專利名稱：一種藏藥的制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種藏藥的制備方法，特別是涉及一種治療消化系統(tǒng)疾病的藏藥制劑的制備方法。
“石榴健胃丸”、“石榴健胃散”是藏藥部頒標準收載品種，由石榴子、蓽茇、紅花、肉桂、豆蔻五味藥組成，臨床應用多年，具有溫胃益火、化滯降溫、溫通脈道功效，主治消化不良、食欲不振、寒性腹瀉。這兩種藥品在藏藥方中堪稱組方精當之劑，具有組方合理、配伍嚴謹、療效顯著、服用量小、主治征候明確、所用藥物易得等諸多優(yōu)點。
藏藥部頒標準收載的“石榴健胃丸”屬水泛丸劑，崩解慢，藥效緩慢，而且放久后質堅硬，難以嚼碎，此外含較多揮發(fā)油，口感苦澀、辛辣，給患者服用帶來諸多不便，限制了該藥的推廣使用。
藏藥部頒標準收載的“石榴健胃散”是國家中藥保護品種，制法簡便，具有易分散、奏效快的特點。但石榴健胃散由于藥物粉碎后比表面積較大，故其嗅味、刺激性、吸濕性及化學活動性等也相應地增加，使得藥物穩(wěn)定性降低，方中揮發(fā)性成分易散失，而且依然存在口感不適、服用不便的缺點。
藏藥傳統(tǒng)制劑石榴健胃丸由石榴子、蓽茇、紅花、肉桂、豆蔻五味藥組成，方中石榴子為君藥。
處方中藏藥石榴子種皮含有機酸類成分，種仁主含脂肪油、雌二醇激素。石榴子脂肪油不溶于水，可采用乙醇提取。石榴子又含鞣質，其中含訶子酸、原訶子酸、沒食子酸、等化學成分，均為水溶性成分，故又可采用水提。由于未見與本品相關的藥理試驗研究報道，對石榴子進行了提取工藝的化學藥理初步試驗研究。
采用不同極性大小的乙醇、氯仿對500克石榴子進行了提取分離，提取流程見說明書附2，制備出相應的石榴子提取部位A(乙醇提取物)、提取部位B(氯仿提取物)和提取部位C(水提取物)，供藥效學實驗的樣品。制得水提物浸膏500g藥材提取33g，收膏率為6.6％；氯仿浸膏相當于200g藥材提取1g，收膏率為0.5％；醇提物浸膏相當于300g藥材提取25.5g收膏率為8.5％。
為了進一步確定提取路線，保證制劑療效和減少服用量，采用小鼠止瀉試驗進行對比篩選。根據藥典規(guī)定石榴用量為5~12g，即人用量為12g/50kg，相當于0.24g/kg。根據出膏率計算并且分別配制三種浸膏人用量的10倍、30倍。陽性對照藥硫酸阿托品(廠家江蘇鹽城制藥有限公司“蘇衛(wèi)藥準字1982第276803號”批號20000701規(guī)格0.3mg*100)配制溶度5片/30ml即5mg/100ml。實驗結果表明氯仿提取物的兩個劑量組能明顯(p＜0.01)地延長小鼠出現稀便潛伏期，并且其高劑量組也能明顯(p＜0.05)減少小鼠排便的次數。氯仿提取物低及高兩個劑量組對小鼠小腸推進運動有抑制作用，此外，水提物低劑量組及醇提物低劑量組也出現此趨勢但無統(tǒng)計學意義，即石榴子不同提取物對正常小鼠推進運動無明顯影響。各給藥組的高劑量組均有抑制新斯的明致小鼠亢進作用，以水提取物最為顯著，其效果次序為水提取物高劑量組＞氯仿提取物高劑量組＞乙醇提取物提高劑量組＞氯仿提取物提低劑量組＞乙醇提取物低劑量組＞水提取物低劑量組。
對石榴子進行植物化學預試試驗。取石榴子藥材150g，用5倍量70％乙醇提取3次，每次2小時，濾過，濾液濃縮至20ml無醇味，用40ml，30ml，30ml石油醚(60～90℃)分次萃取，萃取液揮發(fā)得藥材油脂部分。萃取殘留物加在28*4cm的聚酰胺柱上，加水2000ml水洗至無色，水洗液濃縮至40ml，得試樣1；用50％乙醇1500ml洗至近無色，洗脫液減壓濃縮，殘渣揮干，50％乙醇40ml溶解，得試樣2；再用95％乙醇1000ml洗脫至無色，洗脫液減壓濃縮，殘渣加95％乙醇40ml使溶解，得試樣3。結果表明在試樣2中有皂苷類成分存在。故對方中石榴子的提取工藝采用乙醇進行提取，才能將其抗腹瀉有效組分提取出來，以保證臨床療效。
處方中紅花含紅花醌甙、新紅花甙、紅花甙和6-羥基山柰酚-3-O-葡萄糖苷等黃酮類成分，據文獻報道6-羥基山柰酚-3-O-葡萄糖苷等黃酮類具有抗炎作用，而該類成分在甲醇和乙醇中的溶解性大于水，可采用乙醇提取。
處方中肉桂、豆蔻、蓽茇含揮發(fā)油。肉桂揮發(fā)油具抗?jié)?，調整平滑肌功能，利膽，止瀉的作用；豆蔻含桉油精等成分，理氣止嘔，消除胃脘脹悶。由于以上兩味的水溶性成分具有抗炎等藥理作用，在臨床中廣泛運用，均為本方的有效組分，有必要使其有效成分充分提取。因而擬定將以上三味首先提取揮發(fā)油，然后再將藥液保存?zhèn)溆?。肉桂、豆蔻主要含揮發(fā)油，在水中溶解較小，故采用采用水蒸汽蒸餾后，再進行水提或醇提工藝。蓽茇含胡椒堿、棕櫚酸等，具促進膽固醇酯化和排泄的功效，而胡椒堿水中溶解性差，且遇熱、光不穩(wěn)定，因而考慮打粉直接加入。
為了進一步確定提取工藝路線，保證制劑療效和減少服用量，對處方藥物的四種不同提取工藝路線進行了樣品制備，并采用藥效學指標作篩選試驗。
采用醇提法制得樣品a將肉桂、豆蔻、蓽茇粉碎成粗粉，取石榴子、紅花，加8倍量83％乙醇提取3次，每次1小時，提取液濾過。濾液減壓濃縮成清膏，再真空干燥成干浸膏，粉碎成細粉。
采用部分醇提法制得樣品b取肉桂、豆蔻粉碎成粗粉，加10倍量水提取4小時，收集揮發(fā)油。濾過，濾液備用。另取石榴子、紅花加6倍量83％乙醇回流提取3次，每次1小時，分次濾過，合并兩次提取液，濾液回收乙醇后，濃縮至相對密度為1.30~1.35(60℃)的稠膏，干燥。將上述兩種干膏粉碎成80目細粉混勻。蓽茇粉碎成細粉，與干膏混勻，再加入揮發(fā)油混勻。
采用綜合醇提法制得樣品c取肉桂、豆蔻粉碎成粗粉，加10倍量水提取4小時，收集揮發(fā)油。濾過，濾液備用。另取石榴子、紅花加83％乙醇回流提取3次，每次1小時，分次濾過，合并兩次提取液，濾液回收乙醇后，濃縮至相對密度為1.30~1.35(60℃)的稠膏，干燥。將石榴子、紅花醇提取藥渣與提取揮發(fā)油后的藥渣，加6倍水煎煮二次，每次1.5小時，分次濾過，合并煎液，并與提取揮發(fā)油的濾液合并，濃縮干燥。將上述干膏粉碎成80目細粉混勻。蓽茇粉碎成細粉，與干膏和揮發(fā)油混勻。
采用部分水提法制得樣品d取肉桂、豆蔻粉碎成粗粉，加10倍水提取4小時，收集揮發(fā)油。濾過，濾液備用。石榴子、紅花水提3次、每次1小時每次加8倍量水，濾過。濾液濃縮成浸膏，再真空干燥成干浸膏，粉碎成細粉。將上述兩種干膏粉碎成80目細粉混勻，蓽茇粉碎成細粉，與干膏混勻，加入揮發(fā)油混勻。
對上述四種樣品進行藥理篩選，實驗結果如下表1 石榴健胃片不同提取方法對蓖麻油所致小鼠腹瀉的影響劑量給藥后排便次數(x±s)組別(mg/潛伏期 總數 1h 2h 3h4h5h6hkg)空白對96.14± 9.71± 0.43±2.71± 1.71± 0.93± 0.43± 0.21±照組- 25.32 3.22 1.16 1.90 0.83 1.07 0.76 0.58陽性對 1.0 111.71± 7.57± 1.07±1.92±2.00± 1.36± 0.93± 0.36±照組 79.17* 3.27 1.90 1.69 1.47 1.45 0.92 0.74*a低劑 124.75± 6.00± 0.92±2.33± 1.58± 0.67± 0.42± 0.08±量組 105.13**2.98**1.38 1.50 1.56 0.78 0.67 0.29**a高劑 134.83± 6.33± 0.58±1.17±2.00± 1.33± 1.08± 0.17±量組 88.11** 3.42* 1.08*1.70*1.54 1.44 1.24 0.39**b低劑 111.00± 8.16 0.33±2.25± 2.17± 0.50± 0.50± 0.58±量組 54.77* ±3.130.78** 2.49 1.62 0.67* 0.67 0.67b高劑 104.00± 6.00± 0.33± 1.92±2.08± 0.92± 0.42± 0.33±量組 49.71 3.25**0.78** 2.07 1.93 0.79 0.67 0.78*c高劑 126.42± 6.67± 0.92±2.25± 1.92± 0.92± 0.58± 0.08±量組 86.22** 3.17* 1.78 2.45 1.38 0.90 0.90 0.29**
d低劑106.83± 7.50±1.33± 2.50±1.58±0.67±0.58±0.50±量組 94.48*4.80 2.57 2.11 0.79 0.78 1.08 0.67d高劑90.42±5.91± 1.08± 2.00±1.33±0.58±0.50±0.42±量組 34.98 2.16**1.44 1.35 1.50 0.79 0.90 0.79*p＜0.05； **p＜0.01表2不同提取方法對新斯的明所致小鼠腸亢進模型的影響組別 劑量(mg/kg) 動物數(只) 推進百分率(x±s)空白對照組- 13 0.66±0.15陽性對照組 1.00 10 0.55±0.13A低劑量組 90.49±0.07*A高劑量組 90.51±0.13*B低劑量組 10 0.48±0.15**B高劑量組 90.50±0.16*C低劑量組 10 0.44±0.12**C高劑量組 10 0.44±0.13**D低劑量組 10 0.56±0.19D高劑量組 11 0.55±0.19*p＜0.05； **p＜0.01實驗結果表明，四種樣品對腹瀉均有止瀉作用，在相同劑量下，所試樣品止瀉作用強度有如下大致規(guī)律樣品c＞樣品b＞樣品a＞樣品d，樣品c即綜合醇提法效果最好，故本發(fā)明確定為綜合提取工藝。
本品中揮發(fā)油含量較多，為了為減少揮發(fā)油散失，增加揮發(fā)油成分的穩(wěn)定性，提高藥品質量，保證療效，可采用β-環(huán)糊精包結復方中的揮發(fā)油，可采用飽和水溶液法包結。
取肉桂、豆蔻一定量，過10目篩，加10倍量的水浸泡5小時后，加熱煮沸提取5小時，將揮發(fā)油加無水硫酸鈉脫水。稱取適量β-環(huán)糊精，β-環(huán)糊精與水以1∶10的比例加熱溶解于水中制成飽和溶液，保持35℃恒溫。在攪拌速度800轉/分下，用移液管量取復方揮發(fā)油1ml，緩慢滴加入一定量的β-環(huán)糊精水飽和溶液中，用攪拌器攪拌包結1小時，取出置冰箱中冷藏24小時，20ml，10ml，10ml乙醚洗滌三次，冷風吹干，在干燥器中放置一日，即得揮發(fā)油的β-環(huán)糊精包結物。
對包結前后揮發(fā)油進行薄層色譜及氣質聯用分析得知，復方的揮發(fā)油經β-環(huán)糊精包結后組分沒有明顯變化。
由于復方揮發(fā)油中以肉桂油含量最多，而桂皮醛占肉桂油的75％~85％，因而考慮用桂皮醛的包合率作為考察指標的一個重要因素，其中桂皮醛含量包合前較包合后基本相同。
采用紅外光譜法考察揮發(fā)油中桂皮醛的包合程度。對β-環(huán)糊精，石榴子揮發(fā)油包合物，復方揮發(fā)油進行紅外光譜的測定。通過比較包合前后紅外線取特征吸收峰的變化，揮發(fā)油包合物，整個包合物主要呈現β-CD的紅外光譜圖形，其在1700nm處芳香骨架的特征紅外峰幾乎消失。
利用高效液相色譜法考察揮發(fā)油中桂皮醛的保留率。在三個月中，分別精密稱取2個批號的揮發(fā)油包合物15mg左右，25ml乙醇超聲30min，離心(5000轉/分)，取上清液于10ml容量瓶中，吸取20ul注入高效液相色譜進行測定，計算每克揮發(fā)油包合物中桂皮醛含量，結果如下樣品號 0月(mg) 1月(mg) 2月(mg) 3月(mg)批1 39.1 34.2 31.5 28.3批2 42.9 35.2 33.6 27.9結果表明，3個月內，桂皮醛峰形無大的改變，且桂皮醛含量衰減不到一半，說明包合物能減少揮發(fā)油的散失與變化，保證揮發(fā)油制劑的穩(wěn)定性。
本發(fā)明涉及的藥物由于揮發(fā)油含量較多，故不適合制成口服液等液體制劑，可根據需要添加輔料，依常規(guī)制劑技術，制成片劑、膠囊劑型。
本發(fā)明制得的浸膏粉由于其中所含油脂類成分較多，水分難以進入，故若制成片劑，片劑崩解較為困難，需要添加崩解劑。淀粉、羧甲淀粉鈉(CMS-Na)、低取代羥丙基纖維素(L-HPC)和微晶纖維素(MCC)是常用的片劑崩解劑，都可應用于本品，經崩解實驗證明其中尤以羧甲淀粉鈉、微晶纖維素二者配合使用效果最好，片劑崩解速度快。
為了改善本品制成普通片劑的溶出性能，提高生物有效性，可以將本品制成分散片。
本發(fā)明涉及的藥物可制成膠囊劑型，包括硬膠囊、軟膠囊。
普通劑型揮發(fā)油容易散失，可選擇將本品進行薄膜包衣，增加穩(wěn)定性且外形美觀。
為了檢驗本發(fā)明的藥效作用，結合具體實施例，與石榴健胃丸進行了對比性的藥效學實驗。
石榴子 326g 蓽茇 32.6g 肉桂 52g紅花163g 豆蔻 26g蓽茇粉碎成細粉，過篩，備用。肉桂、豆蔻以水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，蒸餾后的水溶液濾過，濾液與殘渣分別另器收集備用。揮發(fā)油用β-環(huán)糊精飽和水溶液混合，攪勻，冷藏過夜，濾過，干燥。取石榴子、紅花加85％乙醇回流提取二次，提取時間分別為60分鐘、40分鐘。濾過，合并濾液，回收乙醇并減壓濃縮至相對密度約為1.10(室溫)的清膏。將乙醇提取后的藥渣與提取揮發(fā)油后的藥渣合并，加水煎煮二次，第一次60分鐘，第二次30分鐘，濾過，濾液與提取揮發(fā)油的濾液合并，濃縮至相對密度為1.10(室溫)的清膏。將上述兩種清膏噴霧干燥成細粉，加入蓽茇細粉、羧甲淀粉鈉、微晶纖維素、十二烷基硫酸鈉、75％乙醇、微粉硅膠適量，混勻，制成顆粒，干燥，加入揮發(fā)油包合物，混勻，壓片，制成石榴健胃片。
研究結論如下1.石榴健胃片0.9、1.8g/kg劑量對蓖麻油所致小鼠腹瀉有明顯的止瀉作用(P＜0.01)，而石榴健胃丸0.45、0.9g/kg劑量對蓖麻油所致小鼠腹瀉有良好的止瀉作用(P＜0.05～0.01)。
2.2.石榴健胃片0.45、0.9g、1.8g/kg3個劑量組對番瀉葉所致小鼠腹瀉都有明顯的止瀉作用(P＜0.05～0.01)，而石榴健胃丸0.9g、1.8g/kg對番瀉葉所致小鼠腹瀉都有明顯的止瀉作用(P＜0.01)。
3.石榴健胃片0.9g/kg可促進小鼠的胃排空運動(P＜0.05)，而石榴健胃丸0.45g/kg也可促進小鼠的胃排空運動(P＜0.01)。
4.石榴健胃片0.9g/kg和石榴健胃丸1.8g/kg可抑制正常小鼠的小腸的推進動(p＜0.05)。
5.石榴健胃片0.45、0.9g/kg和石榴健胃丸0.45、0.9g/kg可明顯抑制新斯的明致小鼠腸亢進模型的腸推進運動(p＜0.05～0.01)。
6.石榴健胃片0.9、1.8g/kg和石榴健胃丸1.8g/kg可促進大鼠胃液的分泌(P＜0.05)，使胃酸度和胃蛋白的活性增加(P＜0.05～0.01)。
以上實驗表明，石榴健胃丸的新劑型石榴健胃片完全保留了石榴健胃丸的藥效作用，并且該片劑劑型有效成分保持率較高，用量小，起效快。此外石榴健胃片改善了原劑型的苦澀辛辣口感，服用方便，貯運方便。
圖2為石榴子藥效學篩選樣品提取流程圖
權利要求
1.一種藏藥的制備方法，其特征是以下述重量配比的原料組分按下述制法制成A、石榴子55重量份、肉桂9重量份、蓽茇5重量份、紅花27重量份、豆蔻4重量份；B、蓽茇粉碎成細粉，過篩，備用；肉桂、豆蔻以水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，蒸餾的水溶液濾過，濾液與殘渣分別另器收集備用；石榴子、紅花用乙醇提取二至三次，濾過，合并濾液，回收乙醇并減壓濃縮成清膏；將乙醇提取后的藥渣與提取揮發(fā)油后的藥渣合并，加水煎煮提取，濾過，濾液與提取揮發(fā)油的濾液合并，濃縮成清膏；將上述兩種清膏噴霧干燥成細粉，加入蓽茇細粉和適量輔料，混勻，制成顆粒，干燥，加入揮發(fā)油，混勻，制劑成型。
2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征是肉桂、豆蔻加6-10倍量水浸泡3-5小時后提取揮發(fā)油；
3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征是所述的揮發(fā)油的提取時間是3-6小時；
4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征是石榴子、紅花加60％-85％乙醇以回流法提取，每次提取時間為30-90分鐘；
5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征是所述的藥渣加水提取的次數是1-3次，加水量是藥渣的4-8倍，每次提取時間是30-90分鐘；
6.根據權利要求1所述的制備方法，其特征是所述的揮發(fā)油用β-環(huán)糊精包合；
7.根據權利要求1所述的制備方法，其特征是其所涉及的藥物制成藥劑學所說的膠囊劑劑型；
8.根據權利要求1所述的制備方法，其特征是其所涉及的藥物制成藥劑學所說的片劑劑型；
9.根據權利要求8所述的制備方法，其特征是壓片后薄膜包衣；
10.據權利要求8所述的制備方法，其特征是以羧甲淀粉鈉、微晶纖維素作為崩解劑；
11.根據權利要求8所述的制備方法，其特征是其所涉及的藥物制成藥劑學所說的分散片劑型。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種藏藥的制備方法，該藥物以石榴子、肉桂、蓽茇、紅花、豆蔻為藥物組分，其制法包括提取肉桂、豆蔻揮發(fā)油，提取石榴子、紅花、肉桂、豆蔻有效成分，蓽茇粉碎直接加入。本發(fā)明涉及的藥物具有溫胃益火、化滯降溫、溫通脈道功效，主治消化不良、食欲不振、寒性腹瀉。
文檔編號A61P1/04GK1424085SQ0215644
公開日2003年6月18日 申請日期2002年12月16日 優(yōu)先權日2002年12月16日
發(fā)明者張藝 申請人:北京正青星光生物醫(yī)學科技有限公司