專利名稱：一種硒化甘露低聚糖的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于有機(jī)硒制備領(lǐng)域，具體涉及一種硒化甘露低聚糖的制備方法。
背景技術(shù)：
硒(Selenium，Se)是人體必需的微量元素，是谷胱甘肽過氧化物酶的主要活性成 分，它可以直接或間接地清除體內(nèi)氧自由基，可抑制脂氧化或過氧化，還可以提高和調(diào)節(jié)免 疫功能。人體缺硒會(huì)造成致命的缺硒綜合癥，如克山病、糖尿病、心血管疾病、白內(nèi)障、腫瘤、 衰老等。但如果攝入的硒過量也會(huì)引起脫發(fā)、脫甲等中毒綜合癥。補(bǔ)硒劑可以是無機(jī)硒、有 機(jī)硒、生物活性硒。亞硒酸鈉在預(yù)防大骨節(jié)病及降低肝癌發(fā)病率方面取得了良好效果，然 而亞硒酸鈉直接使用毒性較大，給藥量不易控制，有效吸收差。近年來，采取植物噴灑或?qū)?土壤施用無機(jī)硒以增加人體及牲畜有機(jī)硒來源的應(yīng)用已有報(bào)道，但是獲得的有機(jī)硒含量不 高，且生物效應(yīng)不明確。一種有機(jī)硒化合物_富硒酵母已有制劑，但產(chǎn)品組分不穩(wěn)定，含硒 量也不高。因此無毒可利用性好的新型有機(jī)硒很有必要研究開發(fā)。甘露低聚糖(Marmo-oligosaccharides)又稱甘露寡聚糖，是唯一能結(jié)合腸道中 外源性病菌的新型功能性低聚糖，它是甘露聚糖類物質(zhì)的酶降解產(chǎn)物，廣泛存在于魔芋粉、 瓜兒豆膠、田菁膠及多種微生物細(xì)胞壁內(nèi)。它具有低熱量、穩(wěn)定、安全無毒等良好的理化性 質(zhì)，具有降血脂、降血糖、調(diào)節(jié)腸胃和增強(qiáng)免疫等重要保健功能和抗氧化、清除自由基等重 要生理功能。專利CN101104644A公開了一種多糖亞硒酸酯的制法及其應(yīng)用，該法是將糊精、右 旋糖酐、阿拉伯糖基木糖與氟氧化硒加入到吡啶中，加熱反應(yīng)0. 1 100小時(shí)，得到一種 多糖亞硒酸酯，該法反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)，而且氟氧化硒不容易合成；專利200410071808. 6公開了 一種硒化多糖及其制備方法，該法是先合成亞硒酸，將亞硒酸還原成硒酸，并將硒酸根導(dǎo) 入多糖中，產(chǎn)物中硒含量為3mg 200mg/g ；專利CN1284509A公開了殼聚糖亞硒酸鹽及其 制備方法，該法是將殼聚糖的胺基與加入的亞硒酸反應(yīng)，產(chǎn)物中硒含量為0 26% ；專利 CN101654486A公開了一種硒化黃芪多糖的制備方法，該方法將黃芪多糖加入到吡啶中，然 后添加含硒試劑SeOCl2反應(yīng)一段時(shí)間，再用無水乙醇洗滌，沉淀離心，真空冷凍干燥，最終 得到淺粉色硒化黃芪多糖，產(chǎn)物中硒含量為15950 μ g/g，但該法制備過程復(fù)雜，制備條件苛 刻，且-SeOCl2的毒性非常大。專利CN1560088A公開了一種硒化葡甘露聚糖的制備方法， 在一種Se6+溶液中加入乙醇和鹽酸，制成硒化反應(yīng)液，然后加入葡甘露聚糖，制成硒化葡甘 露聚糖，產(chǎn)物中硒含量為125. 4-197. 3mg/Kg。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的缺點(diǎn)與不足，本發(fā)明公開了一 種簡(jiǎn)便、可靠的硒化甘露低聚糖的制備方法，所制備的硒化甘露低聚糖具有較高的保健作用。針對(duì)上述技術(shù)問題，本發(fā)明提出了如下的技術(shù)方案
1)用去離子水分別配制0. lg/mL的亞硒酸溶液及質(zhì)量濃度為20%的甘露低聚糖 溶液；2)將甘露低聚糖溶液置于振蕩水槽中，并向其中按每克甘露低聚糖干粉加入
0-4ml體積濃度為10%的HNO3溶液，然后向甘露低聚糖溶液中緩慢滴加亞硒酸溶液，并 于30-80°C下振蕩反應(yīng)4-12小時(shí)得溶液A，亞硒酸溶液與甘露低聚糖溶液的體積比為
1-10 5 ；3)在反應(yīng)后的溶液中加入足量的lmol/L的FeCl3溶液，用pH = 10的NH3-NH4Cl 緩沖液將溶液pH調(diào)至6 7，形成紅棕色沉淀，放置過夜；4)將放置過夜后的混合液在3500r/min的下離心分離，取上清液，棄去紅棕色沉 淀；5)在該上清液中加入上清液2 3倍體積的無水乙醇，置于4°C冰箱中沉析出硒 化產(chǎn)物，于4000r/min的條件下離心分離，取沉淀，棄去上清液；6)然后對(duì)沉淀物用無水乙醇洗滌兩次，離心取沉淀物；在50°C以下通風(fēng)干燥，經(jīng) 粉碎得到淡黃色硒化甘露低聚糖。本發(fā)明的有益效果體現(xiàn)在本發(fā)明所述硒化甘露低聚糖的制備方法將甘露低聚糖 與硒結(jié)合，簡(jiǎn)便可靠、穩(wěn)定性好，反應(yīng)產(chǎn)物硒化甘露低聚糖仍然保持低聚糖的基本構(gòu)型，既 能避免無機(jī)硒對(duì)人和動(dòng)物使用后產(chǎn)生的毒性作用，又能使結(jié)合在甘露低聚糖上的硒緩慢釋 放，延長(zhǎng)硒在體內(nèi)的停留時(shí)間，根據(jù)本發(fā)明所述方法制備的硒化甘露低聚糖既保留了甘露 低聚糖的生物學(xué)功能，又可發(fā)揮微量元素硒的生理活性，同時(shí)，其功能相對(duì)于甘露低聚糖和 硒均有所提升，通過實(shí)驗(yàn)證明，硒化甘露低聚糖較甘露低聚糖對(duì)超氧陰離子和羥自由基的 清除效率均有所提高，尤其是對(duì)羥自由基的清除效率提高非常明顯。硒化甘露低聚糖具有以下功能解毒排毒硒具有拮抗鉛、汞、鎘等重金屬元素和降解黃曲霉毒素，清除體內(nèi)代謝 廢物的功能；甘露低聚糖具有吸附黃曲霉毒素的功能，也能快速清理腸道垃圾。硒化甘露低 聚糖可將解毒與排毒功能有機(jī)結(jié)合，加快體內(nèi)毒素、廢物的排泄。防癌抗癌硒和甘露低聚糖均能提高機(jī)體免疫功能，都具有抗氧化、清除自由基、 促進(jìn)體內(nèi)毒素及代謝廢物排出、保護(hù)細(xì)胞膜完整性及抗突變作用、降低致癌物活性、降低抗 癌藥物的毒副作用等功效，故硒化甘露低聚糖具有良好的防癌抗癌作用。降脂降糖甘露低聚糖有明顯的降脂降糖作用，硒具有類似胰島素的作用，硒化甘 露低聚糖是良好的降糖產(chǎn)品。它可在結(jié)腸內(nèi)發(fā)酵產(chǎn)生丙酸鹽，加速糖酵解；發(fā)揮類似胰島素 的作用，加速糖代謝；影響腸道激素水平，調(diào)節(jié)糖類和脂肪的吸收平衡?？顾ダ衔事兜途厶强梢栽鰪?qiáng)機(jī)體谷胱甘肽過氧化酶及體內(nèi)20多種含硒酶 和蛋白質(zhì)的活性，使體內(nèi)細(xì)胞、組織免受過氧化損傷并保持機(jī)體的生理活性，同時(shí)可以及時(shí) 排出體內(nèi)毒素和代謝廢物。因此具有明顯的延緩衰老的作用。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說明。實(shí)施例1 1)用去離子水分別配制0. lg/mL的亞硒酸溶液及質(zhì)量濃度為20%的甘露低聚糖溶液；2)將甘露低聚糖溶液置于振蕩水槽中，然后向甘露低聚糖溶液中緩慢滴加亞硒 酸溶液，并于50°C下振蕩反應(yīng)9小時(shí)得溶液A，亞硒酸溶液與甘露低聚糖溶液的體積比為 1:5;3)在反應(yīng)后的溶液中加入足量的lmol/L的FeCl3溶液，用pH = 10的NH3-NH4Cl 緩沖液將溶液pH調(diào)至6 7，形成紅棕色沉淀，放置過夜；4)將放置過夜后的混合液在3500r/min的下離心分離，取上清液，棄去紅棕色沉 淀；5)在該上清液中加入上清液2倍體積的無水乙醇，置于4°C冰箱中沉析出硒化產(chǎn) 物，于4000r/min的條件下離心分離，取沉淀，棄去上清液；6)然后對(duì)沉淀物用無水乙醇洗滌兩次，離心取沉淀物；在50°C以下通風(fēng)干燥，經(jīng) 粉碎得到淡黃色硒化甘露低聚糖。實(shí)施例2 1)用去離子水分別配制0. lg/mL的亞硒酸溶液及質(zhì)量濃度為20%的甘露低聚糖 溶液；2)將甘露低聚糖溶液置于振蕩水槽中，并向其中按每克甘露低聚糖干粉加入Iml 體積濃度為10%的HNO3溶液，然后向甘露低聚糖溶液中緩慢滴加亞硒酸溶液，并于30°C下 振蕩反應(yīng)12小時(shí)得溶液A，亞硒酸溶液與甘露低聚糖溶液的體積比為4 5 ；3)在反應(yīng)后的溶液中加入足量的lmol/L的FeCl3溶液，用pH = 10的NH3-NH4Cl 緩沖液將溶液pH調(diào)至6 7，形成紅棕色沉淀，放置過夜；4)將放置過夜后的混合液在3500r/min的下離心分離，取上清液，棄去紅棕色沉 淀；5)在該上清液中加入上清液2. 8倍體積的無水乙醇，置于4°C冰箱中沉析出硒化 產(chǎn)物，于4000r/min的條件下離心分離，取沉淀，棄去上清液；6)然后對(duì)沉淀物用無水乙醇洗滌兩次，離心取沉淀物；在50°C以下通風(fēng)干燥，經(jīng) 粉碎得到淡黃色硒化甘露低聚糖。實(shí)施例3 1)用去離子水分別配制0. lg/mL的亞硒酸溶液及質(zhì)量濃度為20%的甘露低聚糖 溶液；2)將甘露低聚糖溶液置于振蕩水槽中，并向其中按每克甘露低聚糖干粉加入2ml 體積濃度為10%的HNO3溶液，然后向甘露低聚糖溶液中緩慢滴加亞硒酸溶液，并于60°C下 振蕩反應(yīng)7小時(shí)得溶液A，亞硒酸溶液與甘露低聚糖溶液的體積比為7 5 ；3)在反應(yīng)后的溶液中加入足量的lmol/L的FeCl3溶液，用pH = 10的NH3-NH4Cl 緩沖液將溶液pH調(diào)至6 7，形成紅棕色沉淀，放置過夜；4)將放置過夜后的混合液在3500r/min的下離心分離，取上清液，棄去紅棕色沉 淀；5)在該上清液中加入上清液2. 3倍體積的無水乙醇，置于4°C冰箱中沉析出硒化 產(chǎn)物，于4000r/min的條件下離心分離，取沉淀，棄去上清液；6)然后對(duì)沉淀物用無水乙醇洗滌兩次，離心取沉淀物；在50°C以下通風(fēng)干燥，經(jīng)粉碎得到淡黃色硒化甘露低聚糖。實(shí)施例4:1)用去離子水分別配制0. lg/mL的亞硒酸溶液及質(zhì)量濃度為20%的甘露低聚糖 溶液；2)將甘露低聚糖溶液置于振蕩水槽中，并向其中按每克甘露低聚糖干粉加入4ml 體積濃度為10%的HNO3溶液，然后向甘露低聚糖溶液中緩慢滴加亞硒酸溶液，并于80°C下 振蕩反應(yīng)4小時(shí)得溶液A，亞硒酸溶液與甘露低聚糖溶液的體積比為10 5 ；3)在反應(yīng)后的溶液中加入足量的lmol/L的FeCl3溶液，用pH = 10的NH3-NH4Cl 緩沖液將溶液pH調(diào)至6 7，形成紅棕色沉淀，放置過夜；4)將放置過夜后的混合液在3500r/min的下離心分離，取上清液，棄去紅棕色沉 淀；5)在該上清液中加入上清液3倍體積的無水乙醇，置于4°C冰箱中沉析出硒化產(chǎn) 物，于4000r/min的條件下離心分離，取沉淀，棄去上清液；6)然后對(duì)沉淀物用無水乙醇洗滌兩次，離心取沉淀物；在50°C以下通風(fēng)干燥，經(jīng) 粉碎得到淡黃色硒化甘露低聚糖。所得硒化甘露低聚糖產(chǎn)物中硒含量為0. 8-4. 5mg/g,經(jīng)過紫外掃描和紅外掃描分 析表明，硒化甘露低聚糖仍然保持低聚糖的基本構(gòu)型，其中的硒元素以兩種形式存在，一是 與羥基發(fā)生酯化反應(yīng)形成硒酯結(jié)構(gòu)，二是在糖醚鍵處開環(huán)形成了 C-Se-H結(jié)構(gòu)。
權(quán)利要求
一種硒化甘露低聚糖的制備方法，其特征在于包括以下步驟1)用去離子水分別配制0.1g/mL的亞硒酸溶液及質(zhì)量濃度為20％的甘露低聚糖溶液；2)將甘露低聚糖溶液置于振蕩水槽中，并向其中按每克甘露低聚糖干粉加入0 4ml體積濃度為10％的HNO3溶液，然后向甘露低聚糖溶液中緩慢滴加亞硒酸溶液，并于30 80℃下振蕩反應(yīng)4 12小時(shí)得溶液A，亞硒酸溶液與甘露低聚糖溶液的體積比為1 10∶5；3)在反應(yīng)后的溶液中加入足量的1mol/L的FeCl3溶液，用pH＝10的NH3 NH4Cl緩沖液將溶液pH調(diào)至6～7，形成紅棕色沉淀，放置過夜；4)將放置過夜后的混合液在3500r/min的下離心分離，取上清液，棄去紅棕色沉淀；5)在該上清液中加入上清液2～3倍體積的無水乙醇，置于4℃冰箱中沉析出硒化產(chǎn)物，于4000r/min的條件下離心分離，取沉淀，棄去上清液；6)然后對(duì)沉淀物用無水乙醇洗滌兩次，離心取沉淀物；在50℃以下通風(fēng)干燥，經(jīng)粉碎得到淡黃色硒化甘露低聚糖。
全文摘要
本發(fā)明是一種硒化甘露低聚糖的制備方法。它是用甘露低聚糖和亞硒酸在一定條件下反應(yīng)所得，產(chǎn)物中硒含量為0.8～4.5mg/g。在酸性環(huán)境下，將亞硒酸溶液滴加到甘露低聚糖溶液中，在一定溫度下反應(yīng)；然后加入FeCl3溶液，去除未反應(yīng)的亞硒酸；再加入乙醇，使硒化甘露低聚糖沉析出來，經(jīng)過二次洗滌后低溫烘干即可得到產(chǎn)物。產(chǎn)物經(jīng)過紫外掃描和紅外掃描分析表明，硒化甘露低聚糖仍然保持低聚糖的基本構(gòu)型，硒可能有兩種存在形式，一是與羥基發(fā)生酯化反應(yīng)形成硒酯結(jié)構(gòu)，二是在糖醚鍵處開環(huán)形成了C-Se-H結(jié)構(gòu)。
文檔編號(hào)A61P35/00GK101941994SQ201010259989
公開日2011年1月12日 申請(qǐng)日期2010年8月23日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月23日
發(fā)明者李鑫, 毛跟年, 瞿建波, 許牡丹, 郭倩 申請(qǐng)人:陜西科技大學(xué)