉篩選體系，對抗稻瘟霉活性較好的氯仿層采用硅膠柱色譜、中低壓柱色譜及高效液相色譜分離得到化合物l(3g)、化合物2(5g)、化合物3(4g)、化合物4 (500mg)、化合物5 (20mg)、化合物6 (35mg)、化合物7 (25mg)、化合物8 (6mg)、化合物9 (22mg)及化合物 10(12mg)。
[0006]利用物理化學和光譜學的方法對這10個化合物結(jié)構(gòu)進行了鑒定，其中化合物9和10為首次從該屬植物中分得。
[0007]
【具體實施方式】
下面用實施例來進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明并不受其限制。
[0008]本發(fā)明將結(jié)合實施例作進一步詳述:
實施例一
取紅蔥干燥藥材4kg，粉碎成粗粉。用65%乙醇20L浸泡40分鐘，水浴85°C加熱回流2小時，過濾分離提取液和濾渣；回流提取3次，最后合并提取液。減壓回收至稠膏，加水3L混懸；分別用氯仿、正丁醇萃取，得到氯仿層96g，正丁醇層98g，水層104g。利用稻瘟霉篩選體系，對抗稻瘟霉活性較好的氯仿層采用硅膠柱色譜、中低壓柱色譜及高效液相色譜分離得到化合物I (3g)、化合物2 (5g)、化合物3 (4g)、化合物4 (500mg)、化合物5 (20mg)、化合物6 (35mg)、化合物7 (25mg)、化合物8 (6mg)、化合物9 (22mg)及化合物10 (12mg)。其中化合物9和10為首次從該屬植物中分得。
[0009]實施例二
取紅蔥干燥藥材4kg，粉碎成粗粉。用65%乙醇20L浸泡40分鐘，水浴85°C加熱回流2小時，過濾分離提取液和濾渣；回流提取3次，最后合并提取液。減壓回收至稠膏，力口水3L混懸；分別用氯仿、石油醚萃取，得到氯仿層83g，石油醚層35g，水層145g。利用稻瘟霉篩選體系，對抗稻瘟霉活性較好的石油醚層采用硅膠柱色譜、中低壓柱色譜及高效液相色譜分離得到化合物I (120mg)、化合物2 (50mg)、化合物3 (2g)、化合物4 (20mg)、化合物5 (33mg)、化合物6 (20mg)、化合物7 (140mg)、化合物8 (1mg)、化合物9 (50mg)。其中化合物9為首次從該屬植物中分得。
[0010]實施例三
取紅蔥干燥藥材4kg，粉碎成粗粉。用65%乙醇20L浸泡30分鐘，水浴85°C加熱回流2小時，過濾分離提取液和濾渣；回流提取3次，最后合并提取液。減壓回收至稠膏，力口水3L混懸；分別用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到氯仿層96g，乙酸乙酯98g，正丁醇層98g，水層104g。利用稻瘟霉篩選體系，對抗稻瘟霉活性較好的氯仿層采用硅膠柱色譜、中低壓柱色譜及高效液相色譜分離得到化合物I (10mg)、化合物2 (30mg)、化合物3 (40mg)、化合物4 (1mg)、化合物5 (3g)、化合物6 (200mg)、化合物7 (45mg)、化合物8 (12mg)、化合物9 (15mg)、化合物10 (60mg)、化合物11 (5g)、化合物12 (24mg)、化合物13 (90mg)、化合物14(52mg)。其中化合物1、11和13為首次從該屬植物中分得。
[0011]實施例四
取紅蔥干燥藥材4kg，粉碎成粗粉。用65%乙醇20L浸泡2h，水浴85°C加熱回流2小時，過濾分離提取液和濾渣；回流提取3次，最后合并提取液。減壓回收至稠膏，加水3L混懸；分別用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到氯仿層122g，乙酸乙酯97g，正丁醇層1lgdK層110g。利用稻瘟霉篩選體系，對抗稻瘟霉活性較好的氯仿層采用硅膠柱色譜、中低壓柱色譜及高效液相色譜分離得到化合物I (105mg)、化合物2 (3Img)、化合物3 (49mg)、化合物4 (15mg)、化合物5 (4g)、化合物6 (200mg)、化合物7 (50mg)、化合物8 (18mg)、化合物9 (20mg)、化合物10 (72mg)、化合物11 (5g)、化合物12 (3Img)、化合物13 (98mg)、化合物14(60mg)。其中化合物1、11和13為首次從該屬植物中分得。
[0012]實施例五
取紅蔥干燥藥材4kg，粉碎成粗粉。用65%乙醇60L浸泡2h，水浴85°C加熱回流2小時，過濾分離提取液和濾渣；回流提取3次，最后合并提取液。減壓回收至稠膏，加水3L混懸；分別用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到氯仿層148g，乙酸乙酯100g，正丁醇層
115g，水層127g。利用稻瘟霉篩選體系，對抗稻瘟霉活性較好的氯仿層采用硅膠柱色譜、中低壓柱色譜及高效液相色譜分離得到化合物l(126mg)、化合物2(40mg)、化合物3 (52mg)、化合物4 (2 Img)、化合物5 (4g)、化合物6 (2 1mg)、化合物7 (63mg)、化合物8(25mg)、化合物9(29mg)、化合物10(80mg)、化合物ll(5g)、化合物12(35mg)、化合物13(104mg)、化合物14(67mg)。其中化合物1、11和13為首次從該屬植物中分得。
[0013]實施例六
取紅蔥干燥藥材4kg，粉碎成粗粉。用80%乙醇60L浸泡2h，水浴85°C加熱回流2小時，過濾分離提取液和濾渣；回流提取3次，最后合并提取液。減壓回收至稠膏，加水3L混懸；分別用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到氯仿層132g，乙酸乙酯80g，正丁醇層100g，水層106g。利用稻瘟霉篩選體系，對抗稻瘟霉活性較好的氯仿層采用硅膠柱色譜、中低壓柱色譜及高效液相色譜分離得到化合物I (120mg)、化合物2 (36mg)、化合物3 (48mg)、化合物4(17mg)、化合物5 (4g)、化合物6 (180mg)、化合物7 (55mg)、化合物8 (2Img)、化合物9 (18mg)、化合物10 (67mg)、化合物11 (4g)、化合物12 (26mg)、化合物13 (82mg)、化合物14(49mg)。其中化合物1、11和13為首次從該屬植物中分得。
【主權(quán)項】
1.一種從紅蔥中提取活性成分的提取工藝，主要包括:粉碎、提取、濃縮、萃取、分離等步驟，其特征在于該方法包括下述工藝步驟: (1)粉碎取紅蔥干燥藥材4kg，粉碎成粗粉； (2)提取粗粉用65%乙醇20L浸泡40分鐘，水浴85°C加熱回流2小時，過濾分離提取液和濾渣，回流提取3次，最后合并提取液； (3)濃縮減壓回收至稠膏，加水4L混懸； (4)萃取分別用氯仿、正丁醇萃取，得到氯仿層96g，正丁醇層98g，水層104g； (5)分離利用稻瘟霉篩選體系，對抗稻瘟霉活性較好的氯仿層采用硅膠柱色譜、中低壓柱色譜及高效液相色譜分離。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于其中所采用的稻瘟霉篩選體系。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種從紅蔥中提取活性成分的工藝，主要包括：粉碎、提取、濃縮、萃取、分離等步驟，其主要特征是結(jié)合稻瘟霉活性篩選模型，以確活性成分的最佳萃取部位，采用硅膠柱色譜、中低壓柱色譜及高效液相色譜等手段分離出活性化合物。是適用于一定生產(chǎn)規(guī)模的、質(zhì)量穩(wěn)定的有效部位的分離純化工藝。該提取工藝效率高，得到的活性成分治療純度高、藥效作用強。
【IPC分類】C07G99-00
【公開號】CN104628791
【申請?zhí)枴緾N201310550803
【發(fā)明人】譚超智
【申請人】青島中人智業(yè)生物科技有限公司
【公開日】2015年5月20日
【申請日】2013年11月9日