50)制備校正曲線。以任意單位（AU)(基于USP中的胰酶活 性）表示活性。
[0064] 通過使用N-苯甲?；?L-精氨酸乙酯（BAEE，Sigma B4500)作為底物并測定25°C 下253nm處的吸光度變化（根據(jù)生產(chǎn)商的說明）來測定胰蛋白酶活性。使用牛胰蛋白酶 (Sigma，T9201)制備校正曲線。以任意單位（AU)(基于U中的胰蛋白酶活性）表示活性。
[0065] 通過使用N-苯甲?；?L-酪氨酸乙酯（BTEE，Sigma B6125)作為底物并測定25°C 下256nm處的吸光度變化來測定糜蛋白酶活性。使用牛10糜蛋白酶（Sigma，C3142)制備 校正曲線。以任意單位（AU)(基于U中的糜蛋白酶活性）表示活性。
[0066] 通過使用SucAla3_PNA(S4760, Sigma)作為底物測定彈性蛋白酶活性，用豬彈性 蛋白酶（E7885, Sigma)制備校正曲線。以任意單位（AU)(基于U中的彈性蛋白酶活性）表 示活性。
[0067] 用單變量方差分析法（Univariate Analysis of Variance) (GLM過程）分析結(jié)果。 根據(jù)LSD測試，當(dāng)p〈0. 05時，飲食之間的差異被認(rèn)為是顯著的。
[0068] 表2的結(jié)果顯示，當(dāng)與對照飲食（飲食2)相比，在消化含有更高濃度的NDO的飲食 3或5后，回腸消化物量顯著增加。明顯地，僅在高于某個閾值的ND0的量的情況下觀察到 這種效果，因為與不包含ND0的飲食2相比，沒有觀察到飲食1和4的腸容量的顯著差異。
[0069] 沒有觀察到對回腸末端pH的影響。這表明不存在由腸道微生物群（位于結(jié)腸） 進(jìn)行的非消化性寡糖的發(fā)酵作用，因此表明非消化性寡糖在結(jié)腸中的直接作用。與不含ND0 的飲食2相比，飲食3和5的重量摩爾滲透壓濃度更低。飲食1和4的值為中間值，但與飲 食3、5和2沒有統(tǒng)計上的顯著差異。與飲食2相比，飼喂含有ND0的飲食3和5的小豬的 消化物中，蛋白質(zhì)的含量更低，即更稀。在此方面，飲食1顯示為中間值和統(tǒng)計學(xué)上的顯著 效果。
[0070] 最有趣的是，與飲食2相比，飼喂含有ND0的飲食3和5的小豬的消化物中的蛋白 酶活性的密度更低，即更稀。飲食1和4顯示出中間效果，但在此方面，與不含ND0的飲食 (飲食2)相比沒有統(tǒng)計學(xué)上的顯著差異。分析腸糜蛋白酶和胰蛋白酶的主要消化酶，飲食 3和5比飲食2顯示出更稀的活性，而在飲食1和4中稀釋的活性與飲食2沒有統(tǒng)計學(xué)上的 差異。
[0071] 表2 :飼喂5種不同飲食后，回腸消化物的特征
[0072]
[0073] 數(shù)據(jù)以平均值土SEM(N= 18只小豬）表示。M同一行中具有不同字母的值為有 顯著差異（P〈〇. 05)。
[0074] 實施例2
[0075] 每100毫升嬰兒配方物組合物包含如下的即食配方：1. 6g蛋白質(zhì)、3. 6g脂肪、6. 4g 可消化的碳水化合物（主要為乳糖）、〇. 8g非消化性寡糖（其中0. 72g為反式半乳寡糖）、 〇.〇8g菊粉。包裝和/或產(chǎn)品附帶的輔助材料表明所述產(chǎn)品適用于降低腸內(nèi)的腔蛋白酶，或 預(yù)防小腸細(xì)菌的過度生長，或增加胃腸通過時間或降低腸中的毒素的活性。
【主權(quán)項】
1. 一種用于增加受試者小腸內(nèi)的腔液量的非醫(yī)學(xué)方法，包括向該受試者給予營養(yǎng)組合 物，其不為人乳，所述營養(yǎng)組合物包含蛋白質(zhì)、可消化的碳水化合物、脂肪和非消化性寡糖， 所述非消化性寡糖選自以下物質(zhì)的一種或多種：果寡糖、半乳寡糖、葡萄寡糖、阿拉伯寡糖、 甘露寡糖、木寡糖、巖藻寡糖、阿拉伯半乳寡糖、葡萄甘露寡糖、半乳甘露寡糖、包含唾液酸 的寡糖和糖醛酸寡糖，其中所述非消化性寡糖的量為，基于該營養(yǎng)組合物的干重計，至少2 重量％，和/或基于100mL該營養(yǎng)組合物計，至少0. 4g。2. 權(quán)利要求1的非醫(yī)學(xué)方法，用于改善腸道健康。3. 權(quán)利要求1或2的非醫(yī)學(xué)方法，用于降低受試者腸中的腔蛋白酶的活性或密度、用于 治療和/或預(yù)防受試者小腸細(xì)菌的過度生長、用于增加受試者胃腸通過時間和/或用于降 低受試者腸中的毒素的活性。4. 權(quán)利要求1或2的非醫(yī)學(xué)方法，用于治療和/或預(yù)防受試者小腸細(xì)菌的過度生長和 /或用于降低受試者腸中的毒素的活性。5. 非消化性寡糖或包含非消化性寡糖的組合物的用途，用于制備營養(yǎng)組合物、用于降 低受試者腸中的腔蛋白酶的活性或密度、用于治療和/或預(yù)防受試者小腸細(xì)菌的過度生 長、用于增加受試者胃腸通過時間和/或用于降低受試者腸中的毒素的活性，其中所述非 消化性寡糖選自以下物質(zhì)的一種或多種：果寡糖、半乳寡糖、葡萄寡糖、阿拉伯寡糖、甘露 寡糖、木寡糖、巖藻寡糖、阿拉伯半乳寡糖、葡萄甘露寡糖、半乳甘露寡糖、含唾液酸的寡糖 和糖醛酸寡糖，且其中所述非消化性寡糖的量為，基于該營養(yǎng)組合物的干重計，至少2重 量％，和/或基于100mL該營養(yǎng)組合物計，至少0. 4g，且其中所述營養(yǎng)組合物不為人乳。6. 權(quán)利要求5的用途，用于治療和/或預(yù)防受試者小腸細(xì)菌的過度生長和/或用于降 低受試者腸中的毒素的活性。7. 權(quán)利要求5或6的用途，其中基于該營養(yǎng)組合物的干重計，所述非消化性寡糖的量為 3至12重量％。8. 權(quán)利要求5-7中任一項的用途，其中，所述營養(yǎng)組合物為液體形式或為適于用水復(fù) 溶的粉末形式。9. 權(quán)利要求5-8中任一項的用途，其中所述非消化性寡糖的量為0. 7至I. 5g/100ml。10. 權(quán)利要求5-9中任一項的用途，其中所述非消化性寡糖包含半乳寡糖。11. 權(quán)利要求5-10中任一項的用途，其中所述非消化性寡糖包含具有0 -1，3、0 -1，4 和/或0_1，6連接的半乳寡糖。12. 權(quán)利要求5-11中任一項的用途，其中所述非消化性寡糖包含半乳寡糖和果寡糖的 混合物。13. 權(quán)利要求5-12中任一項的用途，其中所述營養(yǎng)組合物不包含可復(fù)制的產(chǎn)乳酸細(xì) 菌，所述產(chǎn)乳酸細(xì)菌選自乳酸桿菌和雙歧桿菌。14. 權(quán)利要求5-13中任一項的用途，其用于向嬰兒和/或幼兒提供營養(yǎng)。15. 權(quán)利要求5-14中任一項的用途，其中，所述營養(yǎng)組合物為嬰兒配方物或后續(xù)配方 物。16. 權(quán)利要求1-4中任一項的非醫(yī)學(xué)方法，其中基于該營養(yǎng)組合物的干重計，所述非消 化性寡糖的量為3至12重量％。17. 權(quán)利要求1-4和16中任一項的非醫(yī)學(xué)方法，其中所述營養(yǎng)組合物為液體形式或為 適于用水復(fù)溶的粉末形式。18. 權(quán)利要求1-4和16-17中任一項的非醫(yī)學(xué)方法，其中所述非消化性寡糖的量為0. 7 至 I. 5g/100ml。19. 權(quán)利要求1-4和16-18中任一項的非醫(yī)學(xué)方法，其中所述非消化性寡糖包含半乳寡 糖。20. 權(quán)利要求1-4和16-19中任一項的非醫(yī)學(xué)方法，其中所述非消化性寡糖包含具有 0 -1，3、0 -1，4和/或0 -1，6連接的半乳寡糖。21. 權(quán)利要求1-4和16-20中任一項的非醫(yī)學(xué)方法，其中所述非消化性寡糖包含半乳寡 糖和果寡糖的混合物。22. 權(quán)利要求1-4和16-21中任一項的非醫(yī)學(xué)方法，其中所述營養(yǎng)組合物不包含可復(fù)制 的產(chǎn)乳酸細(xì)菌，所述產(chǎn)乳酸細(xì)菌選自乳酸桿菌和雙歧桿菌。23. 權(quán)利要求1-4和16-22中任一項的非醫(yī)學(xué)方法，用于向嬰兒和/或幼兒提供營養(yǎng)。24. 權(quán)利要求1-4和16-23中任一項的非醫(yī)學(xué)方法，其中所述營養(yǎng)組合物為嬰兒配方物 或后續(xù)配方物。
【專利摘要】本發(fā)明涉及高于某個閾值的非消化性寡糖通過增加腔液量和降低蛋白酶活性或密度而改善特別是嬰兒和幼兒的小腸健康的用途。
【IPC分類】A23L1/308, A61K31/702, A23L1/29
【公開號】CN104968216
【申請?zhí)枴緾N201380072371
【發(fā)明人】S·休伯斯, T·路德維格, H·鮑里迪尤斯
【申請人】N·V·努特里奇亞
【公開日】2015年10月7日
【申請日】2013年12月10日
【公告號】EP2928325A1, US20150305387, WO2014092564A1, WO2014092564A8