專利名稱：13-鹵代-3,15-二氧代赤霉酸酯及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥衛(wèi)生和化學(xué)領(lǐng)域的藥用化合物，特別是一種13-鹵代-3， 15-二氧代赤霉酸酯及其制備方法。 背景纟支術(shù)癌癥是嚴(yán)重威脅人類健康的一類疾病。目前用于治療癌癥的主要手段是化學(xué) 療法。臨床應(yīng)用的化療藥物絕大多數(shù)都有使患者惡心、嘔吐、白細(xì)胞下降、骨 髓抑制等毒副作用，影響了病人情緒及身體健康，因而大大限制了化療藥物的 臨床應(yīng)用。因此，尋找高活性，無毒或低毒副作用的抗癌化合物成為新藥研究 的一項(xiàng)重要課題。赤霉素是一類廣泛存在于植物和微生物體內(nèi)、具有植物生長促進(jìn)或植物生 長抑制生物活性的四環(huán)二萜類化合物，以商業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)的赤霉素(如GA3、 GA4、 GA7)為原料進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造和修飾，以期發(fā)現(xiàn)具有更好植物生長促進(jìn)或植 物生長抑制活性以及其它諸如抗菌、抗癌等新活性的赤霉素及其衍生物有著重 要的學(xué)術(shù)價(jià)值和實(shí)用價(jià)值。在本發(fā)明前期的研究中，本申請(qǐng)的發(fā)明人以赤霉酸(GA3)為原料合成得到 的3位和15位同時(shí)被氧化成羰基的赤霉酸衍生物具有很強(qiáng)的抗癌活性，同時(shí)對(duì) 正常細(xì)胞毒性很低，該項(xiàng)成果已于2004年申請(qǐng)了專利并獲得授權(quán)，專利號(hào) ZL200410021939。在本發(fā)明中我們又對(duì)此類結(jié)構(gòu)的13位進(jìn)行了進(jìn)一步衍生化研 究。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提出一種具有結(jié)構(gòu)通式(I)的化合物13-卣代-3， 15-二氧 代赤霉酸酯及其制備方法，該類化合物具有抗癌作用。式中W為曱基、2個(gè)碳到5個(gè)碳的烷基、芐基;W為氟、氯、溴、碘。本發(fā)明合成了系列13位卣代的3， 15-二氧代赤霉酸酯類化合物，經(jīng)抗癌活性實(shí)驗(yàn)證明，這些化合物具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性和對(duì)正常細(xì)胞的低毒性。 本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的以3， 13， 15-三羥基赤霉酸酯(1)或3, 13， 15-三羥基赤霉酸節(jié)酯(2)為起始原 料，(1)或(2)參照專利ZL200410021939中的方法制備。(1)或(2)在低極性溶劑 中低溫下加入二曱亞砜與適當(dāng)比例的草酰氯或二曱亞砜與適當(dāng)比例的氯化亞砜 形成的氧化劑，氧化3位和15位羥基為3, 15-二羰基的同時(shí)，13位同時(shí)發(fā)生 氯代反應(yīng)生成具有結(jié)構(gòu)通式(I)的化合物(3)或(4)。所述的低極性溶劑為苯、曱苯、二氯甲烷、三氯曱烷、正已烷、環(huán)已烷、 石油醚，用量為10-100mL溶劑/g底物；以二曱亞砜與草酰氯或二曱亞石風(fēng)與氯 化亞砜在-7(TC至-40。C下形成的化合物為氧化劑，加入侍氧化和氯代的底物 后反應(yīng)5-30分鐘，再加入三乙胺進(jìn)行反應(yīng)5-30分鐘。所述的化合物用量按摩爾比為底物/二曱亞石風(fēng)/草酰氯或氯化亞^風(fēng)/三乙胺 =1/2 ~ 50/2 ~ 6/4 ~ 100。采用各化合物用量按摩爾比為底物/二曱亞砜/草酰 氯/三乙胺=1/10/5/14。以化合物(1)或(2)制備(3)或(4)的步驟如下:式中(l)= CH3; 2國5個(gè)石灰的烷基，(2) Rq = PhCH2 ,(3) R = CH3; 2-5個(gè)碳的烷基，(4) R！ = PhCH2, a) DMSO， C10CCOCl，NEt3/CH2Cl2或DMSO,SOCl2,NEt3/CH2Cl2。 13-氯-3， 15_二氧> 赤霉酸酯(3)或(4)在四氫呋喃、乙腈、丙酮、N, N-二甲基曱酰胺、二曱亞砜、六曱基磷酰三胺等極性非質(zhì)子性溶劑中與氟化鈉、 氟化鉀、氟化銨、四丁基氟化銨等氟化試劑反應(yīng)得到13-氟-3， 15-二氧代赤霉 酸酯(5)或(6),反應(yīng)溶劑采用丙酮，反應(yīng)溫度采用丙酮回流溫度；氟化試劑 采用氟化鉀，反應(yīng)中各化合物的用量按摩爾比為底物/氟化鉀=1/2~50/，丙 酮用量為10-100 mL /mmol底物，化合物(5)或(6)的制備如下，式中(3)的R廣CH3;2-5個(gè)碳的烷基，(4)的= PhCH2, (5)的R,CH3;2-5個(gè)碳的烷基，(6)R,-PhCH2，b) KF/CH3COCH3。 13-溴-3， 15-二氧代赤霉酸酯(7)和(8)是分別以13-氯-3， 15-二氧代 赤霉酸酯(3)或(4)為原料，在極性非質(zhì)子性溶劑，如四氫呋喃、丙酮、乙 醚、乙腈、二曱亞砜、N， N-二曱基曱酰胺、六曱基磷酰三胺等中與溴化鈉、溴 化鉀、溴化鋰，四丁基溴化銨等溴化試劑反應(yīng)制備，反應(yīng)溶劑采用乙腈，溴化 試劑采用溴化鋰，反應(yīng)溫度采用乙腈回流溫度，反應(yīng)中化合物的用量按摩爾比 為底物/溴化鋰=1/2~50,乙腈用量為10~100 mL /mmo1底物，(7)或(8) 的制備如下，式中(3)的R^CH3;2-5個(gè)碳的烷基，(4)的R4 = PhCH2 , (7)的R！ = CH3; 2-5個(gè)碳的烷基，(8)的R, = PhCH2c ) UBr/CH3CN13會(huì)3, 15-二氧代赤霉酸酯(7)或(8)，亦可由ZL200410021939中的 方法制備的13-羥基-3， 15-二氧代赤霉酸酯(11)或(12)與三溴化磷、吡啶 在二氯曱烷中反應(yīng)制備，反應(yīng)中各化合物的用量按摩爾比為底物/吡啶/三溴 化磷-1/1~ 20/0. 35 ~2， 二氯曱烷用量為10~100 mL /mmo1底物，反應(yīng)溫度采 用-10°C~0°C。制備反應(yīng)式如下(11) R！ = CH3; 2-5個(gè)碳的烷基 (7) R！ = CH3; 2-5個(gè)碳的烷基(12) R！ = PhCH2 (8)= PhCH2d) PBr3/CH2Cl213-碘-3， 15-二氧代赤霉酸酯(9)和(10)是分別以13-氯-3， 15-二氧代 赤霉酸酯(3)或(4)為原料，在極性非質(zhì)子性溶劑，如四氫呋喃、丙酮、乙 醚、乙腈、二甲亞砜、N, N-二曱基曱酰胺、六曱基磷酰三胺等中與碘化鈉、碘 化鉀、碘化鋰，四丁基碘化銨等碘化試劑反應(yīng)制備，反應(yīng)溶劑采用乙腈，石典化 試劑采用碘化鈉，反應(yīng)溫度采用乙腈回流溫度，反應(yīng)中化合物的用量按摩爾比 為底物/硪化鈉=1/2~50,乙腈用量為10-100 mL /mmol底物，(9)或(10) 的制備如下，(3) R = CH3; 2-5個(gè)碳的烷基 (9) R！ =CH3; 2-5個(gè)碳的烷基(4) & = PhCH2 (10) R4 = PhCH2 e) NaI/CH3CN13-硪-3, 15-二氧代赤霉酸酯(9)或(10)亦可由ZL200410021939中的 方法制備的13-羥基-3， 15-二氧代赤霉酸酯(11)或(12 )與三苯基膦、碘和咪唑在二氯甲烷中反應(yīng)制備目標(biāo)物，反應(yīng)中化合物的用量按摩爾比為底物/咪 唑/碘-1/2~30/1~5， 二氯曱烷用量為10 ~ 100 mL/mmo1底物，反應(yīng)溫度采用 -10°C~(TC。 (9)或(10)的制備如下，(11) R, = CH3; 2-5個(gè)石岌的烷基 (9) R！ = CH3; 2-5個(gè)石友的烷基(12) = PhCH2 (10)= PhCH2f) PPh3， imidazole, I2/ CH2C12 13-羥基-3， 15-二氧代赤霉酸酯(11)和(12)除按ZL200410021939中 的方法制備外，還可由13-氯-3, 15-二氧代赤霉酸酯(3)或(4)在丙酮、乙 腈、四氬呋喃、二氯曱烷等極性非質(zhì)子性溶劑中與水和碳酸氳鈉、碳酸鈉、碳 酸銀、三乙胺、二異丙基乙基胺等減反應(yīng)制備。采用丙酮作為溶劑，用量為10 ~ 100 mL /mmo1底物；采用碳酸銀作為堿；反應(yīng)溫度采用丙酮回流溫度；反應(yīng)中 化合物的用量按摩爾比為底物/碳酸銀=1/1~2;采用水用量按體積為丙酮體 積的1/4，丙酮用量采用5 10mL/mmol底物。(11)或(12 )的制備步驟如下(3) R！ = CH3; 2-5個(gè)碳的烷基 (11) R！ = CH3; 2-5個(gè)碳的烷基(4) & = PhCH (12)= PhCHg) Ag2C03， H20/CH3COCH3 具有結(jié)構(gòu)通式(I)的化合物與至少一種藥物上可接受的賦形劑或載體制 得的藥物組合可用于治療癌癥。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合實(shí)施方式列舉本發(fā)明的典型化合物，但本發(fā)明并不僅限于這些實(shí) 施例或被這些實(shí)施例所限制。化合物3 13-氯-3， 15-二氧代赤霉酸曱酯制備過程如下混合二曱亞砜(7.6 g， lOOmmol)和二氯曱烷(30mL),冷卻至-70°C，攪拌 下滴加草酰氯(6. 35g， 50隱o1 )， 5分鐘左右加完，控制反應(yīng)溫度為-7(TC至-40。C之間。草酰氯加入10分鐘后滴加3,13,15-三羥基赤霉酸甲酯(3. 76g， lOmmol )與二氯曱垸(20mL)和二曱亞砜(4 mL)配成的溶液，5分鐘左 右加完后，在-7(TC至-40。C之間攪拌反應(yīng)20分鐘。再加入三乙胺(14. 14g，140mmo1)，繼續(xù)在-7(TC至-40。C之間攪拌反應(yīng)15分鐘，纟敬去冷浴， 自然升溫至室溫。反應(yīng)液轉(zhuǎn)入分液漏斗中，加入冰冷卻的乙酸乙酯(60 mL)，依 次用水冷卻的鹽酸(2N, 70mL x 1 )洗和水(30mL x 2 )洗，分出有才幾層，加無水 硫酸鈉干燥，過濾除去干燥劑，減壓蒸出溶劑至干，得黃色固體3. 79g,硅膠柱 層析(正己烷/乙酸乙酯=4 / l)純化得白色結(jié)晶3.45 g,收率87. 9 %。 元素分析C2。HwC106計(jì)算值(°/。) C， 61.47; H, 4.90; Cl， 9.07 實(shí)測(cè)值(°/。) C， 61.45; H， 4.93; Cl， 9.06服R (CDCU 300MHz): 5 7. 19 (d， J=9. 4Hz， 1H), 6. 23(S， 1H) ， 6. 07 (d， J=9.4Hz， 1H), 5. 87(s, 1H)， 3. 63(s, 3H) ， 3. 62 (d， J=10. 2Hz， 1H)， 2. 82 (d, J=10.2Hz， 1H)， 2. 79(d， J=ll. 5Hz， 1H), 2.69-2.62 (m， 1H)， 2.50(d， J=ll. 5Hz, 1H)， 2. 40—2. 10(m， 4H), 1.88(m, 1H), 1. 33(s， 3H).13CNMR(CDCl3，500MHz): 5 200.35， 191.08， 172.71， 170.23， 150.73， 145. 81: 129.75， 121.41， 89.17， 65.95， 65.45, 61.28， 60.54， 52.49， 48.87, 47.25， 41.60， 39.86， 18.02， 11.93.化合物413-氯-3， 15-二氧代赤霉酸節(jié)酯以3， 13， 15-三幾基赤霉酸卡酯(4. 52g， lOmmol )為起始原料，制備方法(反 應(yīng)步聚、投料摩爾比、加料順序、反應(yīng)溫度等)與化合物3 (13-氯-3， 15-二氧 代赤霉酸甲酯)的制備類同，最終得到淺黃色固體產(chǎn)物粗品4. 43g，硅膠柱層析 (正己烷/乙酸乙酯=8/ l)純化得白色結(jié)晶4.15 g，收率88.7%,。 元素分析CmH23C106計(jì)算值(％): C， 66.88; H， 4.97; Cl， 7.59 實(shí)測(cè)值(％): C， 66.85; H， 5.00; Cl， 7.58^麗R (CDCh， 300MHz): 5 7. 35-7. 20 (m, 5H) ， 7. 18(d， J=9. 4Hz， 1H)，6. 16(s， 1H)， 6. 07(d, J=9. 4Hz， 1H), 5. 84 (s， IH)， 5. 05 (s, 2H) ， 3. 65 (d， J=10.4Hz， IH)， 2. 86(d， J=10. 4Hz， IH)， 2. 77(d， J=ll. 5Hz， IH)， 2. 70-2.62 (m: IH)， 2. 46(d， J=11.5Hz， IH)， 2. 38—2. 09 (m， 4H) ， 1.93—1.79 (m， 1H)， 1. 33(s， 3H)."C NMR (CDC13， 75MHz): 5 200.42， 191.06， 172.69， 169.61, 150.82， 145.79， 134.92， 129.77, 129.70, 128.67, 128.63， 121.26， 89.17, 67.58， 65.90, 65.45， 61.24， 60.60， 49.04， 47.32， 41.60， 39.73， 18.04， 12.01.化合物5 13-氟-3， 15-二氧代赤霉酸甲酯混合13-氯-3， 15-二氧代赤霉酸曱酯(3 ， 391mg，lmmo1)、氟化鉀(1. 51g， 25. 6mmo1)和50 mL丙酮，回流反應(yīng)50小時(shí)，減壓蒸出溶劑至干，加入20mL 二氯曱烷和10mL水，充分?jǐn)嚢韬蠓殖鲇袡C(jī)層，水層再用二氯曱烷(10mLx2) 萃取，合并有機(jī)層，飽和鹽水(1GmL)洗后，加無水硫酸鈉干燥，過濾除去干 燥劑，減壓蒸出溶劑至干，得黃色油狀物390mg,硅膠柱層析(正己烷/乙酸乙 酉旨=3/ 1 )得到白色顆粒狀晶體203mg,收率54. 2%。元素分析C2。H19F06計(jì)算值(。/0: C, 64.17; H， 5.12; F， 5.07 實(shí)測(cè)值(％): C, 64.17; H， 5.10; F， 5.104 NMR (CDCh， 300MHz): 5 7. 19(d， J=9. 3Hz，lH)， 6. 16(s， 1H)， 6. 08 (d， J=9. 3Hz， 1H)， 5. 72(s, 1H)， 3. 65 (s+d， 4H) ， 2. 85 (d， J=10. 2Hz， 1H) ， 2. 62 (d， J=10.8Hz， 1H)， 2. 60-2.20 (m, 4H) ， 2.10-1.85 (m， 2H) ， 1.26(s, 3H).13CNMR(CDC13， 75MHz): 5 200. 47 (d， J=5. 8Hz ) ， 191.08， 172.76， 170.27， 148. 72 (d, J=19. 6Hz), 145.84， 129.80， 119.66, 96. 30 (d， J=200.1Hz), 89.08， 65.56, 61,71， 61. 23(d， J=4. 3Hz ) ， 52. 48, 48.81,48.17， 37. 44 (d， J=16. 7Hz): 34.30 (d， J=27.1Hz)， 17.49(d， J=8. OHz ) ， 11.99.化合物6 13-氟-3， 15-二氧代赤霉酸芐酯以化合物4-—13-氯-3, 15-二氧代赤霉酸芐酯(467mg， l麵ol)為起始原料， 制備方法(反應(yīng)步聚、投料摩爾比、加料順序、反應(yīng)溫度等)與化合物5 (13-氟-3， 15-二氧代赤霉酸曱酯)的制備類同，最終得到淺黃色固體產(chǎn)物粗品430mg， 硅膠柱層析(正己烷/乙酸乙酯-8/ l)純化得白色結(jié)晶230mg，收率51.1%。元素分析C26H F06計(jì)算值(％): C， 69.32; H， 5.15; F, 4.22 實(shí)測(cè)值U): C， 69.33; H， 5.17; F， 4.25^ NMR (CDC13， 300MHz): 5 7. 45—7. 10(m， 5H) ， 7. 12(d， J=9. 6Hz， 1H), 6. Ol(d， J=9. 6Hz， 1H)， 6. OO(s， 1H) ， 5. 60 ( s， 1H)， 5. OO(s， 2H) ， 3. 61 (d, J-10. 4Hz, 1H)， 2. 82(d， J-10. 4Hz， 1H)， 2. 53(d， J=10. 8Hz， 1H), 2. 45-2. 10 (m 4H), 2. 00-1.70 (m， 2H) ， 1.27(s， 3H).13CNMR(CDCl3，75MHz): 5 200. 46 (d， J=5. 8Hz ), 191.06， 172.72, 169.64， 148.75 (d， J=19.7Hz)， 145.81， 134.92， 129.76， 128.75， 128.70， 128.69, 119.37， 96.28 (d， J-200.2Hz), 89.05， 67.59, 65.52， 61.64, 61. 23 (d, J=4. 3Hz)， 48.91,48.20, 37.41 (d, J=16. 7Hz)， 34. 13(d， J=27. 2Hz), 17. 45(d J=7. 8Hz )， 12. 02.化合物7 13-溴-3， 15-二氧代赤霉酸甲酯混合吡啶(168mg，2. lmmol)和二氯曱烷(10mL)， - 40。C外浴冷卻下攪拌、 滴加三溴化磷(72. 6 mg， 0. 27畫1)，加畢，換冰鹽水冷卻，滴加13-羥基-3, 15-二氧代赤霉酸曱酯(11， 106 mg， 0. 27隨o1)與二氯甲烷(2mL )配成的溶 液，攪拌反應(yīng)0. 5小時(shí)后停止反應(yīng)，加入乙酸乙酯(10mL)，混合液轉(zhuǎn)入分液漏 斗中，依次用水、鹽酸(2N)和飽和食鹽水洗，分出有機(jī)層，水層再用乙酸 乙酉旨(5mLx 2 )萃取兩次，飽和食鹽水洗至中性后合并有才幾相，加無水辟u酸 鈉干燥，過濾除去干燥劑，減壓蒸出溶劑至干，得無色油狀物85mg,硅膠柱層 析(正己烷/乙酸乙酯=3/ 1 )得到白色固體65mg,收率55.5%。元素分析C2QH19Br06計(jì)算值(％): C, 55.19; H， 4.40; Br， 18.36 實(shí)測(cè)值(％): C， 55.22; H, 4.42; Br, 18.40丄H NMR (CDC13, 300MHz): 5 7. 18(d， J=9. 4Hz， 1H)， 6. 30(s， 1H)， 6. 08 (d， J=9. 4Hz， 1H)， 5.97 ( s， 1H)， 3.65 ( s， 3H) ， 3. 63(d， J-10. 4Hz， 1H)， 2. 91 (d， J=11.7Hz， 1H)， 2. 82(d， J=10.4Hz， 1H),2. 67(d, J-ll. 7Hz， 1H) ， 2. 50—2. 20 (m， 4H)， 1. 90-1. 75 (m, 1H)， 1. 35(s， 3H).13C雨R (CDC13,75MHz): 5 199.61， 191.07， 172.70， 170.22， 150.29， 145.76， 129.80， 122.93， 89.22， 65.46， 61.19, 60.86， 57.45， 52. 54, 48.95, 47. 00， 42. 74， 41. 34， 18. 43, 11. 95.化合物8 13-溴-3， 15-二氧代赤霉酸芐酯以化合物11—-13-羥基-3， 15-二氧代赤霉酸芐酯(448mg， lmmol)為起始原 料，制備方法(反應(yīng)步聚、投料摩爾比、加料順序、反應(yīng)溫度等)與化合物7 (13-溴-3, 15-二氧代赤霉酸甲酯)的制備類同，最終得到淺黃色固體產(chǎn)物粗 品430mg，硅膠柱層析(正己烷/乙酸乙酯=8/ l)純化得白色結(jié)晶305mg,收率 59. 7%。元素分析C26H23Br06計(jì)算值(％): C, 61.07; H， 4.53; Br， 15.63 實(shí)測(cè)值(％): C, 61.08; H, 4.55; Br, 15.66^ NMR ( CDCh, 300MHz ): 5 7. 50—7. 20 (m， 5H)，7. 17(d， J=9. 4Hz， 1H)， 6. 23(s, 1H)， 6. 08(d, J=9. 4Hz， 1H) ， 5. 94 ( s， 1H)， 5. 05(s, 2H)， 3. 66 (d， J-10.4Hz， 1H)， 2.92(d， J-ll. 7Hz, 1H), 2.86(d， J=10. 4Hz， 1H)，2. 65(d， J=L1. 7Hz， 1H)， 2. 50-2. 20 (m， 4H), 1.90-1. 75 (m， 1H), 1. 35 (s, 3H).13C NMR (CDCh，75MHz): 5 199.68, 191.05， 172.68， 169.60， 150.38, 145.74， 134.97, 129.82, 129.79, 128.72， 128.70, 122.78， 89.22， 67.56, 65.46, 61.15， 60.92， 57.47, 49.12， 47.07， 42.74， 41.21， 18.45， 12.03.化合物9 13-堿-3, 15-二氧代赤霉酸曱酯混合13-氯-3, 15-二氧代赤霉酸甲酯(3 , 391mg， lmmol)、碘化鈉(3. OOg, 20mmo1)和30 mL無水乙腈，回流反應(yīng)50小時(shí)，減壓蒸出溶劑至干，加入20mL 二氯甲烷和10mL水，充分?jǐn)嚢韬蠓殖鲇袡C(jī)層，水層再用二氯曱烷(10mLx2) 萃取，合并有機(jī)層，飽和鹽水(10mL)洗后，加無水^琉酸鈉干燥，過濾除去千 燥劑，減壓蒸出溶劑至干，得黃色油狀物415mg,硅膠柱層析(正己烷/乙酸乙 酉旨=3/ 1 )得到白固體241mg，收率43. 1%。元素分析C2。H191 06計(jì)算值(％): C, 49.81; H， 3.97; I, 26.31 實(shí)測(cè)值(％): C， 49.79; H, 3.99; I， 26.35^ NMR (CDC13, 300MHz): 5 7. 17(d， J=9. 4Hz， 1H)， 6. 36(s, 1H), 6. 08 (d， J=9.4Hz， 1H), 6.03 ( s， 1H)， 3.66 ( s, 3H), 3. 62 (d， J=10. 4Hz, 1H)， 3. 02 (d， J-12，8Hz， 1H), 2. 82(d, J-ll. 6Hz， 1H)，2. 80(d， J=10. 4Hz， 1H)， 2. 40-2.10(m， 4H)， 1.90-1. 75 (m， 1H)， 1. 35 (s， 3H).13C腿(CDC13， 75MHz): 5 198.22， 191.07， 172.69, 170.22， 153.19， 145.70， 129.80， 124.77， 89.34, 65.41， 60.98， 60.95， 52. 55， 48.99， 46.56, 45. 11， 44. 82， 33. 67, 18. 67， 11. 94.化合物IO 13-碘-3, 15-二氧代赤霉酸節(jié)酯以化合物4-—13-氯-3, 15-二氧代赤霉酸節(jié)酯(467mg， lmmol)為起始原料， 制備方法(反應(yīng)步聚、投料摩爾比、加料順序、反應(yīng)溫度等)與化合物9 (13-碘-3, 15-二氧代赤霉酸曱酯)的制備類同，最終得到淺黃色固體產(chǎn)物粗品430mg, 硅膠柱層析(正己烷/乙酸乙酯=8 / 1)純化得白色結(jié)晶303mg,收率54. 3%。元素分析C26H231 06計(jì)算值(％): C， 55.93; H， 4.15; I， 22.73 實(shí)測(cè)值(％): C, 55.93; H， 4.17; I， 22.77丄H NMR ( CDC13， 300MHz ): 5 7. 40—7. 20 (m， 5H),7. 16(d， J=9. 4Hz， 1H), 6.29(s， 1H)， 6. 08(d， J=9. 4Hz， 1H), 6. 00 ( s， 1H) ， 5. 04(s， 2H) ， 3. 65 (d， J-10.4Hz， 1H)， 3. 06(d, J=12.8Hz, 1H), 2. 80(d， J=ll. 6Hz， 1H)，2.79(d， J=10.4Hz， 1H)， 2.40-2. 10 (m， 4H), 1.90-1. 75 (m， 1H)， 1. 35 (s, 3H).13C NMR (CDC13,75MHz): 5 198.29， 191.05, 172.69， 170.20， 153. 28， 145.68,134.93， 129.82， 129.80， 128.71, 128.65, 124.62， 89.34， 67.55, 65.41， 61.01， 60.94, 49.06， 46.63， 45.11， 44.77， 33.67， 18.69, 12.02.化合物ll 13-羥基-3， 15-二氧代赤霉酸曱酯 13-氯-3, 15-二氧代赤霉酸酯(3 ， 391mg，lmmol)溶于丙酮/水(8/2， 10mL) 中，再加入碳酸銀(304mg， 1. lmmol)，混合物攪拌回流反應(yīng)24小時(shí)，仃反應(yīng)， 冷至室溫后過濾，丙酮洗濾餅。濾液減壓濃縮至干，加乙酸乙酯(20 mL)和水 (7 mL),充分?jǐn)嚢韬?，分出有機(jī)層，水層再用乙酸乙酯(10 mLx2)萃兩次， 合并有機(jī)層，飽和鹽水洗后，加無7jc琉酸鈉干燥，過濾除去干燥劑，減壓蒸出 溶劑至干，得白色粉末狀固體355mg，硅月交柱層析(正己烷/乙酸乙酯=3/2) 得到白色固體345mg,收率95. 4%,。元素分析(:2。112。07計(jì)算值(％): C, 64. 51; H, 5. 41實(shí)測(cè)值(％): C， 64. 50; H, 5. 43!H NMR (CDC13， 300MHz): 5 7. 20(d， J=9. 4Hz， 1H)， 6. 13(s, 1H)， 6. 08 (d，J=9. 4Hz， 1H)， 5.70 ( s, 1H), 3.64 ( s， 3H) ， 3. 65 (d， J=10. 2Hz， 1H), 2. 83(d， J=10. 2Hz， 1H)，2. 54(d， J=10. 8Hz， 1H), 2. 40-2. 20 (m， 3H) ， 2. 16(d， J=10. 8Hz, 1H)，1.90-1. 75 (m, 3H) ， 1.35(s, 3H)。13C纖(CDCl3，75MHz): 5 202.15， 191.28, 173.00， 170.60， 152.69， 146.07， 129.74， 118.53， 89.31, 76.00, 65.60， 61.63， 60.86， 52.44， 48.98， 48. 09， 40. 39， 36. 75， 17. 61， 12. 01。化合物12 13-羥基-3， 15-二氧代赤霉酸千酯以化合物4---13-氯-3， 15-二氧代赤霉酸千酯(467mg， lmmol)為起始原料， 制備方法(反應(yīng)步聚、投料摩爾比、加料順序、反應(yīng)溫度等)與化合物11 (13-羥基-3,15-二氧代赤霉酸曱酯)的制備類同，最終得到白色固體產(chǎn)物粗品420mg， 硅膠柱層析(正己烷/乙酸乙酯=3/ l)純化得白色結(jié)晶295mg，收率65.8%。元素分析C2JU)7計(jì)算值(％): C， 69. 63; H， 5. 39 實(shí)測(cè)值(%): C， 69. 64; H， 5. 41丄H NMR (CDCl3，300MHz): 5 7. 40-7. 10(m, 6H) ， 6. 08 (d， J=9. 9Hz, 1H)， 6. 06(s, 1H)，5. 65(s， 1H)，5. 06(s， 2H) ， 3. 68 ( d， J=10. 2Hz， 1H)， 2. 86(d, J-10. 8Hz， 1H)，2. 51(d， J=ll. lHz, 1H)， 2.40—2.15 (m, 3H) ， 2. 07 (d, J=ll. lHz， 1H)，1.90-1. 70 (m， 3H)， 1.34(s， 3H).13C NMR (CDC13， 75MHz): 5 202.50, 191.27， 172.98, 170.00， 152.86， 146.05， 135.10， 129.74， 128.84， 128.71， 128.67, 118.18， 89.32， 75.99， 67.55， 65.59， 61.61， 60.87， 49.15, 48.18， 40.46, 36.53， 17.59, 12.06.化合物3 ~ 10的抗癌活性實(shí)驗(yàn)化合物3 10按照MTT方法對(duì)K562 (人白血病細(xì)胞林)等六種腫瘤細(xì)胞抹 的半數(shù)抑制濃度(IC5。)測(cè)定結(jié)果表明:化合物3 ~ 10的IC5。 = 3. 5 ~ 45. 3 ju g/mL， 均具有較強(qiáng)的對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制作用。
權(quán)利要求
1、一種具有下述結(jié)構(gòu)通式(I)的化合物，名稱為13-鹵代-3，15-二氧代赤霉酸酯，id="icf0001" file="S2008100582971C00011.gif" wi="139" he="46" top= "54" left = "35" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="no"/>
2、如權(quán)利要求1所述的具有結(jié)構(gòu)通式(I )的化合物的制備方法，其特 征是a.以3， 13， 15-三羥基赤霉酸酯(l)或3， 13， 15-三羥基赤霉酸節(jié)酯(2)為起 始原料，首先在低極性溶劑中，低溫下加入二甲亞砜與適當(dāng)比例的草酰氯或適 當(dāng)比例的二甲亞砜與氯化亞砜形成的氧化劑，氧化3位和15位羥基為3， 15-二羰基的同時(shí)，13位發(fā)生氯代反應(yīng)生成具有結(jié)構(gòu)通式(I )的化合物(3): 13-氯-3， 15-二氧代赤霉酸酯或(4): 13-氯-3， 15-二氧代赤霉酸芐酯，(1) 或(2)的結(jié)構(gòu)式如下，Ri-CI^;2個(gè)碳到5個(gè)碳 的垸基及PhCH2式中(l)的R產(chǎn)CH3、 2個(gè)碳到5個(gè)碳的烷基，(2)的R產(chǎn)P跳 (3)或(4)結(jié)構(gòu)式如下，<formula>formula see original document page 2</formula>其中(3)的R產(chǎn)CH3、 2個(gè)碳到5個(gè)碳的垸基，(4)的R產(chǎn)PhCH:b. 以13-氯-3， 15-二氧代赤霉酸酯(3)或13-氯-3, 15-二氧代赤霉酸芐酯 (4)為原料，制備具有結(jié)構(gòu)通式(I)的化合物13-氟-3， 15-二氧代赤霉酸 酯(5、 6)， 13-溴-3， 15-二氧代赤霉酸酯(7、 8)， 13_碘-3, 15-二氧代赤霉酸 酯(9、 10)，c. 以13-羥基-3， 15-二氧代赤霉酸酯(ll)或13_羥基-3, 15-二氧代赤霉 酸芐酯(12)為原料，制備具有結(jié)構(gòu)通式(I )的化合物13-溴-3, 15-二氧代 赤霉酸酯(7、 8)或制備13-碘-3， 15-二氧代赤霉酸酯(9、 10)。
3、 一種以13-氯-3, 15-二氧代赤霉酸酯(3)或(4)為原料制備13-羥 基-3， 15-二氧代赤霉酸酯(ll)、 (12)的方法。
4、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征是所采用的低極性溶劑為苯、 甲苯、二氯甲烷、三氯甲烷、正已烷、環(huán)己烷或石油醚，用量為10 100mL 溶劑/g底物；以二甲亞砜與草酰氯或二甲亞砜與氯化亞砜在-7(TC至一40'C 下形成的化合物為氧化劑，加入侍氧化和氯代的底物后反應(yīng)5-30分鐘，再加 入三乙胺進(jìn)行反應(yīng)5-30分鐘。
5、 根據(jù)權(quán)利要求2或4所述的制備方法，其特征是各化合物用量按摩爾 比為底物/二甲亞砜/草酰氯或氯化亞砜/三乙胺=1/2 50/2 6/4 100。
6、 根據(jù)權(quán)利要求2或4所述的制備方法，其特征是各化合物用量按摩爾 比為底物/二甲亞砜/草酰氯/三乙胺=1/10/5/14。
7、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征是制備13-氟-3， 15-二氧代 赤霉酸酯(5)、 (6)時(shí)，將13-氯-3， 15-二氧代赤霉酸酯(3)或(4)在四氫呋喃、 丙酮、乙醚、乙腈、二甲亞砜、N， N-二甲基甲酰胺、六甲基磷酰三胺等非質(zhì) 子性溶劑中與氟化鈉、氟化鉀、氟化鋰、氟化銨或四丁基氟化銨等氟化試劑反 應(yīng)制備目標(biāo)物；反應(yīng)溫度采用丙酮回流溫度；氟化試劑采用氟化鉀，反應(yīng)中化 合物的用量按摩爾比為底物/氟化鉀二1/2 50，丙酮用量為10 100mL/mmol 底物，化合物(5)或(6)結(jié)構(gòu)式如下，<formula>formula see original document page 4</formula>其中(5)的Rp CH3、 2個(gè)碳到5個(gè)碳的烷基,(6)的R產(chǎn)PhCH2 。
8、根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征是制備13-溴-3， 15-二氧代 赤霉酸酯(7)、 (8)時(shí)，將13-氯-3， 15-二氧代赤霉酸酯(3)或(4)在四氫呋喃、 丙酮、乙醚、乙腈、二甲亞砜、N， N-二甲基甲酰胺或六甲基磷酰三胺溶劑中 與溴化鈉、溴化鉀、溴化鋰、四丁基溴化銨等溴化試劑反應(yīng)制備目標(biāo)物，溴化 劑采用溴化鋰，反應(yīng)溫度采用乙腈回流溫度，反應(yīng)中化合物的用量按摩爾比為 底物/溴化鋰=1/2 50，乙腈用量為10 100 mL /mmo1底物，(7)或(8)結(jié) 構(gòu)式如下，<formula>formula see original document page 4</formula>式中(7)的R1= CH3、 2個(gè)碳到5個(gè)碳的垸基，(8)的R產(chǎn)PhCH2 。
9、根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征是制備13-碘-3， 15-二氧代 赤霉酸酯(9)、 (IO)時(shí)，將13-氯-3， 15-二氧代赤霉酸酯(3)、 (4)在四氫呋喃、 丙酮、乙醚、乙聘、二甲亞砜、N， N-二甲基甲酰胺或六甲基磷酰三胺溶劑中 與碘化鈉、碘化鉀、碘化鋰、四丁基碘化銨等碘化劑反應(yīng)制備目標(biāo)物，碘化劑 采用碘化鈉，溶劑采用乙腈，反應(yīng)溫度采用乙腈回流溫度，反應(yīng)中化合物的用 量按摩爾比為底物/碘化鈉=1/2 50，乙腈用量為10 100 mL /mmol底物， (9)和(10)結(jié)構(gòu)式如下，其中(9)的Rf CH3、 2個(gè)碳到5個(gè)碳的烷基，(10)的R^ PhCH2。
10、根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征是制備13-羥基-3， 15-二 氧代赤霉酸酯(ll)、 (12)時(shí)，將13-氯-3， 15-二氧代赤霉酸酯(3)或(4) 在丙酮、乙腈、乙醇、甲醇、四氫呋喃或二氯甲垸溶劑中與水和碳酸氫鈉、碳 酸鈉、碳酸銀、三乙胺或二異丙基乙基胺反應(yīng)制備13-羥基-3, 15-二氧代赤 霉酸酯(11、 12)， (11、 12)結(jié)構(gòu)式如下，<formula>formula see original document page 5</formula>其中(ll)的R^CH3， 2個(gè)碳到5個(gè)碳的烷基，(12)的R1= PhCH2。
11、 根據(jù)權(quán)利要求10所述的制備方法，其特征是采用丙酮/水作為溶劑， 碳酸銀作為堿；反應(yīng)溫度采用丙酮回流溫度，采用化合物用量按摩爾比為底物 /碳酸銀=1/1. 1;丙酮/水比例采用按體積比為8/2，用量為10 100 mL/mmo1 底物。
12、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征是由13-羥基-3， 15-二氧 代赤霉酸酯(11)、 (12)為原料制備13-溴-3， 15-二氧代赤霉酸酯(7)、 (8)， 13-羥基-3, 15-二氧代赤霉酸酯(11)或(12)與三溴化磷和吡啶在二氯甲烷 中反應(yīng)制備13-溴-3， 15-二氧代赤霉酸酯(7)或(8)，反應(yīng)中化合物的用量按 摩爾比為底物/吡啶/三溴化磷二1/1 20/0.35 2， 二氯甲烷用量為10 100 mL /mmol底物，反應(yīng)溫度采用—10°C 0°C。
13、 權(quán)利要求1所述的具有結(jié)構(gòu)通式(I )的化合物在制備治癌癥藥物的 應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及醫(yī)藥衛(wèi)生和化學(xué)領(lǐng)域的藥用化合物，是一種具有結(jié)構(gòu)通式(I)的化合物13-鹵代-3，15-二氧代赤霉酸酯及其制備方法，經(jīng)抗癌活性實(shí)驗(yàn)證明，該類化合物具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性和對(duì)正常細(xì)胞的低毒性。
文檔編號(hào)A61K31/365GK101260095SQ20081005829
公開日2008年9月10日 申請(qǐng)日期2008年4月18日 優(yōu)先權(quán)日2008年4月18日
發(fā)明者劉建平, 晨 卿, 孫竹先, 張洪彬, 張雁麗, 曾祥慧, 陳靜波 申請(qǐng)人:云南大學(xué);昆明醫(yī)學(xué)院