本發(fā)明涉及一種溫敏型殼聚糖/氧化石墨烯材料的制備方法。
背景技術(shù):
目前,生物材料快速發(fā)展,主要針對(duì)某些生物相容性好的材料進(jìn)行生物方面的應(yīng)用。以殼聚糖/氧化石墨烯材料為例來(lái)說(shuō),由于殼聚糖生物相容性好、免疫排斥反應(yīng)小、無(wú)細(xì)胞毒性、易降解同時(shí)具有抗菌消炎的優(yōu)點(diǎn)被廣泛應(yīng)用于生物技術(shù)領(lǐng)域,例如作為生物傳感器、組織工程支架、藥物緩釋載體等等,同時(shí)在復(fù)合氧化石墨烯材料以后,該材料的機(jī)械應(yīng)力、電傳導(dǎo)性得以增強(qiáng),進(jìn)一步擴(kuò)大了殼聚糖/氧化石墨烯的應(yīng)用范圍。
然而,作為生物材料,殼聚糖/氧化石墨烯材料往往要作用在細(xì)胞培養(yǎng)體系中,如何能讓細(xì)胞均勻分布在殼聚糖/氧化石墨烯材料中以便實(shí)現(xiàn)該材料的載藥、傳感功能成為當(dāng)前研究的難題。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
本發(fā)明的目的是提供一種溫敏型殼聚糖/氧化石墨烯材料的制備方法,以便殼聚糖/氧化石墨烯復(fù)合材料在低于37℃時(shí)能以液態(tài)和細(xì)胞充分混勻,使得材料和細(xì)胞更加均勻、充分接觸,進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)殼聚糖/氧化石墨烯材料的功能。
本發(fā)明的技術(shù)方案:
一種溫敏型殼聚糖/氧化石墨烯材料的制備方法,步驟如下:
制備濃度為100-600mg/l的氧化石墨烯水溶液,超聲20min,向氧化石墨烯水溶液中加入殼聚糖粉末,使得殼聚糖/氧化石墨烯的質(zhì)量比為0.1~0.6,冰水浴條件下磁力攪拌,并逐滴滴入冰醋酸,使得冰醋酸/水的體積比為0.1%~0.6%,持續(xù)攪拌2h,得到澄清透明的溶液;配置β-甘油膦酸二鈉鹽溶液,在冰水浴條件下,向澄清透明的溶液中逐滴滴入β-甘油磷酸二鈉鹽溶液,使得β-甘油磷酸二鈉鹽的濃度在0.1-0.2mol/l,充分?jǐn)嚢?0min,即得到溫敏型殼聚糖/氧化石墨烯;保存在4℃條件下,待用時(shí)取出,置于37℃水浴10-15min,即得溫敏型殼聚糖/氧化石墨烯材料。
本發(fā)明的有益效果:本發(fā)明能夠拓寬殼聚糖/氧化石墨烯材料在生物技術(shù)方面的應(yīng)用,以該方法制備的殼聚糖/氧化石墨烯材料能夠在進(jìn)行生物利用之前在低溫條件下先和目的細(xì)胞充分混合。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合技術(shù)方案,進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的具體實(shí)施方式。
實(shí)施例1:
取100mg/l的氧化石墨烯水溶液10ml,冰水浴條件下,向其中加入200mg殼聚糖粉末,攪拌成乳濁液,由于殼聚糖不溶于水,向混合的乳濁液中逐滴加入60微升冰醋酸,邊加邊攪拌,待乳濁液逐漸澄清透明,配置56%β-甘油膦酸二鈉鹽溶液,逐滴滴入置于磁力攪拌器,充分?jǐn)嚢?.5小時(shí),存放于4℃冰箱,待用時(shí)取出,37℃水浴10-15min,即得100mg/l殼聚糖/氧化石墨烯生物材料(以氧化石墨烯濃度為基準(zhǔn))。
實(shí)施例2:
采用200mg/l的氧化石墨烯水溶液10ml,冰水浴條件下,向其中加入200mg殼聚糖粉末,攪拌成乳濁液,向混合的乳濁液中逐滴加入60微升冰醋酸,邊加邊攪拌,待乳濁液逐漸澄清透明,配置56%β-甘油膦酸二鈉鹽溶液,逐滴滴入置于磁力攪拌器,充分?jǐn)嚢?.5小時(shí),存放于4℃冰箱,待用時(shí)取出,37℃水浴10-15min,即得200mg/l殼聚糖/氧化石墨烯生物材料(以氧化石墨烯濃度為基準(zhǔn))。
實(shí)施例3:
取400mg/l的氧化石墨烯水溶液10ml,冰水浴條件下,向其中加入200mg殼聚糖粉末,攪拌成乳濁液,由于殼聚糖不溶于水,向混合的乳濁液中逐滴加入60微升冰醋酸,邊加邊攪拌,待乳濁液逐漸澄清透明,配置56%β-甘油膦酸二鈉鹽溶液,逐滴滴入置于磁力攪拌器,充分?jǐn)嚢?.5小時(shí),存放于4℃冰箱,待用時(shí)取出,37℃水浴10-15min,即得400mg/l殼聚糖/氧化石墨烯生物材料(以氧化石墨烯濃度為基準(zhǔn))。
實(shí)施例4:
取600mg/l的氧化石墨烯水溶液10ml,冰水浴條件下,向其中加入200mg殼聚糖粉末,攪拌成乳濁液,由于殼聚糖不溶于水,向混合的乳濁液中逐滴加入60微升冰醋酸,邊加邊攪拌,待乳濁液逐漸澄清透明,配置56%β-甘油膦酸二鈉鹽溶液,逐滴滴入置于磁力攪拌器,充分?jǐn)嚢?.5小時(shí),存放于4℃冰箱,待用時(shí)取出,37℃水浴10-15min,即得600mg/l殼聚糖/氧化石墨烯生物材料(以氧化石墨烯濃度為基準(zhǔn))。
本發(fā)明方法的磁力攪拌過(guò)程是處于紫外燈照射下進(jìn)行,經(jīng)過(guò)紫外燈持續(xù)照射,可以營(yíng)造一種無(wú)菌環(huán)境,同時(shí)減少支架材料內(nèi)部的微生物。
本發(fā)明優(yōu)選包括在制備殼聚糖/氧化石墨烯復(fù)合支架時(shí)不采用交聯(lián)劑。