本發(fā)明涉及共軛亞油酸制備技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種以葡萄籽油為原料制備高含量共軛亞油酸的方法。
背景技術(shù)：
1978年，M.W.Pariza在油煎漢堡中發(fā)現(xiàn)了一種抗突變物質(zhì)-共軛亞油酸。隨后，科學(xué)家們在研究中發(fā)現(xiàn)共軛亞油酸具有很多生理活性。在多種動(dòng)物模型中，共軛亞油酸通過免疫激化作用可以防癌變，預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化，調(diào)控代謝，減少體內(nèi)脂肪含量。研究發(fā)現(xiàn)，共軛亞油酸能減少致癌物質(zhì)引起的皮膚癌、胃癌、乳腺癌、結(jié)腸癌和胸腺癌和胸癌培養(yǎng)的細(xì)胞。另外，共軛亞油酸能幫助調(diào)節(jié)或降低血液內(nèi)葡萄糖的水平，防止糖尿病的發(fā)生。同時(shí)，共軛亞油酸可以影響血清中膽固醇的含量，降低有害的低密度脂蛋白膽固醇的含量，而不影響對健康有利的高密度脂蛋白膽固醇的含量。此外，共軛亞油酸還具有抗血栓的性質(zhì)，能夠抑制由花生四烯酸或者膠原質(zhì)引起的血小板凝集，目前合成共軛亞油酸的方法大都是以富含亞油酸的植物油為原料，在堿催化下異構(gòu)化得到的，存在反應(yīng)溫度高，反應(yīng)時(shí)間長，產(chǎn)率不高，且分離提純難等缺點(diǎn)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種以葡萄籽油為原料制備高含量共軛亞油酸的方法，以解決上述背景技術(shù)中提出的問題。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：一種以葡萄籽油為原料制備高含量共軛亞油酸的方法,包括以下步驟：
A、選取新鮮的葡萄籽并洗凈曬干，之后放入高溫滅菌箱中進(jìn)行高溫滅菌，滅菌溫度為150℃-180℃，滅菌時(shí)間為20min-30min；
B、將步驟A高溫滅菌后的葡萄籽放入壓榨機(jī)中進(jìn)行壓榨，壓榨機(jī)轉(zhuǎn)速為200-500轉(zhuǎn)/分，壓榨溫度為40℃-50℃，壓榨時(shí)間為3min-8min，得到葡萄籽油半成品；
C、將步驟B得到的葡萄籽油半成品加入精濾機(jī)中進(jìn)行三次過濾，一次過濾后去除濾渣，靜置后進(jìn)行二次過濾，過濾后進(jìn)行低速攪拌，之后進(jìn)行三次過濾，去除濾渣后得到葡萄籽成品精油；
D、將步驟C得到的葡萄籽油倒入反應(yīng)釜中，并加入1/2培養(yǎng)液，之后將反應(yīng)釜加熱反應(yīng)，加熱溫度為60℃-70℃，加熱時(shí)間為120min-220min，之后冷卻至常溫，濾除表面清液，得到混合油；
E、在步驟D得到的混合油中再次加入1/2培養(yǎng)液，之后倒入攪拌釜中進(jìn)行低速攪拌，攪拌釜轉(zhuǎn)速為500-800轉(zhuǎn)/分，攪拌時(shí)間為10min-20min；之后加入離心機(jī)中進(jìn)行離心分離雜質(zhì)；
F、在步驟E得到的混合油中加入萃取液，混合后倒入反應(yīng)容器中，將反應(yīng)容器迅速升溫至120℃-150℃，恒溫10min，之后緩慢冷卻至55℃-60℃，恒溫10min，之后再次升溫至100℃-110℃，恒溫5min,之后緩慢冷卻至常溫；
G、最后將步驟F得到的混合油加入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)10min-15min，蒸發(fā)溫度為50℃，即得到共軛亞油酸。
優(yōu)選的，所述步驟D中培養(yǎng)液組份按重量份數(shù)包括磷酸氫二鉀3-5份、檸檬酸銨5-10份、硫酸錳3-6份、鉬酸銨1-3份以及酵母浸粉3-8份。
優(yōu)選的，所述步驟F中萃取液采用磷氧型酸性萃取劑P204、P507中的一種或羧酸類酸性萃取劑環(huán)烷酸、硬脂酸中的一種。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：
(1)本發(fā)明制備方法簡單，制備成本低，制備時(shí)間短，制得的共軛亞油酸含量高、純度高，可直接食用，患者長期服用后能夠有效降低高血脂、高血糖，保健效果好。
(2)本發(fā)明的制備方法中采用兩次加入培養(yǎng)液的方式，能夠使葡萄籽油充分反應(yīng)，提高了制備出的共軛亞油酸的含量。
(3)本發(fā)明中制備方法采用的萃取方法操作簡單，采用高低溫交叉反應(yīng)，能夠進(jìn)一步提高萃取效率。
具體實(shí)施方式
下面對本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
實(shí)施例一：
本發(fā)明提供一種技術(shù)方案：一種以葡萄籽油為原料制備高含量共軛亞油酸的方法,包括以下步驟：
A、選取新鮮的葡萄籽并洗凈曬干，之后放入高溫滅菌箱中進(jìn)行高溫滅菌，滅菌溫度為150℃，滅菌時(shí)間為20min；
B、將步驟A高溫滅菌后的葡萄籽放入壓榨機(jī)中進(jìn)行壓榨，壓榨機(jī)轉(zhuǎn)速為200轉(zhuǎn)/分，壓榨溫度為40℃，壓榨時(shí)間為3min，得到葡萄籽油半成品；
C、將步驟B得到的葡萄籽油半成品加入精濾機(jī)中進(jìn)行三次過濾，一次過濾后去除濾渣，靜置后進(jìn)行二次過濾，過濾后進(jìn)行低速攪拌，之后進(jìn)行三次過濾，去除濾渣后得到葡萄籽成品精油；
D、將步驟C得到的葡萄籽油倒入反應(yīng)釜中，并加入1/2培養(yǎng)液，之后將反應(yīng)釜加熱反應(yīng)，加熱溫度為60℃，加熱時(shí)間為120min，之后冷卻至常溫，濾除表面清液，得到混合油；
E、在步驟D得到的混合油中再次加入1/2培養(yǎng)液，之后倒入攪拌釜中進(jìn)行低速攪拌，攪拌釜轉(zhuǎn)速為500轉(zhuǎn)/分，攪拌時(shí)間為10min；之后加入離心機(jī)中進(jìn)行離心分離雜質(zhì)；
F、在步驟E得到的混合油中加入萃取液，混合后倒入反應(yīng)容器中，將反應(yīng)容器迅速升溫至120℃，恒溫10min，之后緩慢冷卻至55℃，恒溫10min，之后再次升溫至100℃，恒溫5min,之后緩慢冷卻至常溫；
G、最后將步驟F得到的混合油加入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)10min，蒸發(fā)溫度為50℃，即得到共軛亞油酸。
本實(shí)施例中，步驟D中培養(yǎng)液組份按重量份數(shù)包括磷酸氫二鉀3份、檸檬酸銨5份、硫酸錳3份、鉬酸銨1份以及酵母浸粉3份。
本實(shí)施例中，步驟F中萃取液采用磷氧型酸性萃取劑P204。
實(shí)施例二：
本發(fā)明提供一種技術(shù)方案：一種以葡萄籽油為原料制備高含量共軛亞油酸的方法,包括以下步驟：
A、選取新鮮的葡萄籽并洗凈曬干，之后放入高溫滅菌箱中進(jìn)行高溫滅菌，滅菌溫度為180℃，滅菌時(shí)間為30min；
B、將步驟A高溫滅菌后的葡萄籽放入壓榨機(jī)中進(jìn)行壓榨，壓榨機(jī)轉(zhuǎn)速為500轉(zhuǎn)/分，壓榨溫度為50℃，壓榨時(shí)間為8min，得到葡萄籽油半成品；
C、將步驟B得到的葡萄籽油半成品加入精濾機(jī)中進(jìn)行三次過濾，一次過濾后去除濾渣，靜置后進(jìn)行二次過濾，過濾后進(jìn)行低速攪拌，之后進(jìn)行三次過濾，去除濾渣后得到葡萄籽成品精油；
D、將步驟C得到的葡萄籽油倒入反應(yīng)釜中，并加入1/2培養(yǎng)液，之后將反應(yīng)釜加熱反應(yīng)，加熱溫度為70℃，加熱時(shí)間為220min，之后冷卻至常溫，濾除表面清液，得到混合油；
E、在步驟D得到的混合油中再次加入1/2培養(yǎng)液，之后倒入攪拌釜中進(jìn)行低速攪拌，攪拌釜轉(zhuǎn)速為800轉(zhuǎn)/分，攪拌時(shí)間為20min；之后加入離心機(jī)中進(jìn)行離心分離雜質(zhì)；
F、在步驟E得到的混合油中加入萃取液，混合后倒入反應(yīng)容器中，將反應(yīng)容器迅速升溫至150℃，恒溫10min，之后緩慢冷卻至60℃，恒溫10min，之后再次升溫至110℃，恒溫5min,之后緩慢冷卻至常溫；
G、最后將步驟F得到的混合油加入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)15min，蒸發(fā)溫度為50℃，即得到共軛亞油酸。
本實(shí)施例中，步驟D中培養(yǎng)液組份按重量份數(shù)包括磷酸氫二鉀5份、檸檬酸銨10份、硫酸錳6份、鉬酸銨3份以及酵母浸粉8份。
本實(shí)施例中，步驟F中萃取液采用磷氧型酸性萃取劑P507。
實(shí)施例三：
本發(fā)明提供一種技術(shù)方案：一種以葡萄籽油為原料制備高含量共軛亞油酸的方法,包括以下步驟：
A、選取新鮮的葡萄籽并洗凈曬干，之后放入高溫滅菌箱中進(jìn)行高溫滅菌，滅菌溫度為160℃，滅菌時(shí)間為22min；
B、將步驟A高溫滅菌后的葡萄籽放入壓榨機(jī)中進(jìn)行壓榨，壓榨機(jī)轉(zhuǎn)速為300轉(zhuǎn)/分，壓榨溫度為42℃，壓榨時(shí)間為4min，得到葡萄籽油半成品；
C、將步驟B得到的葡萄籽油半成品加入精濾機(jī)中進(jìn)行三次過濾，一次過濾后去除濾渣，靜置后進(jìn)行二次過濾，過濾后進(jìn)行低速攪拌，之后進(jìn)行三次過濾，去除濾渣后得到葡萄籽成品精油；
D、將步驟C得到的葡萄籽油倒入反應(yīng)釜中，并加入1/2培養(yǎng)液，之后將反應(yīng)釜加熱反應(yīng)，加熱溫度為62℃，加熱時(shí)間為140min，之后冷卻至常溫，濾除表面清液，得到混合油；
E、在步驟D得到的混合油中再次加入1/2培養(yǎng)液，之后倒入攪拌釜中進(jìn)行低速攪拌，攪拌釜轉(zhuǎn)速為600轉(zhuǎn)/分，攪拌時(shí)間為12min；之后加入離心機(jī)中進(jìn)行離心分離雜質(zhì)；
F、在步驟E得到的混合油中加入萃取液，混合后倒入反應(yīng)容器中，將反應(yīng)容器迅速升溫至130℃，恒溫10min，之后緩慢冷卻至55℃，恒溫10min，之后再次升溫至105℃，恒溫5min,之后緩慢冷卻至常溫；
G、最后將步驟F得到的混合油加入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)11min，蒸發(fā)溫度為50℃，即得到共軛亞油酸。
本實(shí)施例中，步驟D中培養(yǎng)液組份按重量份數(shù)包括磷酸氫二鉀4份、檸檬酸銨6份、硫酸錳4份、鉬酸銨2份以及酵母浸粉4份。
本實(shí)施例中，步驟F中萃取液采用羧酸類酸性萃取劑環(huán)烷酸。
實(shí)施例四：
本發(fā)明提供一種技術(shù)方案：一種以葡萄籽油為原料制備高含量共軛亞油酸的方法,包括以下步驟：
A、選取新鮮的葡萄籽并洗凈曬干，之后放入高溫滅菌箱中進(jìn)行高溫滅菌，滅菌溫度為170℃，滅菌時(shí)間為28min；
B、將步驟A高溫滅菌后的葡萄籽放入壓榨機(jī)中進(jìn)行壓榨，壓榨機(jī)轉(zhuǎn)速為400轉(zhuǎn)/分，壓榨溫度為50℃，壓榨時(shí)間為7min，得到葡萄籽油半成品；
C、將步驟B得到的葡萄籽油半成品加入精濾機(jī)中進(jìn)行三次過濾，一次過濾后去除濾渣，靜置后進(jìn)行二次過濾，過濾后進(jìn)行低速攪拌，之后進(jìn)行三次過濾，去除濾渣后得到葡萄籽成品精油；
D、將步驟C得到的葡萄籽油倒入反應(yīng)釜中，并加入1/2培養(yǎng)液，之后將反應(yīng)釜加熱反應(yīng)，加熱溫度為68℃，加熱時(shí)間為200min，之后冷卻至常溫，濾除表面清液，得到混合油；
E、在步驟D得到的混合油中再次加入1/2培養(yǎng)液，之后倒入攪拌釜中進(jìn)行低速攪拌，攪拌釜轉(zhuǎn)速為700轉(zhuǎn)/分，攪拌時(shí)間為18min；之后加入離心機(jī)中進(jìn)行離心分離雜質(zhì)；
F、在步驟E得到的混合油中加入萃取液，混合后倒入反應(yīng)容器中，將反應(yīng)容器迅速升溫至140℃，恒溫10min，之后緩慢冷卻至58℃，恒溫10min，之后再次升溫至110℃，恒溫5min,之后緩慢冷卻至常溫；
G、最后將步驟F得到的混合油加入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)12min，蒸發(fā)溫度為50℃，即得到共軛亞油酸。
本實(shí)施例中，步驟D中培養(yǎng)液組份按重量份數(shù)包括磷酸氫二鉀4份、檸檬酸銨7份、硫酸錳5份、鉬酸銨2份以及酵母浸粉5份。
本實(shí)施例中，步驟F中萃取液采用羧酸類酸性萃取劑硬脂酸。
病例：
高血脂、高血糖患者黃某取實(shí)施例四制得的共軛亞油酸并溶于水，稀釋后，于飯后1h飲用，服用45天后，血脂總膽固醇值降至2.5mmol/L。
高血脂、高血糖患者沈某取實(shí)施例四制得的共軛亞油酸并溶于水，稀釋后，于飯后1h飲用，服用60天后，血脂總膽固醇值降至2mmol/L。
本發(fā)明制備方法簡單，制備成本低，制備時(shí)間短，制得的共軛亞油酸含量高、純度高，可直接食用，患者長期服用后能夠有效降低高血脂、高血糖，保健效果好；本發(fā)明的制備方法中采用兩次加入培養(yǎng)液的方式，能夠使葡萄籽油充分反應(yīng)，提高了制備出的共軛亞油酸的含量；本發(fā)明中制備方法采用的萃取方法操作簡單，采用高低溫交叉反應(yīng)，能夠進(jìn)一步提高萃取效率。
盡管已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實(shí)施例，對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員而言，可以理解在不脫離本發(fā)明的原理和精神的情況下可以對這些實(shí)施例進(jìn)行多種變化、修改、替換和變型，本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求及其等同物限定。