專利名稱：：青稞黃酮高含量提取物的制備方法及其在保健品中的應用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及青稞黃酮提取物的制備方法，尤其涉及一種青稞黃酮高含量提取物的制備方法及其在保健品中的應用。
背景技術(shù)：
：生活在高海拔地區(qū)或到高原旅游的人們，遇到的最為突出的問題就是容易產(chǎn)生疲勞及因高原性缺氧所帶來的身體不適，由于在極為惡劣的高原低氧環(huán)境條件下，人體正常的生理代謝發(fā)生較大的改變，因此身體免疫力下降，出現(xiàn)頭痛、頭暈、乏力、失眠等一系列機體缺氧性癥狀，嚴重影響了人們工作效率和身體健康。青稞(HordeumvulgareL.var.nudumHook,f.)是禾本禾斗大麥屬(Hordeumvulgare)的一種禾谷類作物，因其內(nèi)外穎殼分離，籽粒裸露，故又稱裸大麥、米大麥、元麥。青稞在青藏高原具有悠久的栽培歷史，距今已有3500年，主要分布在西藏、青海、四川省甘孜和阿壩藏族自治州、甘肅省甘南藏族自治州以及云南、貴州等地海拔42004500米的青藏高寒地區(qū)，是西藏四寶之首糌粑的主要原料，同時也是青藏高原農(nóng)業(yè)文化的象征。青稞具有豐富的營養(yǎng)價值和突出的醫(yī)藥保健作用。據(jù)《本草拾遺》記載:青稞，下氣寬中、壯精益力、除濕發(fā)汗、止瀉。藏醫(yī)典籍《晶珠本草》更把青稞作為一種重要藥物，用于治療多種疾病。近幾年，青稞的開發(fā)研究主要集中在種子中的功能成分e-葡聚糖方面，有關(guān)青稞幼苗中黃酮類的活性成分開發(fā)研究相對較少。據(jù)統(tǒng)計，國內(nèi)外發(fā)表的關(guān)于青稞黃酮類物質(zhì)的研究論文主要集中在其化學結(jié)構(gòu)的測定、定性定量分析和清除自由基等藥效學研究上，而研究結(jié)果表明，青稞幼苗中含有高活性、結(jié)構(gòu)獨特的黃酮類物質(zhì)(主要成分是大麥黃苷Lutonarin和皂草黃苷Saponarin)，總黃酮提取物的抗疲勞和耐缺氧功效作用明顯，但有關(guān)其生產(chǎn)工藝、高含量黃酮保健產(chǎn)品及其制劑工藝均未見報道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種高含量黃酮的青稞黃酮高含量提取物的制備方法。本發(fā)明所要解決的另一個技術(shù)問題是提供一種青稞黃酮高含量提取物在保健品中的應用。為解決上述問題，本發(fā)明所述的一種青稞黃酮高含量提取物，其特征在于所述提取物中總黃酮的含量為20%~45%;有效成分大麥黃苷含量為12%~25%，皂草黃苷含量為8%~20%。所述大麥黃苷的化學結(jié)構(gòu)如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>所述皂草黃苷的化學結(jié)構(gòu)式如下:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>一種如上所述的青稞黃酮高含量提取物的制備方法，包括以下步驟(1)將干燥、粉碎后的青稞幼苗加含水乙醇溶液用常規(guī)的回流提取方法進行提取得提取液，回收提取液中的乙醇至醇濃度<10%以下，濾過，得濾液;(2)濾液流經(jīng)填充有吸附材料的吸附柱進行吸附；(3)用水淋洗吸附柱至無色；(4)用濃度20%~60%的乙醇溶液洗脫，收集洗脫液；(5)濃縮回收洗脫液，得稠膏；(6湖濃度80%~95%的乙醇處理，析出沉淀物，干燥即得提取物。所述步驟(l)中的回流提取條件為溫度7010(TC，料液重量比為1:40~1:80，乙醇濃度20%~50%。所述步驟(2)中的吸附材料為大孔吸附樹脂。所述步驟(4)中的洗脫液乙醇濃度為20%~60%。一種如上所述的青稞黃酮高含量提取物在保健品中的應用，其特征在于:將青稞黃酮提取物粉碎，過200400目篩后加入常規(guī)藥用輔料，混合、加工成口服制劑。所述口服制劑為片劑、硬膠囊、軟膠囊、顆粒劑或口服液。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點1、采用本發(fā)明方法制得的青稞黃酮提取物的性狀呈黃色粉末，有特殊香味，總黃酮量達到20%~45%，其中有效成分大麥黃苷達到12%~25%，皂草黃苷達到8%~20%。2、經(jīng)對本發(fā)明所制提取物進行功效學研究表明，該提取物具有顯著的抗疲勞、抗缺氧作用。a.青稞黃酮提取物動物抗疲勞爬桿試驗選取昆明種小鼠50只，體重18土2g，分為空白對照組和給藥組。給藥組分高、中、低三個劑量組，陽性對照組為VE膠囊，空白對照組給予相同體積的蒸鎦水，每天一次，連續(xù)7天，末次給藥后半小時，進行爬桿實驗。爬桿實驗的長短可以反應動物靜用力時疲勞的程度。結(jié)果見表h表l青稞黃酮提取物的抗疲勞作用(動物爬桿試驗)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>與空白比*P<0.05由表1得出，給藥高、中劑量組和陽性組與空白組有顯著差異，高、中、低劑量提取物組均有顯著的抗疲勞作用。b.青稞黃酮提取物動物抗疲勞游泳試驗-選取昆明種小鼠50只，體重18士2g，分為空白對照組和給藥組。給藥組分1.5g/kg、2.5g/kg、3.0g/kg，陽性對照組為VE膠囊，空白對照組給予相同體積的蒸鎦水，每天一次，連續(xù)7天，末次給藥后半小時，鼠尾根部負荷5%體重的螺絲進行負重游泳實驗。結(jié)果見表2:表2青稞黃酮提取物的抗疲勞作用(動物負重游泳試驗)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>由表2得出，給藥高、中、低劑量組和陽性組與空白組有顯著差異；高、中、低劑量提取物組均有顯著的抗疲勞作用。c.青稞黃酮提取物動物抗缺氧試驗選取昆明種小鼠50只，體重18±2g，分為空白對照組和給藥組。給藥組分1.5g/kg、2.5g/kg、3g/kg，陽性對照組為紅景天膠囊，給藥劑量為2g/kg，空白對照組給予相同體積的蒸鎦水，每天一次，連續(xù)7天，末次給藥后半小時，進行耐缺氧實驗。結(jié)果見表3:表3青稞黃酮提取物的抗缺氧作用<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>與空白比*P<0.05;**P<0.01由表3得出，給藥高、中劑量組與空白組有顯著差異，高、中劑量提取物組均有抗缺氧作用。3、在本發(fā)明方法制得的青稞黃酮提取物中加入常規(guī)藥用輔料，如填充劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑及其包衣材料以及用于軟膠囊的植物油類、脂肪類填充劑，可制成具有抗疲勞、抗缺氧作用的制劑。具體實施例方式一種青稞黃酮高含量提取物，其總黃酮的含量為20%~45%，有效成分大麥黃苷(Lutonarin)含量為12°/。~25%，皂草黃苷(Saponarin)含量為8%~20%。Lutonarin和Saponarin的化學結(jié)構(gòu)如下實施例1取干燥的青稞幼苗原料2Kg，切成l-2cm的小段或粉碎成粗粉，用原料重量40-80倍量、濃度為20%~50%的乙醇溶液，在溫度70-100'C下提取1~4次，每次0.54小時，得提取液；然后采用鄭州長城科工貿(mào)有限公司生產(chǎn)的SHB-C型真空泵抽氣減壓，回收提取液中的乙醇至醇濃度<10%后，常溫靜置0.5lh，用200~400目濾布過濾，得濾液。將300-350L濾液流經(jīng)用大孔樹脂AB-8(來源南開大學化工廠)填充的直徑10厘米、高120厘米的玻璃吸附柱，先用體積為填充材料10~15倍量的水淋洗至無色；再用體積為填充材料2030倍量、濃度為20%~60%的乙醇洗脫后，用無錫星海王生化設備有限公司生產(chǎn)的R2002K型20L旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮回收洗脫液，得稠膏；最后用80%~95%乙醇先熱溶再冷卻至常溫，析出沉淀物，以40005000轉(zhuǎn)/分的轉(zhuǎn)速離心過濾，然后放入天津市泰斯特儀器有限公司生產(chǎn)的101—1A型烘箱(溫度控制在809(TC)內(nèi)干燥，即得青稞黃酮高含量提取物。該提取物重18.6g，收率0.93%，提取物經(jīng)高效液相色譜HPLC(來源美國安捷倫公司，Agilent1100)測定含Lutonarin28%;Saponarin17%，總黃酮量為45°/。。實施例2取干燥的青稞幼苗原料2Kg，切成l~2cm的小段或粉碎成粗粉，用原料重量4080倍量、濃度為20%50%的乙醇溶液，在溫度70-100"C下提取1~4次，每次0.5~4小時，得提取液；然后采用真空泵抽氣減壓，回收提取液中的乙醇至醇濃度<10%后，常溫靜置0.5lh,用200-400目濾布過濾，得濾液。將300350L濾液流經(jīng)用大孔樹脂D101(來源南開大學化工廠)填充的玻璃吸附柱，先用體積為填充材料10-15倍量的水淋洗至無色；再用體積為填充材料2030倍量、濃度為20%60%的乙醇洗脫后，用20L旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮回收洗脫液，得稠膏；最后用80%~95%乙醇先熱溶再冷卻至常溫，析出沉淀物，以4000-5000轉(zhuǎn)/分的轉(zhuǎn)速離心過濾，然后放入809(TC烘箱內(nèi)干燥，即得青稞黃酮高含量提取物。該提取物重12.4g，收率0.62°/。，提取物經(jīng)HPLC測定含Lutonarin12%;Saponarin8%，總黃酮量為20%。實施例3取干燥的青稞幼苗原料2Kg，切成l~2cm的小段或粉碎成粗粉，用原料重量40-80倍量、濃度為20%~50%的乙醇溶液，在溫度70~100'C下提取1~4次，每次0.5~4小時，得提取液；然后采用真空泵抽氣減壓，回收提取液中的乙醇至醇濃度<10%后，常溫靜置0.5lh，用200-400目濾布過濾，得濾液。將300350L濾液流經(jīng)用大孔樹脂D140(來源四川晨光工程設計院)填充的玻璃吸附柱，先用體積為填充材料1015倍量的水淋洗至無色；再用體積為填充材料20~30倍量、濃度為20%~60%的乙醇洗脫后，用20L旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮回收洗脫液，得稠膏；最后用80%95%乙醇先熱溶再冷卻至常溫，析出沉淀物，以4000~5000轉(zhuǎn)/分的轉(zhuǎn)速離心過濾，然后放入809(TC烘箱內(nèi)干燥，即得青稞黃酮高含量提取物。該提取物重16.5g，收率0.82°/。，提取物經(jīng)HPLC測定含Lutonarin22%;Saponarin14%，總黃酮量為36%。實施例4取干燥的青稞幼苗原料2Kg，切成l~2cm的小段或粉碎成粗粉，用原料重量40-80倍量、濃度為20%~50%的乙醇溶液，在溫度70-100"C下提取14次，每次0.54小時，得提取液；然后采用真空泵抽氣減壓，回收提取液中的乙醇至醇濃度<10%后，常溫靜置0.5lh，用200-400目濾布過濾，得濾液。將450-500L濾液流經(jīng)用大孔樹脂AB-8填充的玻璃吸附柱，先用體積為填充材料10~15倍量的水淋洗至無色；再用體積為填充材料20~30倍量、濃度為20%~60%的乙醇洗脫后，用20L旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮回收洗脫液，得稠膏；最后用80%~95%乙醇先熱溶再冷卻至常溫，析出沉淀物，以40005000轉(zhuǎn)/分的轉(zhuǎn)速離心過濾，然后放入809(TC烘箱內(nèi)干燥，即得青稞黃酮高含量提取物。該提取物重20.4g，收率1.02%，提取物經(jīng)HPLC測定含Lutonarin25。/。；Saponarin20°/。，總黃酮量為45%。實施例5含有青稞黃酮提取物片劑的制取。處方每粒青稞黃酮提取物50mg微晶纖維60mg淀粉85mg硬脂酸鎂5mg制法將青稞黃酮提取物粉碎，過200-400目篩后與各種輔料按配方比例混合均勻；用80°/。乙醇制粒，整粒，壓制成片，每片200mg。實施例6含有青稞黃酮提取物硬膠囊的制取。處方每粒青稞黃酮提取物50mg淀粉140mg聚乙二醇10mg制法將青稞黃酮提取物粉碎，過200400目篩后與各種輔料按配方比例混合均勻；與各種輔料按配方比例混合均勻，裝膠囊，每粒200mg。實施例7含有青稞黃酮提取物軟膠囊的制取。處方每粒青稞黃酮提取物50mg蜂蠟10mg食用植物油140mg制法將青稞黃酮提取物粉碎，過200400目篩；按配方比例取食用植物油加熱到8(TC，加入助懸劑蜂蠟，使其溶化，放涼至304(TC，加入提取物粉末，混勻，過上海索維機電設備有限公司生產(chǎn)的SMA-0.75型膠體磨，壓制成軟膠囊。實施例8含有青稞黃酮提取物顆粒劑的制取。青稞黃酮提取物50mg乳糖950mg制法將青稞黃酮提取物粉碎，過200-400目篩后按配方比例與乳糖混合均勻，用70%乙醇制粒，整粒，分裝(每小袋lg)即可。實施例9含有青稞黃酮提取物口服液的制取。青稞黃酮提取物2.5g山梨酸鉀0.3g白砂糖60g純水1000g制法將青稞黃酮提取物采用粉碎，過200-400目篩后放入8090'C純水中熱溶，再采用上海浦東天本離心機械有限公司生產(chǎn)的GQ75型管式離心機以20000轉(zhuǎn)/分的速率過濾除不溶物，然后加山梨酸鉀、白砂糖，混勻，經(jīng)紫外線滅菌后進行罐裝(每支20ml)。權(quán)利要求1、一種青稞黃酮高含量提取物，其特征在于所述提取物中總黃酮的含量為20％～45％；有效成分大麥黃苷含量為12％～25％，皂草黃苷含量為8％～20％。2、如權(quán)利要求1所述的一種青稞黃酮高含量提取物，其特征在于所述大麥黃苷的化學結(jié)構(gòu)如下.-<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>3、如權(quán)利要求1所述的一種青稞黃酮高含量提取物，其特征在于所述皂草黃苷的化學結(jié)構(gòu)式如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>4、一種如權(quán)利要求1所述的青稞黃酮高含量提取物的制備方法，包括以下步驟(1)將干燥、粉碎后的青稞幼苗加含水乙醇溶液用常規(guī)的回流提取方法進行提取得提取液，回收提取液中的乙醇至醇濃度<10%以下，濾過，得濾液；(2)濾液流經(jīng)填充有吸附材料的吸附柱進行吸附；(3)用水淋洗吸附柱至無色；(4)用濃度20%~60%的乙醇溶液洗脫，收集洗脫液；(5)濃縮回收洗脫液，得稠膏；(6)用濃度80%~95%的乙醇處理，析出沉淀物，干燥即得提取物。5、如權(quán)利要求4所述的青稞黃酮高含量提取物的制備方法，其特征在于:所述步驟(l)中的回流提取條件為溫度7010(TC，料液重量比為l:40~1:80，乙醇濃度20%~50%。6、如權(quán)利要求4所述的青稞黃酮高含量提取物的制備方法，其特征在于-所述步驟(2)中的吸附材料為大孔吸附樹脂。7、如權(quán)利要求4所述的青稞黃酮高含量提取物的制備方法，其特征在于:所述步驟(4)中的洗脫液乙醇濃度為20%~60%。8、一種如權(quán)利要求1所述的青稞黃酮高含量提取物在保健品中的應用，其特征在于將青稞黃酮提取物粉碎，過200-400目篩后加入常規(guī)藥用輔料，混合、加工成口服制劑。9、如權(quán)利要求8所述的青稞黃酮高含量提取物在保健品中的應用，其特征在于所述口服制劑為片劑、硬膠囊、軟膠囊、顆粒劑或口服液。全文摘要本發(fā)明涉及一種青稞黃酮高含量提取物的制備方法，該方法采用常規(guī)含水醇溶媒回流提取方法將黃酮類化合物從青稞幼苗中提取出來，再采用大孔樹脂吸附的方法將提取液中的黃酮類化合物富集，又用乙醇溶液洗脫、濃縮、干燥，制得含總黃酮20％～45％的青稞黃酮提取物。該提取物具有抗疲勞、抗缺氧功效，可用于制備抗疲勞、抗缺氧保健品。文檔編號A61K9/20GK101361932SQ200810150850公開日2009年2月11日申請日期2008年9月3日優(yōu)先權(quán)日2008年9月3日發(fā)明者李玉林,杜玉枝,沈裕琥申請人:中國科學院西北高原生物研究所