本發(fā)明涉及一種生物農(nóng)藥制劑，具體涉及一種高效防治油菜根腫病的生物磁粉種衣劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
油菜是中國的主要油料作物，油菜根腫病的病原菌為蕓薹根腫菌，是一種全球性的土傳植物病害，許多國家都有發(fā)生。目前已在四川、貴州和云南趨于流行，并向安徽和湖北等地擴展，且逐年加重，嚴重威脅著油菜可持續(xù)發(fā)展。根腫菌主要危害寄主植物的根部，使根部薄壁細胞增生膨大形成根瘤，阻礙根系吸收和傳導(dǎo)水分及營養(yǎng)物質(zhì)。
球毛殼菌發(fā)酵液中的活性物質(zhì)鞘氨醇可以抑制根腫病菌休眠孢子的萌發(fā)，對根腫菌具有較強的抑制作用。另外經(jīng)球毛殼菌誘導(dǎo)處理后，可提高油菜體內(nèi)的苯丙氨酸解氨酶、過氧化物酶和多酚氧化酶等防御酶活性，能誘導(dǎo)油菜產(chǎn)生抗性，防治油菜根腫病。
種衣技術(shù)是在傳統(tǒng)浸種、拌種的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一項國際上應(yīng)用比較普遍的種子處理技術(shù)，是種子質(zhì)量的標準化、種子加工的現(xiàn)代化與苗期田間病蟲害綜合防治的有機結(jié)合。
張廣洋、楊謙等人在其《大豆根腐病復(fù)合型生物種衣劑的研究》一文中，使用球毛殼菌代謝物、綠色木霉厚垣孢子、球毛殼菌子囊果為活性物質(zhì)，進行復(fù)合型生物種衣劑的研制。球毛殼菌及其代謝物的防治作用可作為生物種衣劑的防線，提早抵御病原菌的入侵，可以解決現(xiàn)存部分生物種衣劑在田間防效降低和部分種衣劑缺少防治持久性的問題。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
針對現(xiàn)有技術(shù)的缺點，本發(fā)明的目的在于提供一種高效防治油菜根腫病的生物磁粉種衣劑及其制備方法，可以對油菜根腫病進行防治。
一種高效防治油菜根腫病的生物磁粉種衣劑，由以下重量份原料組成：聚乙烯吡咯烷酮58-75份，土豆10-16份，紅糖1-4份，球毛殼菌菌液10-17份，坡縷石13-19份，蒸餾水適量，四氧化三鐵7-13份，番紅0.2-0.7份，乙二醇1-3份，山梨酸鉀2-4份。
具體步驟如下：
（1）將土豆去皮、切塊，加入蒸餾水置于密閉容器內(nèi)，加熱排除冷空氣后維持110-130℃、0.5-1小時，并用四層紗布過濾煮沸的土豆，冷卻后再加入紅糖、補足水量，混勻，轉(zhuǎn)入100℃蒸汽滅菌0.5-1小時，制得液體培養(yǎng)基；
（2）載體球毛殼菌孢子粉的制備：
①、球毛殼菌菌液的制備：將球毛殼菌菌種活化，無菌接入上述液體培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)速160-200r/min、25-40℃搖床培養(yǎng)10-15日，至菌液粘稠、顏色改變并可見菌絲大量生長，得球毛殼菌菌液；
②、將上述球毛殼菌菌液與坡縷石按照配方中的比例混合，攪拌2-4小時，在3500-4500rmp/min離心5-8分鐘，并在30-40℃溫度下進行烘干，得載體球毛殼菌孢子粉；
（3）磁性成膜劑的制備：
取聚乙烯吡咯烷酮加入到餾水中，在攪拌條件下加熱至70-80℃直到完全溶解，得到均一透明狀的15-20%聚乙烯吡咯烷酮水溶液，加入四氧化三鐵粉末攪拌均勻，得到四氧化三鐵/聚乙烯吡咯烷酮混合溶液作為成膜劑備用；
（4）將步驟（2）載體球毛殼菌孢子粉與番紅、乙二醇、山梨酸鉀和蒸餾水高剪切混合均勻，再加入步驟（3）磁性成膜劑混合攪拌40-60分鐘，即得到所述生物磁粉種衣劑。
其中，所述球毛殼菌菌液中球毛殼菌的濃度為≥107cfu/ml，優(yōu)選為107-109cfu/ml。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點：
（1）本發(fā)明對球毛殼菌進行發(fā)酵培養(yǎng)，使用坡縷石作為載體，對發(fā)酵菌液中球毛殼菌孢子進行吸附固定，可提高后期包衣效果，通過種子包衣方式直接誘導(dǎo)油菜的根毛產(chǎn)生抗性，阻止根腫病菌的侵染。
（2）本發(fā)明中使用聚乙烯吡咯烷酮與四氧化三鐵復(fù)配作為成膜劑，對包衣后的油菜種子進行磁場處理能促進種子中的酶活化，與球毛殼菌孢子復(fù)配作用可明顯提高種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、出苗率，改善種子的幼苗素質(zhì)，使幼苗根系發(fā)達、粗壯且莖干粗矮，為壯苗打下基礎(chǔ)。
具體實施方式
一種高效防治油菜根腫病的生物磁粉種衣劑，由以下重量份原料組成：聚乙烯吡咯烷酮72份，土豆14份，紅糖3份，球毛殼菌菌液15份，坡縷石17份，蒸餾水適量，四氧化三鐵11份，番紅0.5份，乙二醇2份，山梨酸鉀3份。
具體步驟如下：
（1）將土豆去皮、切塊，加入蒸餾水置于密閉容器內(nèi)，加熱排除冷空氣后維持120℃、0.7小時，并用四層紗布過濾煮沸的土豆，冷卻后再加入紅糖、補足水量，混勻，轉(zhuǎn)入100℃蒸汽滅菌0.8小時，制得液體培養(yǎng)基；
（2）載體球毛殼菌孢子粉的制備：
①、球毛殼菌菌液的制備：將球毛殼菌菌種活化，無菌接入上述液體培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)速200r/min、30℃搖床培養(yǎng)13日，至菌液粘稠、顏色改變并可見菌絲大量生長，得球毛殼菌菌液；
②、將上述球毛殼菌菌液與坡縷石按照配方中的比例混合，攪拌3小時，在4000rmp/min離心6分鐘，并在35℃溫度下進行烘干，得載體球毛殼菌孢子粉；
（3）磁性成膜劑的制備：
取聚乙烯吡咯烷酮加入到餾水中，在攪拌條件下加熱至75℃直到完全溶解，得到均一透明狀的18%聚乙烯吡咯烷酮水溶液，加入四氧化三鐵粉末攪拌均勻，得到四氧化三鐵/聚乙烯吡咯烷酮混合溶液作為成膜劑備用；
（4）將步驟（2）載體球毛殼菌孢子粉與番紅、乙二醇、山梨酸鉀和蒸餾水高剪切混合均勻，再加入步驟（3）磁性成膜劑混合攪拌50分鐘，即得到所述生物磁粉種衣劑。
其中，所述球毛殼菌菌液中球毛殼菌的濃度為≥107cfu/ml，優(yōu)選為107-109cfu/ml。