胡椒基戊二烯異丁酰胺的保肝護肝應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥學技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，涉及胡椒基戊二烯異丁酰胺保肝護肝的應(yīng) 用。
【背景技術(shù)】
[0002] 我國現(xiàn)有乙肝病毒感染者約1億多人，有慢性乙肝病人2000萬人，是名副其實的 "乙肝大國"。我國現(xiàn)有的肝硬化、肝癌等嚴重疾病，80%以上都是由乙肝發(fā)展而來。由于目 前尚無徹底的一次性治愈乙肝的特效藥物問世，乙肝治療的難度較大，其診療過程注定是 一場漫長的"馬拉松戰(zhàn)役"，應(yīng)該采取預防為主、治療為輔的防治策略。
[0003] 黑胡椒是藥食同源植物，是國內(nèi)外常用的食品調(diào)料，收載于《中國藥典》(2010年版 227頁）和《中華本草》（蒙藥卷287頁）。黑胡椒，英文名：FRUCTUS PIPERIS，本品為胡椒 科植物胡椒Piper nigrumL.的干燥近成熟或成熟果實。秋末至次春果實呈暗綠色時采收， 曬干，為黑胡椒。性狀：黑胡椒呈球形，直徑3.5~5_。表面黑褐色，具隆起網(wǎng)狀皺紋，頂 端有細小花柱殘跡，基部有自果軸脫落的疤痕。質(zhì)硬，外果皮可剝離，內(nèi)果皮灰白色或淡黃 色。斷面黃白色，粉性，中有小空隙。氣芳香，味辛辣。性味與歸經(jīng)：辛，熱。歸胃、大腸經(jīng)。 功能與主治：溫中散寒，下氣，消痰。用于胃寒嘔吐，腹痛泄瀉，食欲不振，癲癇痰多。
[0004] 2002年開始，博日吉汗格日勒圖、金樁、趙睿國、包蘭蘭、吳勇、麻春杰、韓景芬等， 對胡椒科植物蓽茇乙醇提取物及其衍生物做了大量的研究工作，首次分離出足量的胡椒基 酰胺天然物質(zhì)：蓽發(fā)啉 Pipemonaline,C21H27NO3,蓽發(fā)寧 Piperlonguminine,C16H19NO3 和胡椒 堿 Piperine, C17H19N03。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 發(fā)明人經(jīng)大量的研究令人驚奇地發(fā)現(xiàn)胡椒基戊二烯異丁酰胺具有優(yōu)異的保肝護 肝作用。
[0006] 本發(fā)明的目的是提供胡椒基戊二烯異丁酰胺保肝護肝的應(yīng)用。
[0007] 在本發(fā)明的技術(shù)方案中，胡椒基戊二烯異丁酰胺，或GB-N，是指下列結(jié)構(gòu)的化合 物：
[0008]
[0009] 本發(fā)明提供了一種胡椒基戊二烯異丁酰胺在制備保肝護肝藥物中的應(yīng)用。
[0010] 本發(fā)明提供了一種胡椒基戊二烯異丁酰胺在制備降低血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶的藥物中 的應(yīng)用。
[0011] 本發(fā)明提供了一種胡椒基戊二烯異丁酰胺在制備降低谷草轉(zhuǎn)氨酶的藥物中的應(yīng) 用。
[0012] 本發(fā)明提供了一種胡椒基戊二烯異丁酰胺在制備保肝護肝保健品中的應(yīng)用。
[0013] 本發(fā)明提供了一種胡椒基戊二烯異丁酰胺在制備降低血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶的保健品 中的應(yīng)用。
[0014] 本發(fā)明提供了一種胡椒酸在制備降低谷草轉(zhuǎn)氨酶的保健品中的應(yīng)用。
[0015] 本發(fā)明提供了一種胡椒基戊二烯異丁酰胺在制備保肝護肝藥物中的應(yīng)用，其 中所述藥物，其單位劑量中的胡椒基戊二烯異丁酰胺含量為0. 5mg-2000mg，更優(yōu)選地為 lmg-1000mg。
[0016] 在本發(fā)明的實施方案中，本發(fā)明胡椒基戊二烯異丁酰胺的給藥途徑包括口服給 藥、或非胃腸道給藥。對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員而言，本發(fā)明胡椒基戊二烯異丁酰胺可根 據(jù)現(xiàn)有技術(shù)來制備成口服藥物制劑、注射劑、保健食品，例如，根據(jù)崔德福主編的《藥劑學》 (第6版），人民衛(wèi)生出版社，2007年8月，制備成液體制劑（如口服溶液、注射液等）、固體 制劑（片劑、膠囊劑等）。對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員而言，本發(fā)明胡椒基戊二烯異丁酰胺每 日的用量可以為IOmg至5g，可采用每日一次，或者每日二至三次。
[0017] 本發(fā)明的胡椒基戊二烯異丁酰胺可以通過中國發(fā)明專利ZL20041009611. 7中公 開的方法制備：
【具體實施方式】
[0018] 實施例1
[0019] 1胡椒酸的制備：
[0020] 胡椒堿（來源參見CN1330545A) IOg在20 %的KOH乙醇溶液中攪拌回流6小 時。水解完全后冷卻放置一段時間后使得胡椒酸固體析出，抽濾并用乙醇洗滌得到的固 體物質(zhì)。用水將該固體物質(zhì)全部溶解后，抽濾除去不溶物質(zhì)。用鹽酸溶液調(diào)節(jié)水溶液 PH值至酸性，此時胡椒酸全部析出。抽濾得到的胡椒酸并用水洗滌除去過量的酸。凍 干得到純凈的淡黃色胡椒酸8.66g。熔點；206-208°C，產(chǎn)率：86.6% HPLC的保留時間： 0. 9383min ( Symmetry? C1S5 μ m3. 9 X 150mm 分析柱，用 70 % 甲醇與 30 % 水作流動相）。
[0021]
[0022] 2胡椒基戊二烯異丁酰胺甲酯的制備：
[0023] 用100mL的甲醇溶解2. 5g的胡椒酸，充分攪拌的情況下加入1ml濃硫酸。加熱 回流6小時，冷卻析出結(jié)晶，抽濾并依次用水、飽和碳酸鈉、水洗滌得到的固體。干燥后稱 重共得到2. 29g淡黃色的胡椒酸甲酯。用甲醇重結(jié)晶得到的胡椒酸甲酯得到純凈的片 狀晶體。熔點：145-146°C，產(chǎn)率：71. 72%，HPLC 的保留時間：1. 4006min( Symmetry? C1S5 μ m3. 9 X 150mm分析柱，甲醇作流動相）。
[0024]
[0025] 3胡椒基戊二烯異丁酰胺（蓽拔寧piperlonguminine GBN)的制備：
[0026] 在65ml的甲醇溶液中加入0. 18g金屬鈉完全溶解后加入15ml異丁胺以及3g胡 椒酸甲酯。氮氣保護的情況下攪拌回流46小時，反應(yīng)結(jié)束后溶液中出現(xiàn)白色絮狀沉淀，反 應(yīng)液呈現(xiàn)淡綠色。反應(yīng)液充分冷卻后，抽濾除去固體部分得到的濾液加入到300ml的蒸餾 水中，此時溶液中出現(xiàn)大量的白色沉淀，攪拌3h后抽濾并保留固體部分。干燥后稱重共得 到1.139g產(chǎn)物。用（2 : 1)的乙酸乙酯與正己烷的混合液重結(jié)晶得到的白色固體得到白 色針狀晶體。熔點：168. 0-169. 0°C，產(chǎn)率：33. 62%，保留時間：1. 7167min(C18分析柱，甲醇 85 %與水15%的混合液作流動相）。
[0027]
[0028] 實施例2
[0029] 胡椒基戊二烯異丁酰胺（GB-N)的結(jié)構(gòu)確定
[0030] 使用500MHz布魯克核磁共振儀，用氘代水做溶劑，測定胡椒基戊二烯異丁酰胺的 SOOMHz1H-NMR譜圖和胡椒基戊二烯異丁酰胺（GB-N) 125MHz13C-NMR核磁共振譜圖。
[0031] 元素分析結(jié)果：
[0032] 理論值：C%= 70. 33%，H%= 6. 96%，0%= 17. 58%，N%= 5. 13%。
[0033] 實測值：C%= 70. 01%，Η% = 6. 70%，0%= 18. 90%，N%= 4. 95%。
[0034] 13C-NMR(CDCl3) δ :166. 27
148. 20 (C8)，148. 20 (C9)，140. 84 (C3)， 138. 71 (C5)，130. 92 (C6)，124. 75 (C4)，123. 46 (C2)，122. 54 (Cll)，108. 47 (CIO)， 105. 73 (C7)，101. 28 (O-CH2-O)，47. 06 (-NH-CH2-)，28. 66 (C2,），20. 18 (C3，，C4,）。
[0035] 1H-NMR(CDCl3) δ :5. 93 (d，1H，J = 15. 1，CH = CH-CH = CH)，7. 33
[0036] (d，d，1H，CH = CH-CH = CH)，6. 65(d，d，1H，CH = CH-CH = CH)6. 73(d，1H，CH =CH-CH = CH)，6. 92(s，1H，Ar-7H)，6. 73(d，1H，J = 8. 0, Ar-lOH)，6. 84(d，1H，Ar-llH)， 5. 93(s，2H，0-CH2-0)，3. 16(t，2H，-N-CH2_)，I. 81(m，1H，C2，-H)，0· 93(d，6H，C3，-H，C4，-H)。
[0037] 實施例3
[0038] 胡椒基戊二烯異丁酰胺保肝護肝預防性實驗
[0039] 1.實驗動物及材料
[0040] 實駘動物：成年雄件昆明小鼠，體重18 + 2g,許可證號:SCXK (京）2006-2009,級別 SPF/AF，由北京維通利華實驗動物中心提供。
[0041] 實駘試劑：
[0042] 胡椒基戊二烯異丁酰胺由內(nèi)蒙古大學高分子化學及蒙藥研究所根據(jù)本發(fā)明實施 例1制備；
[0043] ALT、AST試劑盒由中生北控生物科技股份有限公司生產(chǎn)；
[0044] 肝得?。╡ssentiale，Essentiale Forte):賽諾菲安萬特（北京）制藥有限公司 生產(chǎn)；
[0045] 實駘儀器:意大利產(chǎn)PRONTO EVOLUTION(奔騰加強型）全自動生化分析儀；
[0046] TDL-5-A離心機（上海產(chǎn)）；
[0047] 高脂飼料的制各：
[0048] 膽固醇3%，豬油10%，膽酸鈉0.5%，
[0049] 基礎(chǔ)飼料86. 5% (配方：面粉20%，米粉10%，玉米20%，麩皮25%，豆料20%， 骨粉2%，魚粉2%，食鹽0.9%，維生素0· 1% )
[0050] 2試驗方法
[0051] 分組及給藥：取成年雄件昆明小鼠40只，體重18 士 2g,實驗前在實驗環(huán)培下(室 溫20~24°C，濕度50%~60%，自由飲水）飼喂3天后，按體重隨機分成5組，每組8只， 1組為空白對照組；2組為肝炎模型組；3組為陽性對照（肝得?。┙M；4組為胡椒基戊二烯 異丁酰胺低劑量組；5組為胡椒基戊二烯異丁酰胺高劑量組；于第四天開始，除空白組外其 余各組每天早晨以52度白酒灌胃（0. 8ml/30g)，每天下午5:30灌胃給予受試藥和陽性對照 組藥（0. 8mL/30g)，連續(xù)灌胃5周，每日給藥前對小鼠進行體重測定，肝炎模型組和空白對 照組灌胃同體積的〇. 5% CMC-Na。分組情況及各組給藥量見表1。
[0052] 測定與觀察方法:繼續(xù)給藥至第45天，于第46天從股動脈取血，離心，分離血清供 測定ALT、AST等生化指標，對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學處理，與均數(shù)土標準差表示，差異顯著性 以T檢驗判定。
[0053] 3試驗結(jié)果：
[0054] 實驗結(jié)果列入表1、2、3、4、5。
[0055] 表1分組情況及各組給藥量
[0060] 表3對小鼠血清ALT的影響（均值士標準差）分析（U/L)
[0062] P值是指各組與對照組比較：*P < 0. 05,有顯著差異；#P < 0. 01，有極顯著差異。
[0063] 表4給藥后第45天小鼠 AST含量測定結(jié)果（單位U/L)
[0064]
[0065] 表5對小鼠血清AST的影響（均值士標準差）分析（U/L)
[0067] P值是指各組與對照組比較：*P < 0. 05,有顯著差異；**P < 0. 01，有極顯著差異。
[0068] 4、分析
[0069] 以上結(jié)果表明，肝炎模型組與空白對照組比較，AST、ALT值升高，而且兩組比較有 極顯著差異，說明造模成功。各組比較模型組都有一定的降A(chǔ)ST、ALT作用。上述結(jié)果證明 了胡椒基戊二烯異丁酰胺具有降低AST、ALT的作用。
[0070] 試驗結(jié)果與結(jié)論
[0071] 在降低谷丙轉(zhuǎn)氨酶方面，實驗結(jié)果表明GB-N組、酒精性脂肪肝肝炎模型組與空白 對照組比較有極顯著差異。GB-N治療效果更加顯著。
[0072] 在降低谷草轉(zhuǎn)氨酶方面，GB-N組、酒精性脂肪肝肝炎模型組與空白對照組比較有 極顯著差異。GB-N治療高谷草轉(zhuǎn)氨酶作用十分明顯。
[0073] 總之，GB-N具有保肝護肝作用。
【主權(quán)項】
1. 胡椒基戊二烯異丁酰胺在制備保肝護肝藥物中的應(yīng)用。2. 胡椒基戊二烯異丁酰胺在制備降低血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶的藥物中的應(yīng)用。3. 胡椒基戊二烯異丁酰胺在制備降低谷草轉(zhuǎn)氨酶的藥物中的應(yīng)用。4. 胡椒基戊二烯異丁酰胺在制備保肝護肝保健品中的應(yīng)用。5. 胡椒基戊二烯異丁酰胺在制備降低血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶的保健品中的應(yīng)用。6. 胡椒基戊二烯異丁酰胺在制備降低谷草轉(zhuǎn)氨酶的保健品中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了胡椒基戊二烯異丁酰胺的保肝用途。同時還公開了胡椒基戊二烯異丁酰胺在降低谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)以及谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)的藥物應(yīng)用。
【IPC分類】A61P1/16, A61K31/36, A23L1/30
【公開號】CN104997770
【申請?zhí)枴緾N201410163127
【發(fā)明人】博日吉汗格日勒圖, 昭日格圖, 史保明, 白朝魯門, 唐廣玉, 那日蘇
【申請人】內(nèi)蒙古博日吉汗高新技術(shù)開發(fā)有限公司, 內(nèi)蒙古蒙藥股份有限公司
【公開日】2015年10月28日
【申請日】2014年4月23日