專利名稱：豬瘟兔化弱毒犢牛睪丸細(xì)胞苗耐熱凍干保護劑及制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物制品的冷凍干燥技術(shù)，保藏輔助劑及其制造方法。
背景技術(shù)：
我國目前常用的獸醫(yī)生物制品保護劑主要為5％蔗糖脫脂牛奶和5-10％蔗糖，1.5-3％明膠，制品要求低溫保存(-15℃以下)，2-8℃條件的保存期僅3-9個月，在常溫下必須盡快用完。這就為獸醫(yī)生物制品的保存、運輸、使用等帶來許多困難和不便，同時由于必需低溫保存造成能源消耗及儲存成本大。
目前，國際上發(fā)達的國家獸醫(yī)生物凍干制品幾乎全部是2-8℃保存24個月以上。但未見方法的詳細(xì)報道。中國專利CN1176827A“一種動物用凍干活疫苗的制造方法”提出采用以聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纖維素鈉，羅望子膠，谷氨酸鈉，海藻糖等為主要基質(zhì)凍干保護劑的配方配制成的凍干保護劑，采用與之相適應(yīng)的凍干曲線與新城疫疫苗病毒抗原制成雞新城疫凍干活疫苗的方法，該苗在2-8℃條件下可長期保存。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種豬瘟兔化弱毒犢牛睪丸細(xì)胞苗耐熱凍干保護劑及制備工藝，降低保護條件，延長使用期并降低使用成本。
豬瘟兔化弱毒犢牛睪丸細(xì)胞苗耐熱凍干保護劑，包括常用的明膠、乳糖，其特征是耐熱凍干保護劑的物質(zhì)組份配比是明膠3％、乳糖5-6％、牛肉蛋白胨2％、PVP(K90)3％、山梨醇2％、谷氨酸鈉2％、Vc 0.1％；制劑中為干物質(zhì)組份，百分比剩余份均為蒸餾水。
豬瘟兔化弱毒犢牛睪丸細(xì)胞苗耐熱凍干保護劑的制備工藝，按組份、比例混合，其特征是對保護劑的有效物質(zhì)組份分別處理除菌(1)對可高壓滅菌的按制劑比例溶于蒸餾水中，116℃滅菌30-40分鐘；(2)將不耐高溫的物質(zhì)組份也按制劑比例溶于蒸餾水中用孔徑0.22μm濾膜過濾除菌；分別完成除菌后將(1)、(2)兩種成分混合，即為凍干耐熱保護劑，使用時按1∶1比例加入病毒抗原液中，分裝后進行冷凍干燥。
本發(fā)明的制備工藝制備的制劑在2-8℃條件下可保存24個月以上，能達到《中華人民共和國獸醫(yī)生物制品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》中規(guī)定的各項指標(biāo)。
具體實施例方式
豬瘟兔化弱毒犢牛睪丸細(xì)胞苗耐熱凍干保護劑，包括常用的明膠、乳糖，其特征是耐熱凍干保護劑的物質(zhì)組份配比是明膠3％、乳糖5-6％、牛肉蛋白胨2％、PVP(K90)3％、山梨醇2％、谷氨酸鈉2％、Vc 0.1％；制劑中為干物質(zhì)組份，百分比剩余份均為蒸餾水。
豬瘟兔化弱毒犢牛睪丸細(xì)胞苗耐熱凍干保護劑的制備工藝，包括將上述耐熱凍干保護劑的干物質(zhì)組份按比例混合，其特征是對保護劑的有效組份進行除菌處理(1)對可高壓滅菌的物質(zhì)明膠、乳糖、PVP(90)、牛肉蛋白胨，按各自比例溶于蒸餾水中，116℃滅菌30-40分鐘；(2)將不耐高溫的物質(zhì)組份山梨醇、谷氨酸鈉、Vc；均按各自比例溶于蒸餾水中用孔徑0.22μm的濾膜過濾除菌；分別完成除菌后把兩種成分混合，即為凍干耐熱保護劑，使用時按1∶1比例加入病毒抗原液中，分裝后進行冷凍干燥。
技術(shù)參數(shù)及檢測方法1.產(chǎn)品的物理性狀、無菌檢驗、支原體檢驗、外源病毒檢驗、特異性檢驗、安全檢驗、剩余水分測定和真空度測定按《中華人民共和國獸醫(yī)生物制品規(guī)程》的方法及標(biāo)準(zhǔn)進行。
2.凍干周期不超過48h。
3.保護劑的毒性試驗禽類疫苗按產(chǎn)品當(dāng)中含保護劑量的10倍量，對7日齡健康雛雞分別進行滴鼻、點眼、飲水及皮下注射各20只，觀察20d，雛雞全部健活；無任何不良反應(yīng)。
4.病毒含量測定及標(biāo)準(zhǔn)(1)測定方法用家兔效檢按瓶簽注明頭份，用生理鹽水將每頭份疫苗稀釋750倍或按實含抗原量稀釋適當(dāng)?shù)谋稊?shù)，耳靜脈注射家兔2只，每只1mL，根據(jù)家兔體溫變化來確定疫苗的效價。
(2)達到標(biāo)準(zhǔn)A、凍干后疫苗達7.5萬倍合格。
B.產(chǎn)品在37℃保存10d及30d，產(chǎn)品的效力達5萬倍及4萬倍合格。
C.產(chǎn)品在25℃保存30d，5萬倍合格。
E.產(chǎn)品在2-8℃保存24個月，產(chǎn)品的效力均在5萬倍以上。
權(quán)利要求
1.一種豬瘟兔化弱毒犢牛睪丸細(xì)胞苗耐熱凍干保護劑，包括常用的明膠、乳糖，其特征是耐熱凍干保護劑的物質(zhì)組份配比是明膠3％、乳糖5-6％、牛肉蛋白胨2％、PVP(K90)3％、山梨醇2％、谷氨酸鈉2％、Vc 0.1％；制劑中為干物質(zhì)組份，百分比剩余份均為蒸餾水。
2.一種制備權(quán)利要求1所述的豬瘟兔化弱毒犢牛睪丸細(xì)胞苗耐熱凍干保護劑的工藝，包括將上述耐熱凍干保護劑的干物質(zhì)組份按比例混合，其特征是對保護劑的有效物質(zhì)組份進行除菌處理(1)對可高壓滅菌的明膠、乳糖、牛肉蛋白胨、PVP(90)，按各自比例溶于蒸餾水中，116℃滅菌30-40分鐘；(2)將不耐高溫的物質(zhì)組份山梨醇、谷氨酸鈉、Vc；均按各自比例溶于蒸餾水中用孔徑0.22μm的濾膜過濾除菌；分別完成除菌后將(1)、(2)兩種成分混合，即為凍干耐熱保護劑，使用時按1∶1比例加入病毒抗原液中，分裝后進行冷凍干燥。
全文摘要
豬瘟兔化弱毒犢牛睪丸細(xì)胞苗耐熱凍干保護劑及制備工藝，其特征是保護劑的物質(zhì)組份配比是明膠3％、乳糖5－6％、牛肉蛋白胨2％、PVP(K90)3％、山梨醇2％、谷氨酸鈉2％、Vc 0.1％；制劑中為干物質(zhì)組份，百分比剩余份均為蒸餾水。對保護劑的可高壓滅菌的和不耐高溫的物質(zhì)有效組份分別除菌后混合，即為凍干耐熱保護劑，使用時按1∶1比例加入病毒抗原液中，分裝后進行冷凍干燥。產(chǎn)品在2－8℃保存24個月，仍保持凍干后的外形，病毒含量均超過國家獸醫(yī)生物制品規(guī)程的標(biāo)準(zhǔn)。本發(fā)明是一種低成本、長效制品及制備方法，為獸醫(yī)生物制品使用解決了長久以來運輸、儲存的高成本問題。
文檔編號A61P31/00GK1528455SQ20041002958
公開日2004年9月15日 申請日期2001年12月21日 優(yōu)先權(quán)日2001年12月21日
發(fā)明者衛(wèi)廣森, 王文成, 張萬林 申請人:衛(wèi)廣森