醫(yī)用水凝膠組合物，醫(yī)用水凝膠及其制備方法與應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種醫(yī)用水凝膠組合物，醫(yī)用水凝膠及其制備方法與應(yīng)用，所述醫(yī)用水凝膠組合物包括：第一組分和第二組分，所述第一組分包括聚賴氨酸和聚乙烯亞胺；所述第二組分包括四臂?聚乙二醇?琥珀酰亞胺戊二酸酯、四臂?聚乙二醇?琥珀酰亞胺丁二酸酯、四臂?聚乙二醇?琥珀酰亞胺碳酸酯中的一種或幾種，其中，所述聚賴氨酸的聚合度為20以上，優(yōu)選為25?35。本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠的溶脹度低，僅為?10～50％，可應(yīng)用在腦、脊椎以及周圍神經(jīng)分布密集的狹小部位。并且本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠的生物相容性好，具有良好的抗菌性和生物降解性。另外，本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠對組織也無刺激。
【專利說明】
醫(yī)用水凝膠組合物，醫(yī)用水凝膠及其制備方法與應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種醫(yī)用水凝膠組合物，醫(yī)用水凝膠及其制備方法與應(yīng)用，屬于生物 醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 在臨床上，醫(yī)用水凝膠可被用于體內(nèi)創(chuàng)面的封閉、防粘連或載藥等領(lǐng)域。水凝膠， 是以水為分散介質(zhì)的凝膠，具有三維空間網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，其不能在水中溶解，能夠在水中溶脹， 吸收大量的水分，使水凝膠體積增大。但是，在腦、脊椎以及周圍神經(jīng)分布密集的狹小部位， 高溶脹性的水凝膠則會對周圍神經(jīng)造成壓迫，而可能干擾機(jī)體的正常功能，嚴(yán)重時(shí)周圍組 織可能出現(xiàn)壓迫性壞死。
[0003] 目前在臨床上的醫(yī)用水凝膠大部分具有高溶脹度，比如Coseal混合膠、Duraseal 混合膠，根據(jù)記載（Evaluation of Absorbable Surgical Sealants: In vitro Testing) 這兩種膠具有極高的溶脹度，分別在PBS溶液中浸泡三天，重量相應(yīng)增加了558%，98%。
[0004] 專利文件CN101843925A提供了一種低溶脹水凝膠，水凝膠的溶脹度大約-50%至 大約50%，但是該專利中使用的原料是三賴氨酸，價(jià)格昂貴，并且所制得的低溶脹水凝膠呈 堿性，由于在人體中，大部分組織的環(huán)境為中性，若植入物為堿性，則對周圍細(xì)胞會產(chǎn)生較 為嚴(yán)重的刺激作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 發(fā)明要解決的問題
[0006] 針對上述現(xiàn)有技術(shù)中的各種問題，需要提供一種生物相容性好、溶脹度低，具有良 好的生物降解性并且成本較低的醫(yī)用水凝膠組合物及由該醫(yī)用水凝膠組合物制備得到的 醫(yī)用水凝膠。進(jìn)一步地，還提供一種對組織無刺激的醫(yī)用水凝膠。
[0007] 用于解決問題的方案
[0008] 本發(fā)明提供一種醫(yī)用水凝膠組合物，包括第一組分和第二組分，所述第一組分包 括聚賴氨酸和聚乙烯亞胺;所述第二組分包括四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺戊二酸酯、四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺丁二酸酯、四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺碳酸酯中的一種或幾種，其 中，所述聚賴氨酸的聚合度為20以上，優(yōu)選為25~35。
[0009] 根據(jù)本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠組合物，其中，在所述第一組分中，所述聚賴氨酸與所述 聚乙烯亞胺的質(zhì)量比為0.1~10。
[0010] 根據(jù)本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠組合物，其中，所述聚賴氨酸為ε-聚賴氨酸和/或聚-L- 賴氨酸。
[0011] 根據(jù)本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠組合物，其中，所述ε-聚賴氨酸的重均分子量為3000~ 5000Da〇
[0012] 根據(jù)本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠組合物，其中，所述聚-L-賴氨酸的重均分子量為7500~ 300000Da，優(yōu)選 100000 ~200000Da。
[0013] 根據(jù)本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠組合物，其中，所述聚乙烯亞胺的數(shù)均分子量為1000~ 3500Da，優(yōu)選為 1500 ~2000Da。
[0014] 根據(jù)本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠組合物，其中，所述四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺戊二酸 酯、四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺丁二酸酯和四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺碳酸酯的重均分子 量均為 2000 ~40000Da，優(yōu)選為 10000 ~20000Da。
[0015] 本發(fā)明提供一種醫(yī)用水凝膠，其由本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠組合物的第一組分和第二 組分反應(yīng)后形成；優(yōu)選地，所述醫(yī)用水凝膠由所述第一組分和所述第二組分在緩沖溶液中 反應(yīng)后形成。
[0016] 根據(jù)本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠，其中，所述醫(yī)用水凝膠由所述第一組分溶于第一緩沖 溶液中，所述第二組分溶于第二緩沖溶液中，然后混合、反應(yīng)后形成。
[0017] 根據(jù)本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠，其中，所述醫(yī)用水凝膠的溶脹度為-10~50%，優(yōu)選為5 ~47% 〇
[0018] 根據(jù)本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠，其中，所述醫(yī)用水凝膠浸泡于水中后，浸泡液的pH值為 7~9.5,優(yōu)選7~8。根據(jù)本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠，其特征在于，所述第一緩沖溶液的pH值為7.0 ~7.4或9.1~10.0，優(yōu)選7.0~7.4;所述第二緩沖溶液的pH值為5.0~6.0或7.0~7.4，優(yōu)選 7.0~7.4 〇
[0019] 本發(fā)明還提供一種根據(jù)本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠的制備方法，包括以下步驟：
[0020] 將所述第一組分溶于第一緩沖溶液中，得到第一混合液；
[0021 ]將所述第二組分溶于第二緩沖溶液中，得到第二混合液；
[0022] 將所述第一混合液和第二混合液混合，得到醫(yī)用水凝膠。
[0023] 根據(jù)本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠的制備方法，其中，所述第一混合液中，所述聚賴氨酸的 濃度為1~50mg/mL，所述聚乙稀亞胺的濃度為1~50mg/mL;所述第二混合液中，所述四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺戊二酸酯、四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺丁二酸酯、四臂-聚乙二醇-琥 珀酰亞胺碳酸酯或其混合物的濃度為100~200mg/mL，所述第一混合液與所述第二混合液 等體積混合，得到醫(yī)用水凝膠。
[0024]根據(jù)本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠的制備方法，其中，所述第二混合液中還包括顯色劑，優(yōu) 選地，所述顯色劑包括FD&C Blue#l、FD&C Blue#2、亞甲基藍(lán)中的一種或幾種。
[0025] 本發(fā)明還提供一種醫(yī)用水凝膠試劑盒，其包括本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠組合物以及用 于溶解醫(yī)用水凝膠組合物的各組分的緩沖溶液。
[0026] 根據(jù)本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠試劑盒，其中，所述醫(yī)用水凝膠組合物的第一組分與第 二組分是分開儲存的；優(yōu)選地，所述醫(yī)用水凝膠組合物的第一組分中的聚賴氨酸和聚乙烯 亞胺是分開儲存的。
[0027] 本發(fā)明還提供一種根據(jù)本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠在止血輔助物、防止肺部漏氣或腦脊 液泄漏制品、防粘連制品中的應(yīng)用。
[0028] 發(fā)明的效果
[0029]在本發(fā)明中，所制備得到的醫(yī)用水凝膠的溶脹度低，僅為-10%~50%，可應(yīng)用在 腦、脊椎以及周圍神經(jīng)分布密集的狹小部位。本發(fā)明制備得到的醫(yī)用水凝膠的生物相容性 好，且具有良好的抗菌性和生物降解性。另外，本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠也能夠具備對組織也無 刺激的效果。
【附圖說明】
[0030]圖1是細(xì)胞在實(shí)施例1的醫(yī)用水凝膠I的浸提液中培養(yǎng)24h的生長狀態(tài)；
[0031]圖2是細(xì)胞在實(shí)施例4的醫(yī)用水凝膠IV的浸提液中培養(yǎng)24h的生長狀態(tài)；
[0032] 圖3是五周解剖時(shí)大鼠皮下植入實(shí)施例4的醫(yī)用水凝膠IV的降解情況；
[0033] 圖4是五周解剖時(shí)大鼠皮下植入對比例4的醫(yī)用水凝膠XI的降解情況；
[0034] 圖5是五周解剖時(shí)大鼠皮下植入實(shí)施例4的醫(yī)用水凝膠IV的部位組織切片圖；
[0035] 圖6是五周解剖時(shí)大鼠皮下植入對比例4的醫(yī)用水凝膠XI的部位組織切片圖；
[0036] 圖7為將試驗(yàn)動物狗的硬腦膜切開的圖片；
[0037] 圖8為試驗(yàn)動物狗的硬腦膜縫合后的圖片；
[0038] 圖9為試驗(yàn)動物狗的硬腦膜縫合后注入醫(yī)用水凝膠的圖片；
[0039]圖10為試驗(yàn)動物狗的硬腦膜注膠后放回顱骨的圖片；
[0040] 圖11為喂養(yǎng)4周后，試驗(yàn)動物狗的硬腦膜的切口位置的愈合情況修復(fù)效果圖。
【具體實(shí)施方式】
[0041] 本發(fā)明提供一種醫(yī)用水凝膠組合物以及由該醫(yī)用水凝膠組合物的不同組分反應(yīng) 獲得的醫(yī)用水凝膠。本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠組合物主要包括含有親核試劑的第一組分和含有 親電試劑的第二組分，所述親核試劑包括聚賴氨酸和聚乙烯亞胺(PEI)，所述親電試劑包括 四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺戊二酸酯(4-arms-PEG-SG)、四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺丁二 酸酯(4-arms-PEG-SS)、四臂-聚乙二醇-琥泊酰亞胺碳酸酯(4-arms-PEG-SC)中的一種或幾 種。
[0042] 其中，所述第一組分和第二組分可以是分離的，在使用時(shí)將第一組分和第二組分 混合。優(yōu)選地，所述第一組分中的聚賴氨酸和聚乙烯亞胺(PEI)也是分離的，在使用之前幾 個(gè)小時(shí)或使用時(shí)將聚賴氨酸和聚乙烯亞胺(PEI)混合。
[0043]在實(shí)際應(yīng)用的過程中，聚賴氨酸和聚乙烯亞胺(PEI)可以分別單獨(dú)儲存，使用前或 使用時(shí)再溶解于同一溶劑中。為了使用方便，也可以將聚賴氨酸在溶劑中預(yù)先溶解的形式 儲存，例如可以溶解到少量的緩沖溶液中，使用前采用緩沖溶液進(jìn)行稀釋，也可以按照使用 時(shí)的濃度溶解于緩沖溶液中儲存。使用時(shí)，將溶解于緩沖溶液中的聚賴氨酸與聚乙烯亞胺 (PEI)混合。所述第二組分在使用前或使用時(shí)再溶解于溶劑中。本發(fā)明對所述的醫(yī)用水凝膠 組合物中的各組分的儲存方式?jīng)]有限制，所屬技術(shù)領(lǐng)域人員可以根據(jù)需要，選擇具體的儲 存方式，均在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
[0044] 所述聚賴氨酸可以為ε-聚賴氨酸和/或聚-L-賴氨酸，所述聚賴氨酸的聚合度為20 以上，優(yōu)選25~35之間。本發(fā)明加入聚合度在20以上的聚賴氨酸，能夠增大交聯(lián)密度，使平 衡溶脹度降低。其中，ε-聚賴氨酸的重均分子量優(yōu)選為3000~5000Da，聚-L-賴氨酸的重均 分子量優(yōu)選為7500~300000Da，優(yōu)選為100000~200000Da。所述聚乙烯亞胺(PEI)的數(shù)均分 子量為1000~3500Da，優(yōu)選為1500~2000Da。
[0045] 其中，所述聚賴氨酸與所述聚乙烯亞胺的質(zhì)量比為0.1~10。
[0046]本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠組合物的第二組分包含的四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺戊二 酸酯、四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺丁二酸酯和四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺碳酸酯的分子量 均為 2000 ~40000Da，優(yōu)選為 10000 ~20000Da。
[0047] 本發(fā)明所述的聚賴氨酸(包括ε-聚賴氨酸和聚-L-賴氨酸），可以以其鹽酸鹽、氫溴 酸鹽或其他鹽的形式存在，均在本發(fā)明所述范圍內(nèi)。
[0048] 本發(fā)明還提供一種醫(yī)用水凝膠，其由本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠組合物的第一組分溶于 第一緩沖溶液中，醫(yī)用水凝膠組合物的第二組分溶于第二緩沖溶液中，然后再進(jìn)行混合、反 應(yīng)后形成。
[0049] 根據(jù)本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠，其中，所述醫(yī)用水凝膠的溶脹度為-10~50%，優(yōu)選為5 ~47% 〇
[0050] 本發(fā)明所述的醫(yī)用水凝膠的溶脹度是指，當(dāng)交聯(lián)有效完成時(shí)其形成的時(shí)刻和將其 以自由狀態(tài)放在生理鹽水或I3BS溶液中24小時(shí)后的時(shí)刻（在該時(shí)間點(diǎn)可以合理地假設(shè)水凝 膠已經(jīng)達(dá)到了其平衡溶脹的狀態(tài))之間的體積或重量的變化?？梢杂靡韵鹿奖硎荆?br>[0051] 溶脹度％ =[(在24h的重量-初始形成重量)/初始形成重量]X 100%
[0052] 根據(jù)所述醫(yī)用水凝膠組合物中的第一組分和第二組分混合后形成的醫(yī)用水凝膠， 將該醫(yī)用水凝膠浸泡于水中時(shí)，所得到的浸泡液的pH值為7~9.5,優(yōu)選7~8。
[0053]本發(fā)明所述的醫(yī)用水凝膠的酸堿性(pH值)或所述浸泡液的pH值，是通過以下方法 測得:將一定量醫(yī)用水凝膠置于純水中，純水的重量為醫(yī)用水凝膠的80倍，恒溫37°C放置 24h，測試浸泡液的pH值。
[0054]優(yōu)選地，用于溶解所述親核試劑的第一緩沖溶液的pH值為7.0~7.4或9.1~10.0， 用于溶解所述親電試劑的第二緩沖溶液的pH值為5.0~6.0或7.0~7.4。
[0055] 溶解親核組分、親電組分使用的溶劑pH值對所制成的膠的pH有較大影響。當(dāng)用于 溶解所述親核試劑的緩沖溶液的PH值為7.0~7.4時(shí)，所制得的醫(yī)用水凝膠接近中性，對組 織的刺激性小，有利于細(xì)胞、組織的生長。當(dāng)溶解親核試劑和親電試劑的緩沖溶液的PH值均 為7.0~7.4時(shí)，所制得的醫(yī)用水凝膠呈現(xiàn)中性，對組織和細(xì)胞沒有刺激性，更適合細(xì)胞、組 織的生長。
[0056] 本發(fā)明還提供一種醫(yī)用水凝膠的制備方法，
[0057] 將第一組分溶于第一緩沖溶液中，得到第一混合液；
[0058] 將第二組分溶于第二緩沖溶液中，得到第二混合液；
[0059] 將第一混合液和第二混合液混合，得到醫(yī)用水凝膠；
[0060] 其中，所述第一組分包括聚賴氨酸和聚乙烯亞胺;所述第二組分包括四臂-聚乙二 醇-琥珀酰亞胺戊二酸酯、四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺丁二酸酯、四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞 胺碳酸酯中的一種或幾種。
[0061] 本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠組合物中的第一混合液和第二混合液混合后，例如可以使用 雙聯(lián)混合器混合，第一混合液中的親核試劑(聚賴氨酸和聚乙烯亞胺)與第二混合液中的親 電試劑（四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺戊二酸酯、四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺丁二酸酯、四 臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺碳酸酯中的一種或幾種)發(fā)生邁克爾加成反應(yīng)，可以快速成膠，即 生成本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠。該醫(yī)用水凝膠具有低溶脹的優(yōu)良性質(zhì)，并且具有良好的生物相 容性、降解性和抗菌效果。
[0062]優(yōu)選地，用于溶解所述親核試劑的第一緩沖溶液的pH值為7.0~7.4或9.1~10.0， 用于溶解所述親電試劑的第二緩沖溶液的pH值為5.0~6.0或7.0~7.4。進(jìn)一步地，當(dāng)用于 溶解所述親核試劑的第一緩沖溶液的pH值為7.0~7.4,得到的醫(yī)用水凝膠呈中性。
[0063]優(yōu)選地，在第一混合液中，所述聚賴氨酸濃度為1~50mg/mL，所述聚乙烯亞胺的濃 度為1~50mg/mL;在第二混合液中，所述四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺戊二酸酯、四臂-聚乙 二醇-琥珀酰亞胺丁二酸酯、四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺碳酸酯或其混合物的濃度為100~ 200mg/mL，所述第一混合液與所述第二混合液等體積混合，得到醫(yī)用水凝膠。
[0064] 在本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠組合物中，進(jìn)一步地，可以在包含親電試劑的第二混合液 中加入藍(lán)色顯色劑，可選擇的藍(lán)色顯色劑包括:FD&C Blue#l、FD&C Blue#2、亞甲基藍(lán)等。
[0065] 本發(fā)明還提供一種醫(yī)用水凝膠試劑盒，其包括根據(jù)本發(fā)明所述的醫(yī)用水凝膠組合 物以及本發(fā)明的第一緩沖溶液和第二緩沖溶液。
[0066] 根據(jù)本發(fā)明所述的醫(yī)用水凝膠試劑盒，其包括:第一組分、第二組分、第一緩沖溶 液和第二緩沖溶液，所述第一組分包括聚賴氨酸和聚乙烯亞胺;所述第二組分包括四臂-聚 乙二醇-琥珀酰亞胺戊二酸酯、四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺丁二酸酯、四臂-聚乙二醇-琥珀 酰亞胺碳酸酯中的一種或幾種，其中，所述聚賴氨酸的聚合度為20以上，優(yōu)選為25~35。
[0067] 根據(jù)本發(fā)明所述的醫(yī)用水凝膠試劑盒，其中，所述第一組分和第二組分可以是分 開儲存的，在使用時(shí)將第一組分和第二組分混合。優(yōu)選地，所述第一組分中的親核試劑聚賴 氨酸和聚乙烯亞胺(PEI)也可以分開儲存，在使用之前幾個(gè)小時(shí)或使用時(shí)將聚賴氨酸和聚 乙烯亞胺(PEI)混合。
[0068]在具體的醫(yī)用水凝膠試劑盒中，聚賴氨酸和聚乙烯亞胺(PEI)可以分別單獨(dú)儲存， 使用前或使用時(shí)再溶解于同一溶劑中。為了不同的使用需要，可以將聚賴氨酸預(yù)先溶解于 第一緩沖溶液中儲存，例如可以溶解到少量的第一緩沖溶液中，使用前進(jìn)行稀釋，也可以按 照使用時(shí)的濃度溶解于第一緩沖溶液中儲存。使用時(shí)，將溶解于第一緩沖溶液中的聚賴氨 酸與未溶解的聚乙烯亞胺(PEI)混合。
[0069] 另外，本發(fā)明的第二組分可以單獨(dú)儲存，使用前溶解于溶劑中。本發(fā)明對所述的醫(yī) 用水凝膠試劑盒中各組分的儲存方式和使用方式?jīng)]有限制，可以根據(jù)需要，選擇適合的儲 存方式和使用方式。
[0070] 本發(fā)明所述的醫(yī)用水凝膠可用于止血輔助物、防止肺部漏氣或腦脊液泄漏制品、 防粘連制品等，如:動靜脈重建縫線針眼封堵、硬腦膜縫合針眼封堵、硬腦膜重建貼合封堵、 防止肺切除術(shù)后肺漏氣、脊椎硬膜部位防粘連等應(yīng)用中。
[0071] 實(shí)施例
[0072] 下面將結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明的實(shí)施方案進(jìn)行詳細(xì)描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將會 理解，下列實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限定本發(fā)明的范圍。實(shí)施例中未注明具體 條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為 可以通過市購獲得的常規(guī)產(chǎn)品。
[0073] 4-arms-PEG-SG(北京鍵凱科技有限公司）、4-arms-PEG-SS(北京鍵凱科技有限公 司）、4-arms-PEG-SC(北京鍵凱科技有限公司）、ε-聚賴氨酸(上海研拓生物科技有限公司）、 聚-L-賴氨酸(上海紀(jì)寧實(shí)業(yè)有限公司）、聚乙烯亞胺(陶氏化學(xué)（中國）有限公司）、三賴氨酸 (sigma公司）、4-arm-PEG-SH(北京鍵凱科技有限公司）
[0074] 實(shí)施例1
[0075] 取0.5g的4-arms-PEG-SG(重均分子量15kDa，下同）溶于5mL的pH為5.60的酸性磷 酸氫二鈉緩沖溶液中，得到濃度為IOOmg/mL的溶液A;取2Omg的ε -聚賴氨酸（重均分子量 3500Da，聚合度25~35,下同）和80mg的聚乙稀亞胺(數(shù)均分子量1800Da，下同）溶于5mL的pH 為9.90的堿性緩沖溶液中，得到濃度為20mg/mL的溶液B;將溶液A和溶液B通過雙聯(lián)混合器 同等劑量噴出，形成醫(yī)用水凝膠I。
[0076] 實(shí)施例2
[0077] 取0.5g的4-arms-PEG-SG溶于5mL的pH為5.60的酸性磷酸氫二鈉緩沖溶液中，得到 濃度為l〇〇mg/mL的溶液A;取50mg的ε-聚賴氨酸和50mg的聚乙稀亞胺溶于5mL的pH為7.4的 生理鹽水中，得到濃度為20mg/mL的溶液B;將溶液A和溶液B通過雙聯(lián)混合器同等劑量噴出， 形成醫(yī)用水凝膠II。
[0078] 實(shí)施例3
[0079] 取0.75g的4-arms-PEG-SG溶于5mL pH為5.60的酸性磷酸氫二鈉緩沖溶液中，得到 濃度為150mg/mL的溶液A，在溶液A中加入ro&C Blue#l顯色劑；取IOOmg聚-L-賴氨酸（重均 分子量150kDa)和25mg的聚乙烯亞胺溶于5mL的pH為7.4的生理鹽水中，得到濃度為251^/11^ 的溶液B;將溶液A和溶液B通過雙聯(lián)混合器同等劑量噴出，形成醫(yī)用水凝膠III。
[0080] 實(shí)施例4
[0081 ] 取0 · 5g的4-arms-PEG-SG溶于2 · 5mL的pH為7 · 4的生理鹽水中，得到濃度為200mg/ mL的溶液A，在溶液A中加入FD&C Blue#l顯色劑；取IOmg的ε-聚賴氨酸和90mg的聚乙烯亞胺 溶于2.5mL的pH為7.4的生理鹽水中，得到濃度為40mg/mL的溶液B;將溶液A和溶液B通過雙 聯(lián)混合器同等劑量噴出，形成醫(yī)用水凝膠IV。
[0082] 實(shí)施例5
[0083] 取0 · 25g的4-arms-PEG-SS(重均分子量15kDa，下同）溶于2 · 5mL的pH為7 · 4的生理 鹽水中，得到濃度為lOOmg/mL的溶液A，在溶液A中加入ro&C Blue#l顯色劑;取5mg的ε-聚賴 氨酸和45mg的聚乙烯亞胺溶于2.5mL的pH為7.4的生理鹽水中，得到濃度為2〇11^/1^的溶液 B;將溶液A和溶液B通過雙聯(lián)混合器同等劑量噴出，形成醫(yī)用水凝膠V。
[0084] 實(shí)施例6
[0085] 取0 · 25g的4-arms-PEG-SS和0 · 25g的4-arms-PEG-SC(重均分子量 15kDa，下同）溶 于2.5mL的pH為5.60的酸性磷酸氫二鈉緩沖溶液中，得到濃度為200mg/mL的溶液A，在溶液A 中加入ro&C Blue#l顯色劑；取IOOmg的L-聚賴氨酸和25mg的聚乙烯亞胺溶于2.5mL的pH為 7.4的生理鹽水中，得到濃度為50mg/mL的溶液B;將溶液A和溶液B通過雙聯(lián)混合器同等劑量 噴出，形成醫(yī)用水凝膠VI。
[0086] 實(shí)施例7
[0087] 取0.5g的4-arms-PEG-SC溶于5 .OmL的pH為7.4的生理鹽水中，得到濃度為IOOmg/ HiL的溶液A，在溶液A中加入FD&C Blue#l顯色劑;取60mg的ε-聚賴氨酸和90mg的聚乙烯亞胺 溶于5. OmL的pH為7.4的生理鹽水中，得到濃度為30mg/mL的溶液B;將溶液A和溶液B通過雙 聯(lián)混合器同等劑量噴出，形成醫(yī)用水凝膠VII。
[0088] 對比例1
[0089] 取0.5g的4-arm-PEG-SH(重均分子量15kDa)溶于2.5mL pH為6.0的磷酸二氫鈉的 緩沖溶液中，得到濃度為200mg/mL的溶液A;取0.5g的4-arms-PEG-SG溶于2.5mL pH為9.6的 磷酸氫二鈉一碳酸鈉緩沖溶液中，得到濃度為200mg/mL的溶液B。將溶液A和溶液B通過雙聯(lián) 混合器噴出，形成醫(yī)用水凝膠VIII。
[0090] 對比例2
[0091] 使用購買的Duraseal注射器(所述注射器是雙聯(lián)注射器，其中包含有親核試劑及 用于溶解所述親核試劑的緩沖溶液1，親電試劑及用于溶解所述親電試劑的緩沖溶液2,具 體的所述親核試劑是三賴氨酸，緩沖溶液1是PH約為10的硼酸鹽緩沖溶液;所述親電試劑是 4-arm-PEG-SG，緩沖溶液2是pH約為4.5的磷酸鹽緩沖溶液），通過雙聯(lián)混合器將溶解在緩沖 溶液1中的親核試劑和溶解在緩沖溶液2中的親電試劑同等劑量噴出，形成醫(yī)用水凝膠IX。
[0092] 對比例3
[0093] 取0 · 5g的4-arm-PEG-SG溶于2 · 5mL的pH為7 · 4的生理鹽水中，得到濃度為200mg/mL 的溶液A;取0.1 g的聚乙烯亞胺溶于2.5mL的pH為7.4的生理鹽水中，得到濃度為40mg/mL的 溶液B;將溶液A和溶液B通過雙聯(lián)混合器同等劑量噴出，形成醫(yī)用水凝膠X。
[0094] 對比例4
[0095] 取0 · 5g的4-arm-PEG-SG溶于2 · 5mL的pH為6 ·0的磷酸二氫鈉的緩沖溶液中，得到濃 度為200mg/mL的溶液A;取0.1 g的ε-聚賴氨酸溶于2.5mL的pH為9.6的磷酸氫二鈉-碳酸鈉緩 沖溶液中，得到濃度為40mg/mL的溶液B。將溶液A和溶液B通過雙聯(lián)混合器同等劑量噴出，形 成醫(yī)用水凝膠XI。
[0096] 測定實(shí)施例1-7制備得到的醫(yī)用水凝膠I-VII以及對比例1-2制備得到的醫(yī)用水凝 膠VIII-IX的溶脹度，并且將上述醫(yī)用水凝膠浸泡于純水中，測定所得到的浸泡液的pH值， 結(jié)果如下表1所示：
[0097] 表 1
[0099] 從上述結(jié)果可以看出，本發(fā)明實(shí)施例1-7所制備得到的醫(yī)用水凝膠I-VII的溶脹度 遠(yuǎn)低于對比例1-2制備得到的醫(yī)用水凝膠VIII-IX。在實(shí)施例1-7中，交聯(lián)密度增大，平衡溶 脹度相比對比例1-2更低。
[0100] 在實(shí)施例1和對比例1 -2中溶解親電組分、親核組分的溶劑分別為酸性溶液、堿性 溶液，其所對應(yīng)的醫(yī)用水凝膠的浸泡液均為堿性。在實(shí)施例2-7中，用于溶解親核組分的緩 沖溶液為中性，制得的醫(yī)用水凝膠的浸泡液為中性。上述結(jié)果表明親核組分的溶液試劑為 中性時(shí)，所制備的醫(yī)用水凝膠的浸泡液為中性，更接近人體生理環(huán)境，因此該條件制備的醫(yī) 用水凝膠在使用時(shí)更安全。
[0101] 細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)
[0102] 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)GB/T16886.5-2005，通過浸提液接觸培養(yǎng)細(xì)胞，對細(xì)胞形態(tài)、增殖觀察， 評價(jià)實(shí)施例1和實(shí)施例4所制備的醫(yī)用水凝膠對體外細(xì)胞的毒性作用。
[0103] 實(shí)驗(yàn)的具體過程為：實(shí)驗(yàn)組：用血清培養(yǎng)基按照0.1g/mL的比例浸提醫(yī)用水凝膠， 所得到的浸提液定義為100%濃度的浸提液;將所述100%濃度的浸提液采用血清培養(yǎng)基進(jìn) 行梯度稀釋，稀釋后的濃度梯度為100%，50%和25%，采用所述濃度梯度的浸提液培養(yǎng)細(xì) 胞;control組:僅采用血清培養(yǎng)基，其余細(xì)胞培養(yǎng)條件與實(shí)驗(yàn)組相同。分別采用實(shí)施例1的 醫(yī)用水凝膠I和實(shí)施例4的醫(yī)用水凝膠IV進(jìn)行浸提液的配制，浸提溫度為(37 士 1)°C，浸提時(shí) 間為(24 ± 2) h，細(xì)胞培養(yǎng)條件:37 °C無菌二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
[0104] 圖1是細(xì)胞在實(shí)施例1的醫(yī)用水凝膠I的浸提液中培養(yǎng)24h的生長狀態(tài)；圖2是細(xì)胞 在實(shí)施例4的醫(yī)用水凝膠IV的浸提液中培養(yǎng)24h的生長狀態(tài)。由圖1可知，實(shí)施例1的醫(yī)用水 凝膠I的浸提液與control組相比，醫(yī)用水凝膠I的100%濃度的浸提液對L929細(xì)胞生長有較 大影響，隨著浸提液濃度的降低，細(xì)胞毒性呈減少趨勢，細(xì)胞的生長狀態(tài)接近c(diǎn)ontrol組細(xì) 胞生長狀態(tài)。實(shí)施例1中所制備的醫(yī)用水凝膠I呈堿性，證明了堿性的浸提液在一定程度上 會影響細(xì)胞的生長。
[0105] 由圖2可知，細(xì)胞在醫(yī)用水凝膠IV的100%濃度的浸提液中生長狀態(tài)接近c(diǎn)ontrol 組，隨著浸提液濃度降低，細(xì)胞毒性呈減少趨勢，細(xì)胞生長呈較好趨勢，細(xì)胞的生長狀態(tài)優(yōu) 于control組細(xì)胞生長狀態(tài)。實(shí)施例4所制備的醫(yī)用水凝膠IV呈中性，從而說明中性pH環(huán)境 的浸提液對L929細(xì)胞生長無任何阻礙作用，中性的醫(yī)用水凝膠在人體使用中更加安全。
[0106] 抗菌性評價(jià)實(shí)驗(yàn)
[0107] 使用瓊脂擴(kuò)散法進(jìn)行抗菌性評價(jià)實(shí)驗(yàn):取已滅菌的肉湯瓊脂培養(yǎng)基溶化后倒入直 徑為IOcm的平皿約20mL，待其凝固，得到瓊脂平板。用滅菌棉簽蘸取實(shí)驗(yàn)菌液均勻涂布于瓊 脂平板上，每塊瓊脂平板上涂布一種實(shí)驗(yàn)菌，然后用直徑為IOmm的無菌鋼圈均勻打孔，每塊 打3個(gè)孔，去除孔內(nèi)瓊脂后將醫(yī)用水凝膠或ε-聚賴氨酸注于孔中，每孔注入相同體積溶液形 成的醫(yī)用水凝膠或ε_聚賴氨酸，37°C恒溫培養(yǎng)24h后取出，結(jié)果可以看出，在每個(gè)孔的外周 均有一個(gè)未生長細(xì)菌的環(huán)，即為抑菌環(huán)。重復(fù)實(shí)驗(yàn)2次，并計(jì)算抑菌環(huán)有效直徑的大小。
[0108] 其中，抑菌環(huán)有效直徑(mm)=抑菌環(huán)實(shí)際直徑(mm)-孔徑（IOmm) 〇
[0109] 結(jié)果判斷：抑菌環(huán)有效直徑小于IOmm為低度敏感或耐藥，抑菌環(huán)有效直徑在10-15mm之間為中度敏感，抑菌環(huán)有效直徑大于15mm為高度敏感。
[0110] 由于ε-聚賴氨酸常態(tài)為粉末，遇水溶解，為了與本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠作更好的對 比，ε-聚賴氨酸采用紙片法，即配制一定濃度的ε-聚賴氨酸溶液(40mg/mL)，將溶液滴在直 徑為8mm的紙片液上，晾干后將晾干的紙片置于營養(yǎng)瓊脂平板中。
[0111] 選擇實(shí)施例4的醫(yī)用水凝膠IV、實(shí)施例5的醫(yī)用水凝膠V、對比例3-4的醫(yī)用水凝膠 X-XI以及ε-聚賴氨酸溶液進(jìn)行抗菌實(shí)驗(yàn)，選用的菌種為金黃色葡萄球菌和大腸桿菌，濃度 約為106cfu/mL。抑菌環(huán)有效直徑的大小如下表2所示：
[0112] 表2

[0114] 從表2可以看出，本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠IV、醫(yī)用水凝膠V相比對比例3和對比例4的 醫(yī)用水凝膠X-XI及ε -聚賴氨酸具有更好的抗菌效果。
[0115] 體外及體內(nèi)降解實(shí)驗(yàn)
[0116] 采用實(shí)施例4的醫(yī)用水凝膠IV進(jìn)行體外及體內(nèi)降解實(shí)驗(yàn)，并在不同的時(shí)間點(diǎn)觀察 醫(yī)用水凝膠IV的降解情況。其中，體外降解實(shí)驗(yàn)的方法如下:將實(shí)施例4中制備得到的溶液A 和溶液B等體積注入直徑為6mm，高為7mm的軟管，制備得到水凝膠。取出水凝膠，將水凝膠放 在透明玻璃瓶中并加入pH值為7.2 ± 0.2的PBS緩沖溶液，完全浸沒水凝膠，密封玻璃瓶，并 將玻璃瓶放置在37 ± TC恒溫箱中，于實(shí)驗(yàn)后一周、三周、五周觀察該水凝膠，并記錄水凝膠 的降解情況，結(jié)果如表3所示。
[0117] 體內(nèi)降解實(shí)驗(yàn)的方法如下:選健康的實(shí)驗(yàn)大鼠8只，隨機(jī)分成4組，每組2只。然后麻 醉大鼠，取實(shí)施例4的醫(yī)用水凝膠IV植入大鼠腹部皮下，閉合創(chuàng)面，正常喂養(yǎng)。于手術(shù)后一 周、三周、五周、三個(gè)月進(jìn)行解剖（每個(gè)時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)選擇一組進(jìn)行解剖），觀察醫(yī)用水凝膠IV 在大鼠體內(nèi)的降解情況，結(jié)果如表3所示。
[0118] 衷3
[0120] 注："一"表示無數(shù)據(jù)。
[0121] 按照上述體外降解實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)降解實(shí)驗(yàn)的方法，分別取實(shí)施例5的醫(yī)用水凝膠V及 實(shí)施例7的醫(yī)用水凝膠VII進(jìn)行體外降解實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)降解實(shí)驗(yàn)，結(jié)果與實(shí)施例4的觀察結(jié)果 (表3) -致。
[0122] 從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠在三周時(shí)仍能夠保持著水凝膠的形態(tài)，五 周時(shí)肉眼已看不到水凝膠，并且三個(gè)月時(shí)水凝膠已經(jīng)完全降解。通常創(chuàng)面愈合需要一定的 時(shí)間，組織粘連、腦脊液泄露一般出現(xiàn)在手術(shù)后兩周左右，本發(fā)明的水凝膠在三周時(shí)仍可以 基本保持水凝膠的形態(tài)，有利于促進(jìn)創(chuàng)面的愈合，降低組織粘連與腦脊液泄露的風(fēng)險(xiǎn)。
[0123] 體內(nèi)降解對比實(shí)驗(yàn)
[0124] 麻醉大鼠，分別取實(shí)施例4醫(yī)用水凝膠IV和對比例4制備的醫(yī)用水凝膠XI移入大鼠 腹部皮下，閉合創(chuàng)面，于手術(shù)后三周、五周、八周進(jìn)行解剖，觀察醫(yī)用水凝膠的降解情況。并 取醫(yī)用水凝膠附近的組織做組織切片，觀察醫(yī)用水凝膠與組織的生物相容性。并根據(jù)炎癥 與壞死評分標(biāo)準(zhǔn)表、以及纖維增生與修復(fù)評分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行綜合評分，綜合評分的計(jì)算方法為： 綜合評分=(炎癥與壞死評分的總計(jì)1)Χ2+(纖維增生與修復(fù)評分的總計(jì)2)，計(jì)算得到的總 分即為綜合評分，所述綜合評分為僅限于植入物周圍面積百分比總分。
[0125] 其中，圖3是五周解剖時(shí)大鼠皮下植入實(shí)施例4的醫(yī)用水凝膠IV的降解情況；圖4是 五周解剖時(shí)大鼠皮下植入對比例4的醫(yī)用水凝膠XI的降解情況。如圖3所示，五周解剖時(shí)大 鼠皮下植入部位有大量的增生毛細(xì)血管，皮下無積液，無壞死；已經(jīng)無法找尋到實(shí)施例4的 醫(yī)用水凝膠IV，降解明顯（圖中黑色粒狀物為縫線）。如圖4所示，五周解剖時(shí)大鼠皮下植入 部位仍舊可以看到對比例4的醫(yī)用水凝膠XI的存在，并且材料降解不明顯（圖中黑色粒狀物 為縫線，囊腫部分為纖維囊包裹未降解的水凝膠）。
[0126] 圖5是五周解剖時(shí)大鼠皮下植入實(shí)施例4的醫(yī)用水凝膠IV的部位組織切片圖（20 X )。如圖5所示，植入材料(實(shí)施例4的醫(yī)用水凝膠IV)呈細(xì)顆粒狀。植入材料周邊可見少量 纖維組織增生，其間可見少量淋巴細(xì)胞浸潤（1-5個(gè)/PHF)，較多巨噬細(xì)胞浸潤（5-10個(gè)/ HPF)，較多毛細(xì)血管增生(4-7個(gè)/HPF)。植入材料周邊可見細(xì)帶狀囊腔壁的纖維化囊腔形 成。其炎癥與壞死評分結(jié)果如表4所示，纖維增生與修復(fù)評分結(jié)果如表5所示，綜合評分為9。
[0127] 表4

[0131] 圖6是五周解剖時(shí)大鼠皮下植入對比例4的醫(yī)用水凝膠XI的部位組織切片圖（20 X )。如圖6所示，植入材料(對比例4的醫(yī)用水凝膠XI)呈碎片狀，內(nèi)部疏松，可見較多成纖維 細(xì)胞長入材料內(nèi)部，殘留材料面積百分比約為1-5%，與周圍組織之間未見明顯空隙。植入 材料周邊可見較多纖維組織增生，其間可見少量淋巴細(xì)胞浸潤（1-5個(gè)/PHF)，較多巨噬細(xì)胞 浸潤(5-10個(gè)/HPF)，少量多核巨細(xì)胞浸潤（1-2個(gè)/HPF)，較多毛細(xì)血管增生(4-7個(gè)/HPF)。植 入材料周邊可見中等厚帶狀的纖維囊形成，較大范圍脂肪細(xì)胞浸潤(21-40%)。其炎癥與壞 死評分結(jié)果如表6所示，纖維增生與修復(fù)評分結(jié)果如表7所示，炎癥與纖維增生的綜合評分 為14〇
[0132] 表6
[0136] 由上述結(jié)果分析可知，實(shí)施例4的醫(yī)用水凝膠IV與組織具有更好的生物相容性，并 且在八周時(shí)實(shí)施例4的醫(yī)用水凝膠IV在大鼠皮下已經(jīng)降解完全，而對比例4的醫(yī)用水凝膠XI 仍然有部分未降解。
[0137] 對機(jī)體來說，體內(nèi)植入物作為異物，當(dāng)其完成其特定目的之后，應(yīng)該被取出或降 解。人體大部分內(nèi)科手術(shù)創(chuàng)傷后修復(fù)時(shí)間大致在1-8周，因此實(shí)施例4的醫(yī)用水凝膠IV在降 解時(shí)間上更適合臨床使用。
[0138] 硬腦膜縫合針眼封堵動物實(shí)驗(yàn)
[0139] 將試驗(yàn)動物狗麻醉，將試驗(yàn)動物狗的左頂骨部位剖開，并取出3cmX 2.5cm大小的 顱骨;將試驗(yàn)動物狗的左邊硬腦膜切開，長度為2.0cm，并用縫合線(4-0尼龍線)縫合硬腦膜 切口，針線之間的間隔2-3_。并將實(shí)施例4的醫(yī)用水凝膠IV注在縫合部位;待醫(yī)用水凝膠IV 凝固后，將取下的顱骨放回，縫合創(chuàng)面皮膚;飼養(yǎng)試驗(yàn)動物狗4周。
[0140] 觀察指標(biāo)：（1)術(shù)后定性評估試驗(yàn)動物狗的行為是否正常，總的健康信息（如切口 愈合情況，食欲，體重），和可能腦脊液泄漏造成的不正常行為。（2)在將試驗(yàn)動物狗處死前， 先使用腰椎穿刺包測定試驗(yàn)動物狗的顱內(nèi)壓，并記錄數(shù)值，然后通過注射生理鹽水增大顱 內(nèi)壓，使顱內(nèi)壓增至200_水柱，并保持至少5s，針眼部位有無腦脊液泄漏。（3)肉眼觀察硬 腦膜切口位置，醫(yī)用水凝膠IV的降解和粘連(與腦組織)情況。
[0141] 圖7為將試驗(yàn)動物狗的硬腦膜切開的圖片；圖8為試驗(yàn)動物狗的硬腦膜縫合后的圖 片；圖9為試驗(yàn)動物狗的硬腦膜縫合后注入醫(yī)用水凝膠的圖片；圖10為試驗(yàn)動物狗的硬腦膜 注膠后放回顱骨的圖片；圖11為喂養(yǎng)4周后，試驗(yàn)動物狗的硬腦膜的切口位置的愈合情況修 復(fù)效果圖。如圖7-11所示，由術(shù)后1-4周，受試動物狗的皮膚切口愈合正常，食欲和體重不出 現(xiàn)明顯差別，動物行為正常；術(shù)后4周時(shí)解剖，硬腦膜與上層組織無粘連;膠肉眼不可見；當(dāng) 顱內(nèi)壓增至200mm水柱，在8s時(shí)，手術(shù)部位不出現(xiàn)腦脊液泄漏。
[0142] 由上述實(shí)驗(yàn)可見，本發(fā)明中所成的醫(yī)用水凝膠IV具有的低溶脹、呈中性、生物相容 性好、可體內(nèi)降解、具有抗菌效果，并且不會出現(xiàn)腦脊液泄漏。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種醫(yī)用水凝膠組合物，其特征在于，包括第一組分和第二組分，所述第一組分包括 聚賴氨酸和聚乙烯亞胺;所述第二組分包括四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺戊二酸酯、四臂-聚 乙二醇-琥珀酰亞胺丁二酸酯、四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺碳酸酯中的一種或幾種，其中， 所述聚賴氨酸的聚合度為20以上，優(yōu)選為25~35。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的醫(yī)用水凝膠組合物，其特征在于，在所述第一組分中，所述聚 賴氨酸與所述聚乙烯亞胺的質(zhì)量比為〇. 1~1 〇。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的醫(yī)用水凝膠組合物，其特征在于，所述聚賴氨酸為ε-聚賴 氨酸和/或聚-L-賴氨酸。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的醫(yī)用水凝膠組合物，其特征在于，所述ε-聚賴氨酸的重均分子 量為 3000 ~5000Da。5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的醫(yī)用水凝膠組合物，其特征在于，所述聚-L-賴氨酸的重均分 子量為 7500 ~300000Da，優(yōu)選 100000 ~200000Da。6. 根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的醫(yī)用水凝膠組合物，其特征在于，所述聚乙烯亞胺的 數(shù)均分子量為1000~3500Da，優(yōu)選為1500~2000Da。7. 根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的醫(yī)用水凝膠組合物，其特征在于，所述四臂-聚乙二 醇-琥珀酰亞胺戊二酸酯、四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺丁二酸酯和四臂-聚乙二醇-琥珀酰 亞胺碳酸酯的重均分子量均為2000~40000Da，優(yōu)選為10000~20000Da。8. -種醫(yī)用水凝膠，其由權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的醫(yī)用水凝膠組合物的第一組分和 第二組分反應(yīng)后形成；優(yōu)選地，所述醫(yī)用水凝膠由所述第一組分和所述第二組分在緩沖溶 液中反應(yīng)后形成。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的醫(yī)用水凝膠，其特征在于，所述醫(yī)用水凝膠由所述第一組分溶 于第一緩沖溶液中，所述第二組分溶于第二緩沖溶液中，然后混合、反應(yīng)后形成。10. 根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的醫(yī)用水凝膠，其特征在于，所述醫(yī)用水凝膠的溶脹度為-10~50%，優(yōu)選為5~47%。11. 根據(jù)權(quán)利要求9-10任一項(xiàng)所述的醫(yī)用水凝膠，其特征在于，所述醫(yī)用水凝膠浸泡于 水中后，浸泡液的pH值為7~9.5，優(yōu)選7~8。12. 根據(jù)權(quán)利要求8-11任一項(xiàng)所述的醫(yī)用水凝膠，其特征在于，所述第一緩沖溶液的pH 值為7.0~7.4或9.1~10.0,優(yōu)選7.0~7.4;所述第二緩沖溶液的pH值為5.0~6.0或7.0~ 7.4,優(yōu)選 7.0 ~7.4。13. -種根據(jù)權(quán)利要求8-12任一項(xiàng)所述的醫(yī)用水凝膠的制備方法，其特征在于，包括以 下步驟： 將所述第一組分溶于第一緩沖溶液中，得到第一混合液； 將所述第二組分溶于第二緩沖溶液中，得到第二混合液； 將所述第一混合液和第二混合液混合，得到醫(yī)用水凝膠。14. 根據(jù)權(quán)利要求13所述的醫(yī)用水凝膠的制備方法，其特征在于，所述第一混合液中， 所述聚賴氨酸的濃度為1~50mg/mL，所述聚乙稀亞胺的濃度為1~50mg/mL;所述第二混合 液中，所述四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺戊二酸酯、四臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺丁二酸酯、四 臂-聚乙二醇-琥珀酰亞胺碳酸酯或其混合物的濃度為100~200mg/mL;所述第一混合液與 所述第二混合液等體積混合，得到醫(yī)用水凝膠。15. 根據(jù)權(quán)利要求13或14任一項(xiàng)所述的醫(yī)用水凝膠的制備方法，其特征在于，所述第二 混合液中還包括顯色劑，優(yōu)選地，所述顯色劑包括ro&C Blue#l、FD&C Blue#2、亞甲基藍(lán)中 的一種或幾種。16. -種醫(yī)用水凝膠試劑盒，其特征在于，其包括權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的醫(yī)用水凝 膠組合物以及用于溶解醫(yī)用水凝膠組合物的各組分的緩沖溶液。17. 根據(jù)權(quán)利要求16所述的醫(yī)用水凝膠試劑盒，其特征在于，所述醫(yī)用水凝膠組合物的 第一組分與第二組分是分開儲存的；優(yōu)選地，所述醫(yī)用水凝膠組合物的第一組分中的聚賴 氨酸和聚乙烯亞胺是分開儲存的。18. -種根據(jù)權(quán)利要求8-12任一項(xiàng)所述的醫(yī)用水凝膠在止血輔助物、防止肺部漏氣或 腦脊液泄漏制品、防粘連制品中的應(yīng)用。
【文檔編號】A61L27/26GK105963792SQ201610286118
【公開日】2016年9月28日
【申請日】2016年4月29日
【發(fā)明人】林麗敏, 楊亞亞, 馬騁, 鄧?yán)W(xué), 袁玉宇
【申請人】深圳邁普再生醫(yī)學(xué)科技有限公司