牛血清白蛋白-鉑復(fù)合納米材料模擬過氧化物酶的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種牛血清白蛋白-鉑復(fù)合納米材料模擬過氧化物酶，以牛血清白蛋白為模板，通過生物礦化作用，制備牛血清白蛋白-鉑復(fù)合納米材料模擬過氧化物酶。其牛血清白蛋白-鉑復(fù)合納米材料由下述方法制備而成的：在濃度為牛血清白蛋白水溶液中加入氯鉑酸水溶液，混勻后加入氫氧化鈉水溶液得混合溶液，水浴加熱；將此溶液經(jīng)過超濾并水洗，得到牛血清白蛋白-鉑復(fù)合納米材料水溶液；牛血清白蛋白-鉑復(fù)合納米材料具有優(yōu)良的過氧化酶活性，可催化過氧化氫氧化3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽顯色。同時該模擬酶耐酸堿、耐高溫、耐高鹽，具有優(yōu)異的短期室溫穩(wěn)定性和長期室溫穩(wěn)定性。
【專利說明】牛血清白蛋白-鉑復(fù)合納米材料模擬過氧化物酶
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及具有模擬過氧化物酶特性的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料，屬于納米技術(shù)和仿生【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]酶是生物體內(nèi)非常重要，具有催化活性的蛋白質(zhì)，它催化效率高、專一性強、反應(yīng)條件溫和，生物體的生長、發(fā)育、繁殖等生命活動都離不開酶的催化作用。然而天然酶來源有限，提純困難，價格昂貴。同時，天然酶容易受到多種物理、化學(xué)因素的影響而失去活性，所以在實際應(yīng)用中對實驗的操作條件較為苛刻，使其應(yīng)用受到了極大的限制。近年來，人工模擬酶的研究開發(fā)與應(yīng)用受到了人們的廣泛關(guān)注。
[0003]過氧化物酶可以高效地催化氧化過氧化氫，而過氧化氫又是生物反應(yīng)中一種重要的中間物質(zhì)，所以對過氧化氫以及相關(guān)生化物質(zhì)的精確測定具有重要的意義。過氧化物模擬酶所涉及的物質(zhì)包括四氧化三鐵納米粒子，血紅蛋白，氯化血紅素，金屬卟啉，金屬酞菁等。其中，納米人工模擬酶具有制備簡單、經(jīng)濟、快捷、耐高溫和耐酸堿、性質(zhì)穩(wěn)定等諸多優(yōu)勢，在模擬生物酶方面顯示出極其誘人的應(yīng)用前景。
[0004]本發(fā)明提供了一種基于牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料的高活性、高穩(wěn)定性模擬過氧化物酶。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是以牛血清白蛋白為模板，通過生物礦化作用，制備牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料，利用納米尺度金屬鉬內(nèi)核的優(yōu)良催化特性模擬過氧化物酶及其制備方法和應(yīng)用，利用牛血清白蛋白外殼對模擬酶活性中心起到穩(wěn)定作用。
[0006]為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:
(一)本發(fā)明所述的一種牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料模擬過氧化物酶，由下述方法制備而成的:在牛血清白蛋白水溶液中加入氯鉬酸水溶液，混勻后加入氫氧化鈉水溶液得混合溶液，水浴加熱，混合溶液在加熱反應(yīng)后其氯鉬酸的三個吸收峰消失(此時說明氯鉬酸全部反應(yīng))；將此溶液經(jīng)過超濾并水洗，得到鉬納米粒子-牛血清白蛋白核殼結(jié)構(gòu)水溶液；模擬過氧化酶活性特征為:在磷酸鹽緩沖液中依次加入過氧化氫、3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽和牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料水溶液，混合后溫浴，溶液由無色變?yōu)樗{(lán)色，在652 nm處有一吸收峰。
[0007]本發(fā)明上述的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料的制備中的各組分的配比按本領(lǐng)域常規(guī)方法可以完成的。但本發(fā)明的優(yōu)選的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料的制備由以下方法制備:在5 ml 50 mg/ml的牛血清白蛋白水溶液中加入16 mmol/L氯鉬酸溶液5 ml和1.5 mol/L氫氧化鈉溶液0.5 ml，混勻后水浴80 °C下反應(yīng)2 h。反應(yīng)后溶液裝入截止分子量為3k的超濾管，6000 r/min離心超濾，并水洗3次。
[0008]模擬過氧化酶活性特征優(yōu)選測試步驟為:在2780 μ L ρΗ=4.5,20 mmol/L的磷酸鹽緩沖液中依次加入I ml濃度為2 mol/L的過氧化氫、0.2 ml濃度為16 mmol/L的3，3’，5，5’-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽和20 μ L濃度為0.36 mmol/L的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料水溶液，混合后45 °C溫浴10分鐘，溶液由無色變?yōu)樗{(lán)色。
[0009]所述的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料水溶液可以通過冷凍干燥得到牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料粉末。以上過程中使用的所有玻璃器皿均經(jīng)過王水浸泡，并用雙蒸水徹底清洗，晾干。
[0010]本發(fā)明所述的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料模擬過氧化物酶的制備方法，包括如下步驟:在牛血清白蛋白水溶液中加入氯鉬酸水溶液，混勻后加入氫氧化鈉水溶液得混合溶液，水浴加熱，混合溶液在加熱反應(yīng)后其氯鉬酸的三個吸收峰消失；將此溶液經(jīng)過超濾并水洗，得到鉬納米粒子-牛血清白蛋白核殼結(jié)構(gòu)水溶液。
[0011](二)本發(fā)明的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料的過氧化物酶活性
本發(fā)明所述的一種牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料模擬過氧化物酶，能催化過氧化氫氧化3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽顯色。具體地說，通過牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料催化過氧化物酶底物3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽產(chǎn)生藍(lán)色底物，驗證和比較其過氧化物酶活性。在磷酸鹽緩沖液中依次加入過氧化氫、3，3’，5，5’-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽和牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料水溶液，混合后溫浴10分鐘，目視觀察顏色的變化或測定652 nm波長處的吸光度值(A652 )。根據(jù)溶液顏色或通過吸光度值標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較過氧化酶活性。
[0012]本發(fā)明的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料模擬過氧化物酶催化過氧化氫氧化3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽生成藍(lán)色產(chǎn)物，該產(chǎn)物在652 nm處有最大吸收峰或者牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料催化過氧化氫氧化3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽的活性在pH=4.5、45 °C時達(dá)到最大。
[0013]本發(fā)明的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料模擬過氧化物酶對3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽的米氏常數(shù)為0.054 mmol/L,對過氧化氫的米氏常數(shù)為14.18 mmol/L。
[0014]本發(fā)明的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料模擬過氧化物酶在-95 °C溫度下保存2小時后催化活性均無明顯變化，具有良好的穩(wěn)定性或者在pH 2-12保存2小時后催化活性均無明顯變化，具有良好的穩(wěn)定性。
[0015]本發(fā)明的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料模擬過氧化物酶在2 mol/L氯化鈉溶液中保存2小時后催化活性仍無明顯變化，具有良好的穩(wěn)定性或者具有良好的短期室溫穩(wěn)定性，在24小時內(nèi)催化活性無明顯變化。
[0016]本發(fā)明的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料模擬過氧化物酶具有良好的短期室溫穩(wěn)定性，在24小時內(nèi)催·化活性無明顯變化。具有良好的長期穩(wěn)定性，在室溫下保存30天后，相對催化活性可達(dá)到98.9%。
[0017]本發(fā)明的優(yōu)點:
(I)本發(fā)明所使用的制備方法簡便快速，無需還原劑。
[0018](2)本發(fā)明中的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料具有良好的過氧化物酶活性。
[0019](3)本發(fā)明中的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料穩(wěn)定性好，過氧化物酶活性受貯存溫度、pH值和離子強度的影響小。
[0020](4)本發(fā)明具有良好的長期穩(wěn)定性，在室溫下保存30天后，相對催化活性可達(dá)到98.9%。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0021]圖1為牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料催化過氧化氫氧化3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽顯色體系的紫外吸收光譜圖。
[0022]圖2為牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料終濃度對催化反應(yīng)體系的影響圖。
[0023]圖3為pH值對牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料催化過氧化氫氧化3，3’，5，5’-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽顯色體系的影響圖。
[0024]圖4為溫浴溫度對牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料催化過氧化氫氧化3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽顯色體系的影響圖。
[0025]圖5為牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料對于3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽的穩(wěn)態(tài)動力學(xué)曲線圖。
[0026]圖6為牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料對于過氧化氫的穩(wěn)態(tài)動力學(xué)曲線圖。
[0027]圖7為保存溫度對牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料催化活性的影響圖。
[0028]圖8為保存pH值對牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料催化活性的影響圖。
[0029]圖9為保存鹽濃度對牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料催化活性的影響圖。
[0030]圖10為牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料的短期室溫穩(wěn)定性曲線圖。.【具體實施方式】
[0031]實例1:
在5 ml 50 mg/ml的牛血清白蛋白水溶液中加入16 mmol/L氯鉬酸溶液5 ml和1.5mol/L氫氧化鈉溶液0.5 ml,混勻后水浴80 °C下反應(yīng)2 h。反應(yīng)后溶液裝入截止分子量為3k的超濾管，6000 r/min離心超濾，并水洗3次。超濾后所得溶液冷凍干燥得到牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料粉末。
[0032]實例2:
在2780 μ L磷酸鹽緩沖液(ρΗ=4.5，20 mmol/L)中依次加入I ml濃度為2 mol/L的過氧化氫、0.2 ml濃度為16 mmol/L的3，3’，5，5’-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽和20 μ L濃度為0.36 mmol/L的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料水溶液，混合后45 °C溫浴10分鐘，溶液由無色變?yōu)樗{(lán)色，在652 nm處有一吸收峰(圖1)。
[0033]實例3:
在2780 μ L磷酸鹽緩沖液(ρΗ=4.5，20 mmol/L)中依次加入I ml濃度為2 mol/L的過氧化氫、0.2 ml濃度為16 mmol/L的3，3’，5，5’-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽和20 μ L不同濃度的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料水溶液，混合后45 °C溫浴10分鐘，測定652 nm波長處吸光度。由圖2可見，顯色產(chǎn)物的吸光度隨著牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料終濃度增大而增大。
[0034]實例4:
在2780 μ L不同pH值的磷酸鹽緩沖液(20 mmol/L)中依次加入I ml濃度為2 mol/L的過氧化氫、0.2 ml濃度為16 mmol/L的3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽和20 μ L濃度為0.36 mmol/L的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料水溶液，混合后45 °C溫浴10分鐘，測定652 nm波長處吸光度。由圖3可見，牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料的相對催化活性在pH=4.5時達(dá)到最大。
[0035]實例5:
在2780 μ L磷酸鹽緩沖液(ρΗ=4.5，20 mmol/L)中依次加入I ml濃度為2 mol/L的過氧化氫、0.2 ml濃度為16 mmol/L的3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽和20 μ L濃度為0.36 mmol/L的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料水溶液，混合后在不同溫度下溫浴10分鐘，測定652 nm波長處吸光度。由圖4可見，牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料的相對催化活性在溫度為45 °C時達(dá)到最大。
[0036]實例6:
在2780 4 1-磷酸鹽緩沖液(？!1=4.5，20 mmol/L)中依次加入I ml不同濃度的過氧化氫、0.2 ml濃度為16 mmol/L的3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽(TMB)和20 μ L濃度為0.36 mmol/L的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料水溶液，混合后45 °C溫浴I分鐘，測定652 nm波長處的吸光度值。通過米氏方程擬合，可以得出牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料對TMB的米氏常數(shù)為0.054 mmol/L (圖5)。
[0037]實例I:
在2780 4 1-磷酸鹽緩沖液(？!1=4.5，20 mmol/L)中依次加入I ml濃度為2 mol/L的過氧化氫、0.2 ml不同濃度的3，3’，5，5’-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽和20 μ L濃度為0.36 mmol/L的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料水溶液，混合后45 °C溫浴I分鐘，測定652 nm波長處的吸光度值。通過米氏方程擬合，可以得出牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料對過氧化氫的米氏常數(shù) 為14.18 mmol/L (圖6)。
[0038]實例8:
將牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料水溶液置于不同溫度下保存2小時后，測定保存溫度對其相對催化活性的影響。在2780 μ L磷酸鹽緩沖液(ρΗ=4.5，20 mmol/L)中依次加入I ml濃度為2 mol/L的過氧化氫、0.2 ml濃度為16 mmol/L的3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽和20 μ L濃度為0.36 mmol/L的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料水溶液，混合后45°C溫浴10分鐘，測定652 nm波長處的吸光度值。由圖7可見，牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料在-95 °C溫度下保存2小時后催化活性均無明顯變化，具有良好的穩(wěn)定性。
[0039]實例9:
將牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料水溶液置于不同pH條件下保存2小時后，測定保存溫度對其相對催化活性的影響。在2780 μ L磷酸鹽緩沖液(ρΗ=4.5，20 mmol/L)中依次加Λ I ml濃度為2 mol/L的過氧化氫、0.2 ml濃度為16 mmol/L的3，3’，5, 5’-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽和20 μ L濃度為0.36 mmol/L的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料水溶液，混合后45 °C溫浴10分鐘，測 定652 nm波長處的吸光度值。由圖8可見，牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料在PH 2-12保存2小時后催化活性均無明顯變化，具有良好的穩(wěn)定性。
[0040]實例10:
將牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料水溶液置于不同濃度氯化鈉條件下保存2小時后，測定保存溫度對 其相對催化活性的影響。在2780 4 1-磷酸鹽緩沖液(？!1=4.5，20 mmol/L)中依次加入I ml濃度為2 mol/L的過氧化氫、0.2 ml濃度為16 mmol/L的3，3’，5，5’-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽和20 μ L濃度為0.36 mmol/L的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料水溶液，混合后45 °C溫浴10分鐘，測定652 nm波長處的吸光度值。由圖9可見，牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料在高達(dá)2 mol/L氯化鈉溶液中保存2小時后催化活性仍無明顯變化，具有良好的穩(wěn)定性。
[0041]實例11:
將牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料水溶液置于室溫下保存不同時間后，測定其相對催化活性。在2780 μ L磷酸鹽緩沖液(ρΗ=4.5，20 mmol/L)中依次加入I ml濃度為2 mol/L的過氧化氫、0.2 ml濃度為16 mmol/L的3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽和20 μ L濃度為0.36 mmol/L的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料水溶液，混合后45 °C溫浴10分鐘，測定652 nm波長處的吸光度值。由圖10可見，牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料具有良好的短期室溫穩(wěn)定性，在24小時內(nèi)催化活性無明顯變化。
[0042]實例12:
將牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料水溶液置于室溫下保存30天后，測定其相對催化活性。在2780 4 1磷酸鹽緩沖液(？!1=4.5，20 mmol/L)中依次加入I ml濃度為2 mol/L的過氧化氫、0.2 ml濃度為16 mmol/L的3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽和20 μ L濃度為0.36 mmol/L的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料水溶液，混合后45 °C溫浴10分鐘，測定652 nm波長處的吸光度值。結(jié)果表明牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料具有良好的長期穩(wěn)定性，在室溫下保存30天后，相對催化活性可達(dá)到98.9%。
[0043]以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改，等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料模擬過氧化物酶，其牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料由下述方法制備而成的:在牛血清白蛋白水溶液中加入氯鉬酸水溶液，混勻后加入氫氧化鈉水溶液得混合溶液，水浴加熱；將此溶液經(jīng)過超濾并水洗，得到牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料水溶液；模擬過氧化酶活性特征為:在磷酸鹽緩沖液中依次加入過氧化氫、3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽和牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料水溶液，混合后溫浴，溶液由無色變?yōu)樗{(lán)色，在652 nm處有一吸收峰。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料模擬過氧化物酶，其特征是在2780 μ L ρΗ=4.5，20 mmol/L的磷酸鹽緩沖液中依次加入I ml濃度為2 mo I/L的過氧化氫、0.2 ml濃度為16 mmol/L的3，3’，5，5’-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽和20 μ L濃度為0.36 mmol/L的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料水溶液，混合后45 °C溫浴10分鐘，溶液由無色變?yōu)樗{(lán)色。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料模擬過氧化物酶，其特征是所述的牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料由以下方法制備:在5 ml 50 mg/ml的牛血清白蛋白水溶液中加入16 mmol/L氯鉬酸溶液5 ml和1.5 mol/L氫氧化鈉溶液0.5 ml,混勻后水浴80 °C下反應(yīng)2 h;反應(yīng)后溶液裝入截止分子量為3k的超濾管，6000 r/min離心超濾，并水洗3次。
4.一種牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料模擬過氧化物酶的制備方法，包括如下步驟:在濃度為牛血清白蛋白水溶液中加入氯鉬酸水溶液，混勻后加入氫氧化鈉水溶液得混合溶液，水浴加熱，混合溶液在加熱反應(yīng)后其氯鉬酸的三個吸收峰消失；將此溶液經(jīng)過超濾并水洗，得到鉬納米粒子-牛血清白蛋白核殼結(jié)構(gòu)水溶液。
5.權(quán)利要求1或2或3所述的一種牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料模擬過氧化物酶，在催化過氧化氫氧化3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽顯色中的應(yīng)用。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征是催化過氧化氫氧化3，3’，5，5’-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽生成藍(lán)色產(chǎn)物，該產(chǎn)物在652 nm處有最大吸收峰；牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料催化過氧化氫氧化3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽的活性在pH=4.5、45 1:時達(dá)到最大。
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的應(yīng)用，其特征是牛血清白蛋白-鉬復(fù)合納米材料對3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽的米氏常數(shù)為0.054 mmol/L，對過氧化氫的米氏常數(shù)為14.18 mmol /I,η
8.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的應(yīng)用，其特征是在95°C溫度下或者在pH 2?12保存2小時后催化活性均無明顯變化，具有良好的穩(wěn)定性。
9.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的應(yīng)用，其特征是在2mol/L氯化鈉溶液中保存2小時后催化活性仍無明顯變化，具有良好的穩(wěn)定性。
10.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的應(yīng)用，其特征是具有良好的短期室溫穩(wěn)定性，在24小時內(nèi)催化活性無明顯變化；具有良好的長期穩(wěn)定性，在室溫下保存30天后，相對催化活性可達(dá)到98.9%ο
【文檔編號】C07K14/765GK103433484SQ201310368447
【公開日】2013年12月11日 申請日期:2013年8月22日 優(yōu)先權(quán)日:2013年8月22日
【發(fā)明者】陳偉, 何少斌, 鄧豪華, 劉愛林, 林新華, 李光文 申請人:福建醫(yī)科大學(xué)