專利名稱：改善大鼠血液流變障礙用的含有麻黃堿注射液的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
改善血液流變障礙用的含有麻黃堿的注射液的制備方法，屬于防治腦缺血藥物的制造技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
申請?zhí)枮?00880001478. 9，名為“ー種防治腦缺血性腦卒中的藥物組合物及其制備方法”的中國發(fā)明專利提示了一種用于防治缺血性腦卒中的藥物組合物，是由瑟丹酸內(nèi)酷、蒿本內(nèi)酯和天麻素共同組合成的。其中，天麻素是純度為98 %以上的市售產(chǎn)品，瑟丹酸內(nèi)酯和蒿本內(nèi)酯的純度均在98 %以上，相應地提出了純度為99. 17%的瑟丹酸內(nèi)酯及純度為98. 32%的蒿本內(nèi)酯的制備方法。其實驗結(jié)果表明該三種成分的配伍可以有效地減少缺 血性腦梗塞的范圍(用腦梗塞百分數(shù)表示)和肢體偏癱的程度(用行為癥狀評分表示)。即作為注射劑治療給藥時，大鼠腦梗塞面積百分比在13. 03% —18. 58 %之間；行為評分在I. 50分一2. 30分之間；作為ロ服劑預防給藥時，大鼠腦梗塞面積百分比在21. 36% —21. 67%之間，行為評分在3. 36分一4. 33分之間。其藥效好于常用臨床用藥脈絡(luò)寧(注射劑)和川芎嗪(注射劑和ロ服劑)。但缺少改善身體微循環(huán)(用血液流變學指標表示)的實驗數(shù)據(jù)。在目前檢索到的文獻中，未發(fā)現(xiàn)藥物組合物中有采用麻黃堿、天麻素與瑟丹酸內(nèi)酯來配伍的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提取并配制ー種對改善血液流變障礙用的含有麻黃堿的注射液制備方法。本發(fā)明是ー種改善血流變障礙用的含有麻黃堿的注射液的制備方法其特征之一，稱取純度至少為98%的瑟丹酸內(nèi)酯O. 16g、純度至少為98%的天麻素O. 024g、純度至少為98%的麻黃堿O. 24g，在體積百分比為5%的聚氧こ烯山梨糖醇酐單油酸酷85ml，攪拌均勻，使所述的瑟丹酸內(nèi)酷、天麻素和麻黃堿的組合物在體積百分比為5%的聚氧こ烯山梨糖醇酐單油酸酯水溶液中的濃度為5mg/ml。其特征之ニ，稱取純度至少為98%的瑟丹酸內(nèi)酯O. 16g、純度至少為98%的天麻素O. Olg、純度至少為98%的麻黃堿O. 24g，加入體積百分比為5%的聚氧こ烯山梨糖醇酐單油酸酷82ml，攪拌均勻，使所述的瑟丹酸內(nèi)酷、天麻素和麻黃堿的組合物在體積百分比為5%的聚氧こ烯山梨糖醇酐單油酸酯水溶液中的濃度為5mg/ml。實驗證明，上述兩種受試物均能改善血液流變學指標，從而發(fā)揮抗腦缺血作用。與臨床用藥尼膜同相當。其中實施例I好于實施例2。
具體實施例方式一、受試物配制實施例I :稱取98%純度的瑟丹酸內(nèi)酯O. 16g，98%純度的天麻素O. 024g, 98%純度的麻黃堿O. 24g，加入體積百分比為5%的聚氧こ烯山梨糖醇酐單油酸酯85ml，攪拌均勻，使所述的瑟丹酸內(nèi)酷、天麻素和麻黃堿的組合物在5% (體積比)的聚氧こ烯山梨糖醇酐單油酸酯水溶液中的濃度為5mg/ml。實施例2 稱取98%純度的瑟丹酸內(nèi)酯O. 16g，98%純度的天麻素O. Olg, 98%純度的麻黃堿O. 24g，加入體積百分比為5%的聚氧こ烯山梨糖醇酐單油酸酯82ml，攪拌均勻，使所述的瑟丹酸內(nèi)酷、天麻素和麻黃堿的組合物在5% (體積比)的聚氧こ烯山梨糖醇酐單油酸酯水溶液中的濃度為5mg/ml。所述的瑟丹酸內(nèi)酯按申請?zhí)?00880001478. 9、名稱為ー種防治腦缺血性腦卒中的藥物組合物及其制備方法的發(fā)明專利申請所述的方法配制，天麻素和麻黃堿為市售產(chǎn)品。 ニ、試驗方法實驗由首都醫(yī)科大學宣武醫(yī)院完成。模型制造實驗用大鼠以25%烏拉坦I. 5 g/kg腹腔注射麻酔，在大鼠頭頂骨部位，前囟中心向前2mm，向右2. 5mm處，用牙科鉆打一直徑約2mm的骨窗，將測量電極插入軟腦膜下2mm，測定結(jié)扎前腦組織血流量(rCBF)，然后結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈，分別測定結(jié)扎后lOmin、60min及120min時rCBF。血流量以ml/100g/min計。并計算相對血流量。檢測原理根據(jù)
氫氣清除法。
獅血流量=χ ιοο%實驗動物處死前，經(jīng)腹主動脈取血O. 8ml，抗凝，用血液粘度儀進行檢測，以高切QOOS—1)、中切(30 S—1)和低切(5 S—1)時血液粘度表示全血粘度(見表I);另取抗凝血以2000轉(zhuǎn)離心8min，其上清液即為血漿，取O. 8ml血漿用血液粘度儀測試100 S—1時的血漿粘度(見表2)。以紅細胞最大變形指數(shù)(MAXDI)表示紅細胞變形性(見表3);以紅細胞最大聚集指數(shù)(MAXD)表示紅細胞聚集性(見表3)。大腦中動脈血栓模型的制備按Tamura等的方法改進而成。實驗動物采用350g±20g SD大白鼠，以水合氯醛O. 35g/kg腹腔注射麻酔。大鼠右側(cè)臥位固定，在眼外眥和外耳道連線中點作ー長I. 5cm的弧形切ロ，暴露顳骨，用牙科鉆在顴骨與顳鱗骨接合處向鼻側(cè)Imm處作ー直徑2. 5mm的骨窗，暴露大腦中動脈，將吸有10 μ I 50% FeCl3液的小片濾紙敷在大腦中動脈上，手術(shù)在體視顯微鏡下進行。待30min后大腦中動脈變黑，取下濾紙，用生理鹽水沖洗局部組織，逐層縫合。假手術(shù)組不敷FeCl3，余同模型組。實驗分組實驗動物采用SD大白鼠，體重為350±20g。實驗共分5組空白對照組和模型對照組給予生理鹽水，給藥量均為O. 04ml/100g體重；陽性對照藥為臨床治療腦缺血常用藥尼膜同的O. 02%滅菌注射液，由德國拜耳公司生產(chǎn)，批號CBWLL11B。給藥劑量為8μ g/100g，給藥量為O. 04ml/100g體重；實施例I組、實施例2組，給藥量均為O. 16ml/IOOg體重。給藥方法實施例I、尼膜同于造模前、造模后10 min、造模后Ih共舌下靜脈注射給藥3次；實施例2術(shù)前預防給藥3日，毎日I次，末次給藥后0. 5h造模，術(shù)后給藥方法同實施例I。
實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計采用均數(shù)土標準差(X 土SD)表示。實驗結(jié)果經(jīng)組間比較，進行t檢驗。結(jié)果以P值表示。均數(shù)是表示一組數(shù)據(jù)之間的平均數(shù)。標準差是表示ー組數(shù)據(jù)離散程度的指標。t檢驗是對回歸參數(shù)的顯著性進行檢驗，P值為結(jié)果可信程度的遞減指標。P〈0. 05為組間有顯著性差異，P〈0. 01為組間有非常顯著性差異。ニ、藥效:兩個實施例均能改善血液流變學指標。例如，能升高紅細胞變形性，降低紅細胞聚集性，降低血小板聚集率。能降低全血粘度和血漿粘度。提示對血液流變學的改善作用是其抗腦缺血作用的機制之一。其中 實施例I好于實施例2。表現(xiàn)如下(詳見表1-3)I.大鼠形成大腦中動脈血栓后，可引起紅細胞變形性降低，紅細胞聚集性升高，血小板聚集率升高，全血粘度(高切200S'中切30 S—1和低切5 S—1 )及血漿粘度(100 S—1)均較正常組有所増加，說明在腦缺血的發(fā)生過程中，血液流變學呈粘、濃、凝、聚狀態(tài)的變化。2.實施例I對24小時大腦中動脈血栓模型鼠血液粘度和血液流變學的改善作用比實施例2好，并且在以下指標上具有顯著性差異24h全血還原粘度(高切)實施例I組明顯低于實施例2組，Ρ〈0· 05; 24h全血還原粘度(低切)實施例I組明顯低于實施例2組，P〈0. 05。表I.受試物對24h大腦中動脈血栓模型血液粘度的影響(χ 土SD)
I 劑量"II全血粘度「血衆(zhòng)粘度
組別動物數(shù) ^-—Γ—;-:~~—-:--,
(ml IOOg)咼切(200S—1)中切 ￠3(^1) 低切(IS—1)(100S'1)
空白對照組一84.47±0.49**6.07±0.78 25.2(^5.51^1.28 + 0.06
模型對照組—85.54 + 0.537.92±0.92 38.49±7.381.54±0.06
陽性藥尼膜同組0.0484.79 + 0.23**6.66±0.44**29.72±4.73*1.37 + 0.06**
實施例 I 組0.1685.11±0.577.17±0.8133.01±5.921.38+0.04
實施例 2 組0.1684.69±0.54*6.51 ±0.88*28.99±5.70*1.39±0.06 注各組與模型組相比，* Ρ〈0· 05 ;#Ρ〈0· 01表2.受試物對48h大腦中動脈血栓模型血液粘度的影響(χ 土SD)
"!劑量"fΓ Jm 粘度 |_血衆(zhòng)粘度 "
組別動物數(shù)^-. -,^^———,——,
(ml IOOg)—咼切(200S—1) ^ 中切(30S-1) 低切(IS.1)(IOOS.1)
空白對照組一84.47±0.49**6.07±0.78**25.20±5.51**1.28±0.06**
模型對照組一85.61±0.637.85±0.8335.71±4.711.47±0.06
陽性藥尼膜同組0.0485.07 + 0.3 57.02 ±0.53*30.90±3.631.36±0.07*
實施例 I 組0.1685.00+0.417.26±1.0532.26±4.51#1.42±0.08
實施例 2 組dl685.42±0.327.75±0.3637.51±3.401.46 + 0.16注:各組與模型組相比，*P〈0. 05 ;**Ρ〈0· 01 ;實施例I與實施例2相比，# Ρ〈0· 05表3.受試物對24h大腦中動脈血栓模型血液流變學的影響(X 土SD)
權(quán)利要求
1.改善大鼠血液流變障礙的含有麻黃堿注射液的制備方法，其特征在干， 稱取純度至少為98%的瑟丹酸內(nèi)酯O. 16g、純度至少為98%的天麻素O. 024g、純度至少為98%的麻黃堿O. 24g，加在體積百分比為5%的聚氧こ烯山梨糖醇酐單油酸酯85ml中，攪拌均勻，使所述的瑟丹酸內(nèi)酷、天麻素和麻黃堿的組合物在體積百分比為5%的聚氧こ烯山梨糖醇酐單油酸酯水溶液中的濃度為5mg/ml。
2.改善大鼠血液流變障礙的含有麻黃堿注射液制備方法，其特征在干， 稱取純度至少為98%的瑟丹酸內(nèi)酯O. 16g、純度至少為98%的天麻素O. Olg、純度至少為98%的麻黃堿O. 24g中，在體積百分比為5%的聚氧こ烯山梨糖醇酐單油酸酯82ml中，攪拌均勻，使所述的瑟丹酸內(nèi)酷、天麻素和麻黃堿的組合物在體積百分比為5%的聚氧こ烯山梨糖醇酐單油酸酯水溶液中的濃度為5mg/ml。
全文摘要
改善大鼠血液流變障礙用的含有麻黃堿注射液的制備方法，屬于改善生物血液障礙藥物制備領(lǐng)域，其特征在于，在有效成分中由純度至少為98%的瑟丹酸內(nèi)酯、由純度至少為98%的瑟丹酸內(nèi)酯、純度至少為98%的天麻素、純度至少為98%的麻黃堿，在體積百分比為5%的聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯水溶液中共同按比例攪拌而成，瑟丹酸內(nèi)酯、天麻素和麻黃堿的組合物在5%的聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯水溶液中的濃度為5mg/ml。相對于臨床相應常用藥尼莫酮而言，在血液粘度，紅細胞最大變形指數(shù)，紅細胞最大聚集指數(shù)和血小板聚集率上均有明顯改善。
文檔編號A61K31/7034GK102688184SQ20121015140
公開日2012年9月26日 申請日期2012年5月15日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月15日
發(fā)明者丁明玉, 季梁, 李衍達, 韓慧婉 申請人:清華大學