一種藥物組合物在制備治療或預(yù)防腦卒中的藥物中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種藥物組合物在制備治療或預(yù)防腦卒中的藥物中的應(yīng)用，其中藥物組合物是由貫葉金絲桃和刺五加組成，可與藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑制成各種劑型。藥理研究表明該藥物組合物對全腦缺血后的動物存活時間有明顯提升，顯著降低腦卒中后的缺血面積，對神經(jīng)功能有保護(hù)作用，具有預(yù)防或治療腦卒中的作用。
【專利說明】一種藥物組合物在制備治療或預(yù)防腦卒中的藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種藥物組合物在制備治療或預(yù)防腦卒中的藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]腦卒中是急性發(fā)生的血管或血流異常引起的腦血液循環(huán)障礙而致神經(jīng)功能缺損綜合征，具有高發(fā)病率、高致殘率、高復(fù)發(fā)率及高致死率的特點，是僅次于心血管病和癌癥的第三大“殺手”，已經(jīng)成為威脅人類健康和生命的主要疾病。并且，隨著全世界向老齡社會進(jìn)入步伐的不斷加快，腦卒中的發(fā)病率仍在進(jìn)一步攀升，鑒于腦卒中的巨大危害，開發(fā)降低腦卒中死亡率、促進(jìn)患者功能恢復(fù)、提高患者生活質(zhì)量的治療腦卒中的藥物已經(jīng)成為全球醫(yī)藥工作者的研究熱點之一。
[0003]缺血性腦卒是指由于腦部血液供應(yīng)障礙，缺血、缺氧引起的局限性腦組織的缺血性壞死或腦軟化，病理生理過程極為復(fù)雜，受多種因素影響，其中能量代謝障礙、興奮性氨基酸毒性作用、炎癥反應(yīng)、半暗帶去極化及細(xì)胞凋亡等機(jī)制共同參與了其病理生理過程。目前對缺血性腦卒中的治療，主要是從神經(jīng)保護(hù)、抗凝、溶栓、增加血流量及降血壓等角度進(jìn)行，常用的腦卒中化學(xué)治療藥物包括:1)溶栓類藥物，2)抗血小板藥物，3)抗凝藥物，4)神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)藥物等。但這些藥物多數(shù)都只能針對腦卒中的某一方面進(jìn)行緩減和或治療，治療作用單一，效果不理想，且存在許多不良反應(yīng)。例如，常用的溶栓治療藥物組織血纖維蛋白溶酶原激活劑(tPA)，雖然能夠迅速溶解血栓，但是并不能改善由于缺血導(dǎo)致的神經(jīng)元受損，且其不斷被報道存在破壞血腦脊液屏障、增加出血風(fēng)險、加劇興奮性神經(jīng)毒性等嚴(yán)重不良反應(yīng)[黃雋波等，神經(jīng)保護(hù)和缺血性腦卒中治療，轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究(電子版)2012，2 (I):40 - 53]，上述問題也是溶栓類藥物在臨床使用時普遍存在的缺陷。
[0004]此外，中藥制劑在治療腦卒中方面也取得了一定的進(jìn)展，例如常見的具有改善心腦血管循環(huán)作用的銀杏葉制劑，已被許多研究報道對于治療急性缺血性腦卒中有著確切作用。但是，2010版藥典中規(guī)定銀杏葉提取物的總黃酮醇苷含量不得少于24.0%，萜類內(nèi)酯含量不得少于6.0%，銀杏酸含量不得超過10%，而在銀杏葉藥材中總黃酮醇苷含量和萜類內(nèi)酯含量僅分別為0.4%和0.25%。因此，銀杏葉制劑中相應(yīng)活性成分含量的高標(biāo)準(zhǔn)必然對其原材料的質(zhì)量、數(shù)量、提取工藝均有較高要求，從而造成較高的生產(chǎn)成本，此外，銀杏葉提取物在臨床使用上容易出現(xiàn)出血、致高血壓、過敏等多種不良反應(yīng)[王玉慧等，銀杏葉提取物的不良反應(yīng)，2001，3:184-186]。此外，CN1686299、CN10197242等中國專利中也公開了一些其它治療腦卒中的中藥藥物組合物，但其組方復(fù)雜，生產(chǎn)成本高，藥品質(zhì)量控制難度大，不利于工業(yè)化生產(chǎn)。因此，尋求一種組方簡單、療效確切、安全性好、利于工業(yè)化大生產(chǎn)的治療腦卒中的中藥藥物具有十分重要的意義。
[0005]貫葉金絲桃，又叫圣約翰草，藤黃科金絲桃屬多年生草本植物，是世界上分布最廣的天然植物，在我國主要分布于湖北、四川、貴州、甘肅、山西、江西、江蘇、山東等地。貫葉金絲桃的臨床應(yīng)用除傳統(tǒng)的鎮(zhèn)靜、抗炎、傷口愈合等方面的作用外，還被報道可用于抑郁癥、甲型和乙型肝炎、愛滋病、腫瘤等疾病的治療。2006年又有研究報道貫葉金絲桃素對于腦卒中后的神經(jīng)損傷具有保護(hù)作用[Kumar V, Mdzinarishvili A, Kiewert C，et al.NMDAreceptor-antagonistic properties of hyperforin, a constituent of St.John'sWort.J Pharmacol Sc1.2006, 102(1):47-54] ?此外，貫葉金絲桃制劑的大規(guī)模臨床研究發(fā)現(xiàn)，其在使用過程中雖然存在一些副作用，如胃腸道刺激(0.6%)、過敏反應(yīng)(0.5%)、疲勞(0.4%)等，但這些副反應(yīng)是輕微的、暫時的，且相對無害的[楊得坡等，國外對貫葉連翹抗抑郁療效的臨床驗證，中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報，2004，2 (3) =231-234]。
[0006]刺五加為五加科植物的根、根莖和莖，又名五加參、刺拐棒，主要分布在我國東北、華北地區(qū)，以及朝鮮、日本及俄羅斯等地。刺五加應(yīng)用廣泛、歷史悠久，現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明其具有神經(jīng)元保護(hù)、免疫調(diào)節(jié)、延緩衰老等多方面的作用，臨床上應(yīng)用廣泛。周欽等的研究報道了使用刺五加注射液治療缺血性腦卒中，結(jié)果表明刺五加注射液治療組對于腦卒中患者的治療效果明顯優(yōu)于不使用刺五加注射液的對照組[周欽.刺五加注射液治療缺血性腦卒中228例臨床分析，廣西醫(yī)學(xué)，2006，28(9): 1396-1397]。而刺五加注射液的長期毒性研究表明其高、低劑量組與生理鹽水(空白)對照組比較，連續(xù)給藥28d過程中，對臟器系數(shù)、動物血液學(xué)指標(biāo)、生化指標(biāo)等各項指標(biāo)均無明顯影響；停藥后各組動物在飲食、活動、排泄、精神狀態(tài)等方面均未見明顯差異；病理組織切片無特異性改變，停藥后無遲緩性毒性發(fā)生[宋艷春等，刺五加注射液對大鼠長期毒性試驗的研究，藥物評價研% , 2010, 33(1): 1-4] ο
[0007]貫葉金絲桃與刺五加均具有分布廣泛、原料易得，作用靶點多，毒副作用小等優(yōu)點。舒肝解郁膠囊是以貫葉金 絲桃和刺五加組方的中藥組合物，用于治療輕、中度單相抑郁癥，是國內(nèi)首個SFDA批準(zhǔn)的用于治療抑郁的中成藥，治療抑郁效果良好，且相關(guān)研究表明其在治療過程中不良事件發(fā)生率小，無嚴(yán)重和重度不良事件發(fā)生[孫新宇等，舒肝解郁膠囊治療輕中度抑郁癥的隨機(jī)雙盲安慰劑對照研究，Chinese Journal ofNew Drugs, 2009,18
(5):413-416]。
[0008]目前未見將貫葉金絲桃和刺五加共同應(yīng)用于治療腦卒中，并獲得療效確切、安全性好的藥物的報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009]本發(fā)明的目的是提供一種含有貫葉金絲桃和刺五加的藥物組合物在制備治療或預(yù)防腦卒中藥物中的應(yīng)用，貫葉金絲桃和刺五加的重量百分比為:貫葉金絲桃35-65%，刺五加65-35% ;優(yōu)選的重量百分比為貫葉金絲桃50-65%，刺五加50-35% ;更優(yōu)選的重量百分比為貫葉金絲桃54.5%，刺五加45.5%。
[0010]所述的腦卒中優(yōu)選為缺血性腦卒中。
[0011]本發(fā)明提供的藥物組合物可與藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑制成藥物制劑，該制劑可以是常規(guī)口服制劑，例如膠囊、片劑、顆粒劑等。
[0012]本發(fā)明采用雙側(cè)頸總動脈及迷走神經(jīng)結(jié)扎所致的急性腦缺血小鼠模型考察藥物組合物的作用，所述的小鼠模型造模方法為:于小鼠最后一次灌胃給藥后0.5h，用乙醚對其進(jìn)行淺表麻醉后，迅速結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈和迷走神經(jīng)，觀察小鼠存活時間。該動物模型為急性腦缺血缺氧的常用模型，而急性腦缺血缺氧正是缺血性腦卒中的病理作用之一，因此，該動物模型給藥后的存活時間能夠初步反映該藥物對腦缺血、缺氧的保護(hù)作用，可以作為缺血性腦卒中藥物的篩選指標(biāo)。實驗結(jié)果表明本發(fā)明中所述藥物組合物對雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎致小鼠缺急性腦缺血后的存活時間與模型組相比顯著延長，與單獨使用刺五加或貫葉金絲桃組相比也有明顯延長，說明該藥物組合物對于腦缺血、缺氧保護(hù)作用明顯，且具有顯著的協(xié)同作用。
[0013]大腦中動脈閉塞模型被公認(rèn)為標(biāo)準(zhǔn)局灶性腦梗死動物模型，其中線栓法大腦中動脈腦缺血模型是研究缺血性腦損傷動物模型的首選造模方法[線栓法大鼠局灶腦缺血模型的改進(jìn)與評價，中南醫(yī)學(xué)科學(xué)雜志，2012，40 (3): 291-294]。因此本發(fā)明采用線栓法所致的大鼠腦卒中模型進(jìn)一步對藥物組合物的預(yù)防或治療腦卒中作用及劑量進(jìn)行研究，所述的線栓法造模方法為:于大鼠最后一次灌胃給藥后lh，用10%戊巴比妥鈉(30mg/kg)腹腔注射麻醉，仰臥固定，頸部正中切口，分離并暴露左側(cè)頸總動脈及頸內(nèi)、外動脈，結(jié)扎頸總動脈及頸外動脈近心端，于頸總動脈遠(yuǎn)心端開一小口(距離頸外、頸內(nèi)動脈分叉處約5_)，插入MACO栓線2.0±0.2cm，感到有輕微阻力時停止，扎緊并固定插線，縫合皮膚，阻斷血流2h后，拔線實現(xiàn)再灌注，大鼠在腦缺血再灌注48h處死，處死前進(jìn)行神經(jīng)功能缺損評分；斷頭處死后取腦切片觀察大鼠腦缺血體積。模型大鼠給藥后的神經(jīng)運動功能缺損評分結(jié)果表明該藥物組合物各劑量組均能顯著改善缺血性腦卒中大鼠的神經(jīng)運動功能，其缺血體積研究結(jié)果顯示該藥物組合物各劑量組均能夠明顯減少因缺血再灌注導(dǎo)致的腦組織死亡區(qū)域與體積。
[0014]本發(fā)明提供的藥物組合物的提取制備方法為:將貫葉金絲桃藥材加70%乙醇回流提取2次，每次I小時，合并提取液，濾過，減壓回收乙醇，濃縮至相對密度約1.10 (700C )的浸膏，噴霧干燥得干浸膏粉，得到貫葉金絲桃提取物；將刺五加藥材粉碎成碎塊，加水煎煮3次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度約1.18 (70°C)的浸膏，噴霧干燥得干浸膏粉，得到刺五加提取物；取上述 兩種提取物，均勻混合即得藥物組合物。該提取方法所需設(shè)備、試劑簡單，操作方便，生產(chǎn)成本較低。
[0015]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點:
[0016]1、本發(fā)明提供的藥物組合物中在治療或預(yù)防腦卒中過程中，由于貫葉金絲桃和刺五加的協(xié)同作用，該藥物組合物對雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎致小鼠缺血后的存活時間與單獨使用刺五加或貫葉金絲桃組相比均有顯著延長作用；并且該藥物組合物對于腦卒中后的神經(jīng)運動功能、缺血再灌注后損傷均有顯著的治療作用，治療效果確切。
[0017]2、現(xiàn)有技術(shù)中的化學(xué)藥物毒副作用較大，而本發(fā)明的藥物組合物中的刺五加及貫葉金絲桃的相關(guān)毒性研究均表明二者毒性小，不良反應(yīng)發(fā)生少，安全性高。
[0018]3、現(xiàn)有技術(shù)中的中藥制劑存在提取過程或處方成分復(fù)雜、生產(chǎn)成本高、質(zhì)量控制難度大等問題，而本發(fā)明中的藥物組合物僅由兩味藥組成，處方簡單、更易于質(zhì)量控制，且提取方法簡單，生產(chǎn)成本更低，適合大規(guī)模生產(chǎn)。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0019]圖1是實施例二中各實驗組的大鼠全腦切片圖，其中I為實施例二中陰性對照組(正常大鼠)全腦切片，2為實施例二中腦卒中空白對照組(模型大鼠)全腦切片,3為實施例二中陽性對照組(腦卒中模型大鼠經(jīng)銀杏葉片治療)全腦切片，4為實施例二中藥物組合物低劑量組全腦切片，5為實施例二中藥物組合物高劑量組全腦切片【具體實施方式】
[0020]以下實施例是對本發(fā)明的進(jìn)一步解釋，不能限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0021]實施例1藥物組合物對結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈及迷走神經(jīng)致腦缺血后小鼠存活時間的影響
[0022]1.實驗材料
[0023]實驗動物:昆明小鼠(KM小鼠)，批號SCXK (川)2004-15，由四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院提供；
[0024]實驗藥品:銀杏葉片(達(dá)納康)，規(guī)格40mg/片，生產(chǎn)批號C02191，生產(chǎn)廠家為博福-益普生工業(yè)公司(法國)；刺五加浸膏粉，批號110302，貫葉金絲桃浸膏粉，批號110303均由成都康弘藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司提供；
[0025]實驗試劑:乙醚(分析純，天津市富宇精細(xì)化工有限公司)
[0026]手術(shù)器械:手術(shù)剪、止血鉗、持針鉗。
[0027]2.實驗方法
[0028]實驗分組:
[0029]取昆明小鼠108只，雌雄各半，按照體重和性別平均分成以下9組:`[0030]陰性對照組:僅給予按10ml/kg小鼠體重計算所得體積的蒸餾水。
[0031]陽性對照組:給予達(dá)納康20mg/kg。
[0032]刺五加組:給予刺五加提取物480mg/kg。
[0033]貫葉金絲桃組:給予貫葉金絲桃提取物480mg/kg。
[0034]藥物組合物1:貫葉金絲桃:刺五加=35:65(重量百分比)的藥物組合物，按480mg/kg給藥。
[0035]藥物組合物2:貫葉金絲桃:刺五加=50:50(重量百分比)的藥物組合物，按480mg/kg給藥。
[0036]藥物組合物3:貫葉金絲桃:刺五加=54.5:45.5 (重量百分比)的藥物組合物，按480mg/kg 給藥。
[0037]藥物組合物4:貫葉金絲桃:刺五加=62:38(重量百分比)的藥物組合物，按480mg/kg給藥。
[0038]藥物組合物5:貫葉金絲桃:刺五加=65:35(重量百分比)的藥物組合物，按480mg/kg給藥。
[0039]藥物溶液配制:將以上各實驗組中的藥物或藥物組合物中的各組分根據(jù)重量配比及小鼠體重計算出總給藥劑量后，以蒸餾水為溶劑將其配制成溶液，溶劑體積為10ml/kg
小鼠體重。
[0040]按照上述實驗分組及各組藥物溶液體積，對小鼠進(jìn)行灌胃給藥，每日2次，連續(xù)灌胃給藥7次。于末次灌胃后0.5h，將小鼠用乙醚淺表麻醉，迅速結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈和迷走神經(jīng)，觀察并記錄各組的小鼠存活時間(s)，結(jié)果見表1。
[0041]3.實驗結(jié)果
[0042]表1藥物組合物對結(jié)扎小鼠雙側(cè)頸總動脈及迷走神經(jīng)所致腦缺血后存活時間的影響(Χ±.s)
[0043]
【權(quán)利要求】
1.一種藥物組合物在制備預(yù)防或治療腦卒中藥物中的用途，所述藥物組合物含有貫葉金絲桃和刺五加。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其中所述藥物組合物中貫葉金絲桃和刺五加的重量百分比為:貫葉金絲桃35-65%，刺五加65-35%。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其中所述藥物組合物中貫葉金絲桃和刺五加的重量百分比為:貫葉金絲桃50-65%，刺五加50-35%。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其中所述藥物組合物中貫葉金絲桃和刺五加的重量百分比為:貫葉金絲桃54.5%，刺五加45.5%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任意一項所述的用途，其特征在于所述腦卒中為缺血性腦卒中。
6.權(quán)利要求1-4的中任意一項所述的藥物組合物與藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑制成藥物制劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的藥物制劑，其特征在于所述的藥物制劑為口服制劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的藥物制劑， 其特征在于所述口服制劑為膠囊、片劑、顆粒劑。
【文檔編號】A61K36/254GK103768114SQ201210405870
【公開日】2014年5月7日 申請日期:2012年10月23日 優(yōu)先權(quán)日:2012年10月23日
【發(fā)明者】柯瀟, 董慶, 高小平 申請人:成都康弘藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司