專利名稱：：雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料及其生物活性物質(zhì)載體的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種雞專用飼料，特別是涉及一種雞專用生物添加劑預(yù)混合詞料及其生物活性物質(zhì)載體的制備方法。二
背景技術(shù)：
：經(jīng)濟(jì)動(dòng)物一般多喂詞具備營(yíng)養(yǎng)需求的物質(zhì)，也就是所謂的飼料，這樣可以促進(jìn)動(dòng)物的生長(zhǎng)、生產(chǎn)和健康，而且在合理使用下對(duì)動(dòng)物是安全、有效的。為了滿足特殊需求，而在飼料加工、制作和使用過(guò)程中添加少量或者微量的物質(zhì)，這些物質(zhì)通常包括酶制劑、益生菌、益生素、胺基酸、維生素、微量礦物元素等。而生物添加劑預(yù)混合飼料則是由兩種或兩種以上益生菌或益生素飼料添加劑與載體或稀釋劑按一定比例配制的均勻混合物，同時(shí)包括了胺基酸、維生素、微量礦物元素。目前，為了避免在動(dòng)物飼料中添加抗生素所帶來(lái)的毒副作用。動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)在詞料中采取取代抗生素的添加劑包羅萬(wàn)象，其中以益生菌、酵母菌、酸化劑、酶制劑與中草藥制劑的研究開(kāi)發(fā)最為常見(jiàn)，該方面的研究是現(xiàn)代生物科技產(chǎn)業(yè)與農(nóng)畜水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)最為關(guān)切而且投入資金最多的項(xiàng)目。益生菌就是微生物制劑，又可稱為生菌劑，在國(guó)外已被廣泛應(yīng)用，1989年美國(guó)食品與藥物管理局(FDA)公布了可以直接飼喂且一般認(rèn)為是安全的微生物種名單，共有41種，包括地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、凝結(jié)芽孢桿菌、雙歧乳酸桿菌、嗜熱性鏈球菌、糞腸球菌、乳酸腸球菌、嗜酸性乳酸桿菌、干酪乳酸桿菌、乳酸乳桿菌、植物乳酸桿菌、釀酒酵母及其亞種或變異種等等。使用益生菌配合天然發(fā)酵基質(zhì)是生產(chǎn)綠色環(huán)保飼料的適當(dāng)選擇，精密調(diào)配碳/氮比值、單位時(shí)間溶氧量、酸堿值、溫度、時(shí)間和特殊添加物質(zhì)，藉菌種對(duì)有機(jī)質(zhì)的轉(zhuǎn)化作用除掉營(yíng)養(yǎng)抑制因子或毒素，降解大分子成為小分子肽，使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)更利于被動(dòng)物腸道吸收；益生菌繁殖過(guò)程還會(huì)產(chǎn)生各種具有提升免疫力的初級(jí)代謝產(chǎn)物包括維生素B群、核苷酸、胺基酸以及乳酸、醋酸等酸化劑、各種消化酶，還有促進(jìn)腸道正常菌叢平衡的果寡醣、丁酸鹽，這些水溶性代謝產(chǎn)物加上活性益生菌都將以天然發(fā)酵基質(zhì)為載體，再與胺基酸、維生素、微量礦物元素做精確比例調(diào)配，以此為理論基礎(chǔ)發(fā)展成生物添加劑預(yù)混合飼料。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料及其生物活性物質(zhì)載體的制備方法。利用本發(fā)明技術(shù)方案制備的雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料可以大幅度提升飼料營(yíng)養(yǎng)轉(zhuǎn)化效率、提升雞只免疫力、降低應(yīng)激效應(yīng)、增進(jìn)養(yǎng)殖農(nóng)民的經(jīng)濟(jì)收益。本發(fā)明的技術(shù)方案是本發(fā)明提供一種生物活性物質(zhì)載體的制備方法，所述生物活性物質(zhì)載體是由枯草芽孢桿菌Tsao060605和凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887復(fù)合發(fā)酵含海藻粉的固態(tài)發(fā)酵活性物質(zhì)，加上兩種菌種液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)綜合而制備的一種生物活性物質(zhì)載體，該制備方法的詳細(xì)步驟如下a、枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)的制備先將糖蜜或豆?jié){以無(wú)菌水稀釋至以巴林糖度計(jì)測(cè)量濃度為17brix，在IO(TC條件下、滅菌處理1218分鐘后，取35004200L放入發(fā)酵罐，再將初期經(jīng)常規(guī)方法培養(yǎng)的枯草芽孢桿菌Tsao060605菌液500L倒入發(fā)酵罐，然后再把已在滅菌罐內(nèi)以1000L無(wú)菌水配制的濃度為7%的脫脂奶粉或5%的黃豆粉營(yíng)養(yǎng)源水溶液以100°C、1218分鐘滅菌處理后，取3001000L放入發(fā)酵罐，使所述脫脂奶粉或黃豆粉相對(duì)于糖蜜或豆?jié){其濃度分別為0.62.1%或0.41.5%，所述在滅菌罐內(nèi)以無(wú)菌水配制的5%的黃豆粉水溶液中含有濃度為0.001%的菠蘿酵素，綜合以上營(yíng)養(yǎng)源制備液態(tài)底物進(jìn)行發(fā)酵，在發(fā)酵罐中發(fā)酵溫度為2755-C，發(fā)酵時(shí)間為1048小時(shí)，在發(fā)酵終止時(shí)加入分解酶，其加入量為占步驟c中所述固態(tài)底物總量的0.010.5%，加入分解酶的同時(shí)，發(fā)酵罐夾套內(nèi)以冰水循環(huán)將發(fā)酵菌液溫度降至78。C即可；b、凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)的制備先將糖蜜或豆?jié){以無(wú)菌水稀釋至以巴林糖度計(jì)測(cè)量濃度為1.59brix，在100'C條件下、滅菌處理1218分鐘后，取35004200L放入發(fā)酵罐，再將初期經(jīng)常規(guī)方法培養(yǎng)的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887菌液500L倒入發(fā)酵罐，再把已在滅菌罐內(nèi)以1000L無(wú)菌水配制的濃度為8%的脫脂奶粉或7%的黃豆粉和1%的無(wú)水磷酸二鉀營(yíng)養(yǎng)源水溶液，以100。C、1218分鐘滅菌處拜后取3001000L放入發(fā)酵罐，使所述脫脂奶粉或黃豆粉和無(wú)水磷酸二鉀相對(duì)于糖蜜或豆?jié){其濃度分別為0.72.4%或0.62.1%和0.080.3%，所述在滅菌罐內(nèi)以無(wú)菌水配制的7%的黃豆粉水溶液中含有濃度為0.001%的菠蘿酵素，綜合以上營(yíng)養(yǎng)源制備液態(tài)底物進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)發(fā)酵溫度為3742'C,發(fā)酵時(shí)間為1848小時(shí)，發(fā)酵終止時(shí)加入菠蘿酶和a-半乳糖苷酶，所述菠蘿酶的加入量占步驟c中所述固態(tài)底物總量的0.00050.01%，所述a-半乳糖苷酶的加入量占步驟c中所述固態(tài)底物總量的0.0050.05%，加入酶的同時(shí)，發(fā)酵罐夾套內(nèi)以冰水循環(huán)將發(fā)酵菌液溫度降至78'C即可；c、枯草芽孢桿菌Tsao060605和凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887固態(tài)生物活性物質(zhì)的制備先將固態(tài)底物以蒸氣調(diào)質(zhì)530分鐘，降溫至4043-C，然后將步驟a制備的枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)和步驟b制備的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)混合均勻，混合時(shí)枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為1030%，將處理后的固態(tài)底物與混合后的液態(tài)生物活性物質(zhì)進(jìn)行混合發(fā)酵，固態(tài)底物與混合后的液態(tài)生物活性物質(zhì)混合時(shí)，其中混合后的液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為2595%，發(fā)酵時(shí)發(fā)酵溫度為3055'C，發(fā)酵時(shí)間為1272小時(shí)，在固態(tài)發(fā)酵結(jié)束前08小時(shí)加入海藻粉，所述海藻粉的加入量占固態(tài)底物總量的110%，發(fā)酵結(jié)束后將其物料在5510(TC的溫度下烘干，烘干至發(fā)酵底物水分含量^7%，最后粉碎，得到固態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)；d、生物活性物質(zhì)載體的制備將步驟a、b制備的枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)和凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)分別濃縮成干物量為2045%的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)，將兩種濃縮后的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)進(jìn)行混合，其中干物量為2045%的枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為4050%、干物量為2045%的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為5060%，將混合后的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)噴灑在步驟C中制備的固態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)上，所述混合后的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)噴灑量占固態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)總量的0.51.5°/。，噴灑后即得生物活性物質(zhì)載體。根據(jù)上述生物活性物質(zhì)載體的制備方法，步驟a中所述初期經(jīng)常規(guī)方法培養(yǎng)的枯草芽孢桿菌Tsao060605菌液中菌數(shù)為^1.0xl()SCFU/ml，酸堿值pH為5.86.5;所述發(fā)酵后枯草芽孢桿菌Tsao060605菌液中菌數(shù)為^1.2xl(^CFU/ml。酸堿值pH為5.86.5。根據(jù)上述生物活性物質(zhì)載體的制備方法，步驟a中所述黃豆粉的粒度為全部通過(guò)4060目篩分析篩；所述分解酶為酸性蛋白分解酶、菠蘿酶、(x-淀粉分解酶、纖維分解酶、半纖維分解酶、(x-半乳糖苷酶、木聚醣酶、甘露聚醣酶中的至少一種。根據(jù)上述生物活性物質(zhì)載體的制備方法，步驟b中所述初期經(jīng)常規(guī)方法培養(yǎng)的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887菌液中菌數(shù)為^1.0xl()SCFU/ml，酸堿值pH為4.65.8;發(fā)酵后凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887菌液中菌數(shù)為2l.2xl(^CFU/ml，酸堿值pH為4.35.8;所述黃豆粉的粒度為全部通過(guò)4060目篩分析篩。根據(jù)上述生物活性物質(zhì)載體的制備方法，步驟c中所述固態(tài)底物為去皮黃豆粕、黃豆粉、黃豆渣、去脂米糠、蠶豆粕、豌豆粕、棉籽粕、菜籽粕、小麥麩、大麥麩、啤酒糟、玉米酒糟、大米酒糟和玉米粉中的至少一種；所述物料粉碎后過(guò)2040目篩。一種雞專用生物添加劑預(yù)混合詞料，所述生物添加劑預(yù)混合飼料是以上述制備的生物活性物質(zhì)為載體，制備1000g雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料所需的原料為生物活性物質(zhì)載體242.0g397.0g、磷酸二氫鈣160.0g267.5g、碳酸鈣200.0g280.0g、維生素添加劑12.5g30.5g、胺基酸添加劑60.0g72.5g、礦物元素12.5g25.0g、酶制劑12.5g20.0g、亞麻油酸80.0g125.0g、干物量為2045%的枯草芽孢桿菌Tsao060607液態(tài)生物活性物質(zhì)1.0ml12.0ml和干物量為2045%的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)3.0ml7.8ml。根據(jù)上述的雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料，所述制備1000g雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料還需加入霉菌毒素吸附劑12.5g。根據(jù)上述的雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料，所述生物活性物質(zhì)載體中枯草芽孢桿菌Tsao060605的含量為1.0xl053.0xl01GCFU/kg，凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887的含量為1.0xl065.0xl0"CFU/kg。根據(jù)上述的雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料，所述雞專用生物添加劑預(yù)混合詞料中枯草芽孢桿菌Tsao060605的含量為1.0xl042.0xl01GCFU/kg，凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887的含量為1.0xl()52.0xlO"CFU/kg。根據(jù)上述的雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料，所述干物量為2045%的枯草芽孢桿菌Tsao06065液態(tài)生物活性物質(zhì)是將權(quán)利要求1步驟a中制備的枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)按照常規(guī)方法濃縮而成的；所述干物量為2045%的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)是將權(quán)利要求1步驟b中制備的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)按照常規(guī)方法濃縮而成的。根據(jù)上述的雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料，所述維生素添加劑、胺基酸添加劑、礦物元素、酶制劑和霉菌毒素吸附劑均為市場(chǎng)上銷售的國(guó)家規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)P叩o本發(fā)明采用的海藻粉中含有的營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表一。<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>本發(fā)明在固態(tài)生物活性物質(zhì)制備過(guò)程中加入海藻粉，可以提供更多的微量元素和胺基酸。.本發(fā)明的積極有益效果1、本發(fā)明制備的雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料是以對(duì)動(dòng)物有益的菌種來(lái)發(fā)酵天然谷物，所以本發(fā)明預(yù)混合飼料是純天然的綠色飼料。制備過(guò)程中有益菌種在發(fā)酵中產(chǎn)生的一次性代謝產(chǎn)物是無(wú)毒的，其中有許多產(chǎn)物可以減少雞只飼料中抗生素的使用強(qiáng)度與頻度；本發(fā)明預(yù)混合飼料可以以14%的比例常態(tài)添加于雞詞料，由此可以顯著提升詞料中蛋白質(zhì)與胺基酸的可消化率、飼料可利用能量，并且減少下痢發(fā)生而促使糞便干且松、減少氨與硫化氫臭味、促進(jìn)雞只生長(zhǎng)、提高飼料轉(zhuǎn)化率、增加蛋重及蛋殼硬度、延長(zhǎng)產(chǎn)蛋雞產(chǎn)蛋高峰期、增強(qiáng)免疫應(yīng)激能力。2、本發(fā)明采用的枯草芽孢桿菌Tsao060605具有以下優(yōu)點(diǎn)(1)、能夠產(chǎn)生內(nèi)生性孢子，耐高溫、胃酸、膽鹽；(2)、因?yàn)榉敝呈来焖伲梢杂行б种撇≡纳L(zhǎng)；(3)、分泌抗菌物質(zhì)能力強(qiáng)，能夠抑制大腸桿菌、沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌等病原菌；(4)、分泌酶能力強(qiáng)，包括a-淀粉酶(液化酶)、，淀粉酶(糖化酶)、纖維酶與蛋白酶；(5)、降低腐敗菌在大腸內(nèi)過(guò)度發(fā)酵產(chǎn)生毒素所造成的動(dòng)物危害；(6)、能夠利用詞料內(nèi)的碳水化合物轉(zhuǎn)化成有機(jī)酸，有效促進(jìn)腸蠕動(dòng)，預(yù)防便秘。3、本發(fā)明采用的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887具有以下優(yōu)點(diǎn)(1)、與枯草芽孢桿菌Tsao060605協(xié)同制造腸道有益菌占優(yōu)勢(shì)的平衡效果相當(dāng)強(qiáng)烈，即充分利用枯草芽孢桿菌Tsao060605分解碳水化合物而產(chǎn)生的寡醣，產(chǎn)生乙酸、乳酸除了制造病原菌不利生長(zhǎng)的酸性環(huán)境外，還提供其它乳酸菌良好生長(zhǎng)因子；(2)、增強(qiáng)免疫力；(3)、在腸道能夠制造酸性環(huán)境，使銅、鐵、鋅、鎂、鈣、磷的生物利用率提高。4、本發(fā)明添加劑預(yù)混合飼料的配方具有獨(dú)一性，其生物活性物質(zhì)載體的制備工藝具有先進(jìn)性、創(chuàng)新性，并且有效降低全價(jià)飼料的成本，必能帶動(dòng)雞只養(yǎng)殖業(yè)邁向綠色、環(huán)保、有機(jī)，具有深遠(yuǎn)的開(kāi)創(chuàng)價(jià)值和啟發(fā)意義。具體實(shí)施例方式以下實(shí)施例僅對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的解釋說(shuō)明，并不限制本發(fā)明的內(nèi)容。首先說(shuō)明一下枯草芽孢桿菌Tsao060605、凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887這兩種菌種的獲取和有關(guān)性能以及兩種菌液的初期常規(guī)培養(yǎng)方法的具體過(guò)程。一、枯草芽孢桿菌Tsao060605、凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887這兩種菌種的獲取(一)、枯草芽孢桿菌(5fl"7/Mwwte7&)Tsao060605的獲得1、枯草芽孢桿菌Tsao060605的獲取方法(1)自臺(tái)灣省臺(tái)南市一發(fā)酵豆粕制造工廠取一克廢棄物，加入10mlTrypticaseSoyBroth(胰酶大豆培養(yǎng)液，Difco,Sparks,U.S.A.:每升含胰蛋白胨20.0g，右旋糖1.0g,磷酸氫二鈉2.0g，硝酸鉀1.0g，將pH調(diào)至7.0，固態(tài)培養(yǎng)基加入1.5%瓊脂)中震蕩混合均勻后，以常規(guī)巴氏德消毒法消毒；(2)、將TSB培養(yǎng)液進(jìn)行10倍梯度稀釋至l(T4，每個(gè)梯度稀釋液于37"C溫度培養(yǎng)24小時(shí)，進(jìn)行芽孢化菌株的初步增菌篩選；(3)、再自各稀釋管取100pi至TiypticaseSoyBroth(胰酶大豆培養(yǎng)液,Difco，Sparks,U.S.A)平板上，并以L型玻棒涂抹均勻，同樣37。C培養(yǎng)24小時(shí)，再以隨機(jī)選取方式挑取單一菌落至一個(gè)新的TrypticaseSoyAgar平板上，并以三步法劃開(kāi)，重復(fù)純化繼代三次以后，得到一株具有芽孢化特性的菌株，將其命名為T(mén)sao060605。2、枯草芽孢桿菌Tsao060605菌種的特性(1)、形態(tài)特征菌落表面粗糙不透明，有皺折而表面黯淡，為淡黃色或淡褐色，外觀型態(tài)呈圓形或不規(guī)則狀；在液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí)，常形成皺醭。細(xì)胞大小約(0.60.8pm)x(1.53nm)，蘭氏染色陽(yáng)性，著色均勻，無(wú)莢膜；內(nèi)生型孢子大小約(0.30.9拜)x(1.11.6pm)，孢子呈橢圓形，位于菌體中央或稍偏，芽孢形成后菌體不膨大；通常利用周生鞭毛移動(dòng)。(2)、生理特性化學(xué)異營(yíng)，有氧代謝；能進(jìn)行良好的糖解作用與TCA循環(huán)，接觸酶(catalase)為陽(yáng)性；具水解蛋白質(zhì)、纖維、半纖維與淀粉的能力，能降解糖類產(chǎn)生豐富的酸；在286(TC、酸堿值6.57.0時(shí)生長(zhǎng)良好；具耐壓、耐熱、耐酸、耐堿特性；在缺乏碳、氮或磷的環(huán)境中會(huì)形成內(nèi)生性孢子。(3)、熱穩(wěn)定性枯草芽孢桿菌(Bac///w1s1sw6"http://1s)Tsao060605的熱穩(wěn)定性見(jiàn)表l。表1:枯草芽孢桿菌Tsao060605的熱穩(wěn)定性溫度反應(yīng)時(shí)間(分菌數(shù)溫度反應(yīng)時(shí)間(分菌數(shù)(°c)鐘)(CFU/ml)(°C)鐘)(CFU/ml)2.5xl082.8xl0760152.5xl08110154.3xlO6302.5xl0830診io62.5xl084.9xl0680152.0xl08115152.8xl06301.7xl0830l.OxlO61.7xl085.3xl05100154.8xl07121153.1xl0530診io7301.2xl05注測(cè)試樣品的起始芽孢化菌數(shù)為2.5xl08CFU/ml。(5)、耐酸堿性10ml枯草芽孢桿菌(Bac///wwZ^7&)Tsao060605菌液經(jīng)離心去除上清液，測(cè)得的菌數(shù)為2.5xl08CFU/ml，分別在不同pH值的緩沖液中(pH27緩沖液為使用0.2M的磷酸氫二鈉鹽溶液與0.2M的鹽酸溶液進(jìn)行調(diào)劑，pH810緩沖液為使用0.2M的磷酸氫二鈉鹽溶液與0.2M的氫氧化鈉溶液進(jìn)行調(diào)劑)，靜置3小時(shí)，然后統(tǒng)計(jì)菌數(shù)，結(jié)果見(jiàn)表2。表2、枯草芽孢桿菌Tsao060605的耐酸堿性<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>注測(cè)試樣品的起始菌數(shù)為2.5xl()SCFU/ml。(6)、最適培養(yǎng)基成份TrypticaseSoyBroth胰酶大豆培養(yǎng)液的組成為胰蛋白胨17.0g，植物蛋白胨3.0g,氯化鈉5.0g，磷酸氫二鉀2.5g，葡萄糖2.5g，加蒸餾水配制成1升，調(diào)整pH7.0。(7)、最適培養(yǎng)溫度最適培養(yǎng)溫度為37。C。(二)、凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887的獲取1、凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887的獲取方法(1)、自臺(tái)灣高雄縣一有機(jī)肥制造廠取一克樣品，加入10mlGYEBroth(GYE培養(yǎng)液；含酵母提取物5.0g、葡萄糖2.0g、磷酸一鉀0.5g、磷酸二鉀0.5g、硫酸鎂0.3g、氯化鈉O.Olg、硫酸錳O.Olg、硫酸鋅0.0016g、硫酸銅0.0016g、硫酸鈷0.0016g、肉蛋白胨5g，將pH調(diào)至6.06.2，固態(tài)培養(yǎng)基加入1.5%瓊脂)中震蕩混合均勻后，以70'C恒溫水浴30分鐘后馬上降溫到45°C。(2)、再以GYE培養(yǎng)液進(jìn)行10倍梯度稀釋至IO"6，將每個(gè)梯度稀釋液培養(yǎng)于4CTC溫度培養(yǎng)48小時(shí)，進(jìn)行芽孢化菌株的初步增菌篩選。(3)、自各稀釋管取100^1l至DifcoTMLactobacilliMRS平板培養(yǎng)基上，并以L型玻棒涂抹均勻，同樣分別37r培養(yǎng)24小時(shí)后，再以隨機(jī)方式挑取約2.5mm大小、呈突起、表面平滑光亮的單一菌落至一新的MRS平板培養(yǎng)基上，并以三步法劃開(kāi)，重復(fù)純化繼代三次以后，得到一株具有產(chǎn)乳酸活性的菌株，將其命名為L(zhǎng)eehai887。2、凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887菌種的特性(1)、形態(tài)特征菌落大小約2.02.5mm、呈突起、表面平滑光亮、不產(chǎn)生色素、乳白色至乳黃色。菌種大小(3.08.0nrn)x(1.01.9拜)，纖細(xì)長(zhǎng)桿狀偶而稍彎曲、末端稍圓、革蘭氏染色陽(yáng)性、產(chǎn)內(nèi)生性橢圓形芽孢位在細(xì)胞末端、孢子大小約(1.01.7nm)x(0.91.2^m),具周生鞭毛、有運(yùn)動(dòng)性。(2)、生理特性化學(xué)異營(yíng)，好氧至微好氧代謝，酸性環(huán)境生長(zhǎng)良好，行同質(zhì)型釀酵并產(chǎn)L(+)型乳酸、能產(chǎn)生抗菌物質(zhì)。會(huì)利用少數(shù)糖類而產(chǎn)酸，包括葡萄糖(Glucose)、半乳糖(Galactose)、木糖(Xylose)、阿拉伯糖(Arabinose)、麥芽糖(Maltose)、甘露糖(Mannose)、果糖(Fructose)、蔗糖(Sucrose)與海藻糖(Trehalose)。無(wú)法水解淀粉與酪蛋白。接觸酶(Catalase)反應(yīng)為陽(yáng)性。引朵(Indole)反應(yīng)為陰性、不產(chǎn)生硫化氫。無(wú)法降解硝酸鹽成為亞硝酸鹽。在3037°C、酸堿值5.56.5時(shí)是生長(zhǎng)良好條件。(3)、熱穩(wěn)定性凝結(jié)芽孢桿菌(Ba"7/wscoa^w/flra)Leehai887的熱穩(wěn)定性見(jiàn)表3。表3、凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887的熱穩(wěn)定性<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>注觀賦樣品的起始芽孢化菌數(shù)為2.6xl()SCFU/ml。(4)、耐酸堿性分別將凝結(jié)芽孢桿菌(5ac說(shuō)wcoag"/ara)Leehai887在不同pH值的緩沖液中(pH27緩沖液為使用0.2M的磷酸氫二鈉鹽溶液與0.2M的鹽酸溶液進(jìn)行調(diào)劑，pH810緩沖液為使用0.2M的磷酸氫二鈉鹽溶液與0.2M的氫氧化鈉溶液進(jìn)行調(diào)劑)，靜置3小時(shí)，然后統(tǒng)計(jì)菌數(shù)，結(jié)果見(jiàn)表4。表4、凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887的耐酸堿性酸堿值pH殘余菌數(shù)(CFU/ml)酸堿值pH殘余菌數(shù)(CFU/ml)23.8x107CFU/ml72.9x108CFU/ml1.7xl08CFU/ml82.9xl08CFU/ml42.6x108CFU/ml92.8xl08CFU/ml2.9x108CFU/ml102.7xl08CFU/ml62.9x108CFU/ml注測(cè)試樣品的起始菌數(shù)為2.9x108CFU/ml。(5)、最適培養(yǎng)基成份LactobacilliMRS培養(yǎng)基的組成為每升培養(yǎng)基中含有蛋白胨10.0g,牛肉膏提取物10.0g，酵母提取物5.0g，葡萄糖20.0g，檸檬酸銨2.0g，醋酸鈉5.0g，7倍水合硫酸鎂O.lg，水合硫酸錳0.05g，無(wú)水磷酸二鉀2.0g，吐溫-801.0g;蒸餾水配制，pH6.5。(6)、最適培養(yǎng)溫度最適培養(yǎng)溫度為37"C。二、枯草芽孢桿菌Tsao060605菌液的初期常規(guī)培養(yǎng)方法的具體過(guò)程第一步以250ml三角錐瓶裝100ml胰酶大豆培養(yǎng)液作為種瓶來(lái)培養(yǎng)枯草芽孢桿菌Tsao060605，進(jìn)行種菌的準(zhǔn)備，在37。C恒溫震蕩培養(yǎng)箱內(nèi)，以150rpm震蕩速率、時(shí)間24小時(shí)，使菌數(shù)達(dá)到1.0xl08CFU/ml以上。第二步將種瓶菌液倒入裝有5公升胰酶大豆培養(yǎng)液的攪拌式發(fā)酵槽，攪拌速度控制在150rpm，通氣量0.5v/v.min，溫度保持在37"C恒溫，時(shí)間24小時(shí)，使菌數(shù)達(dá)到1.0xl08CFU/ml3.0xl09CFU/ml，酸堿值pH5.86.5。第三步在種子罐中進(jìn)行發(fā)酵將經(jīng)過(guò)5公升攪拌式發(fā)酵槽活化后的枯草芽孢桿菌Tsao060605的菌液接種到500L的種子罐進(jìn)行發(fā)酵。發(fā)酵條件如下1-1培養(yǎng)基l國(guó)l-l、濃度以糖度計(jì)測(cè)量為7.0brix的糖蜜，脫脂奶粉0.8%;1-1-2、或濃度以糖度計(jì)測(cè)量為2.5brix的糖蜜，黃豆粉2.1%;1-1-3、或濃度以糖度計(jì)測(cè)量為4.5brix的豆?jié){。以實(shí)際操作為例，采用2.5brix的糖蜜，黃豆粉2.1%為種子發(fā)酵罐培養(yǎng)基。1-2、37。C恒溫發(fā)酵24小時(shí)，攪拌速度控制在150rpm，通氣量0.5v/v.min,以0.5M氫氧化鈉調(diào)節(jié)發(fā)酵過(guò)程中的酸堿值。1-3、發(fā)酵終點(diǎn)的菌數(shù)達(dá)到L2xl(fCFU/ml以上，酸堿值pH5.86.5。三、凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887菌液的初期常規(guī)培養(yǎng)方法的具體過(guò)程第一步以250ml三角錐瓶裝175mlMRS培養(yǎng)液作為種瓶來(lái)培養(yǎng)凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887,進(jìn)行種菌的準(zhǔn)備，在37'C恒溫震蕩培養(yǎng)箱內(nèi)，以100rpm震蕩速率、時(shí)間24小時(shí)，使菌數(shù)達(dá)到1.0xl08CFU/ml以上。第二步將種瓶菌液倒入裝有5公升MRS培養(yǎng)液的攪拌式發(fā)酵槽，攪拌速度控制在100rpm，通氣量0.1v/v.min，溫度保持在37X:恒溫，時(shí)間24小時(shí)，以O(shè).IM氫氧化鈉饋料控制酸堿值，使菌數(shù)達(dá)到1.0xl08CFU/ml4.5xl08CFU/ml,酸堿值pH4.35.8。第三步在種子罐中進(jìn)行發(fā)酵將經(jīng)過(guò)5公升攪拌式發(fā)酵槽活化后的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887的菌液接種到500L的種子罐進(jìn)行發(fā)酵。發(fā)酵條件如下1-1培養(yǎng)基1-1-1、濃度以糖度計(jì)測(cè)量為9.0brix的糖蜜，脫脂奶粉0.8%;1-1-2、或濃度以糖度計(jì)測(cè)量為2.5brix的糖蜜，黃豆粉1.5%;1-1-3、或濃度以糖度計(jì)測(cè)量為4.5brix的豆?jié){。1-1-4、以實(shí)際操作為例，采用2.5brix的糖蜜，黃豆粉1.5%，無(wú)水磷酸二鉀0.2%為種子發(fā)酵罐培養(yǎng)基。1-2、37"C恒溫發(fā)酵24小時(shí)，攪拌速度控制在100rpm，通氣量0.1v/v.min,以0.5M氫氧化鈉調(diào)節(jié)發(fā)酵過(guò)程中的酸堿值。1-3、發(fā)酵終點(diǎn)的菌數(shù)達(dá)到1.2xl07CFU/ml以上，酸堿值pH4.35.8。實(shí)施例1:本發(fā)明生物活性物質(zhì)載體的制備方法，該制備方法的詳細(xì)步驟如下a、枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)的制備先將糖蜜以無(wú)菌水稀釋至以糖度計(jì)測(cè)量濃度為2.5brix，在10(TC條件下、滅菌處理15分鐘后，取3700L放入發(fā)酵罐，再將初期經(jīng)常規(guī)方法培養(yǎng)的枯草芽孢桿菌Tsao060605菌液(該菌液中枯草芽孢桿菌Tsao060605菌數(shù)為2l.0xl08CFU/ml、酸堿值pH為5.86.5)500L倒入發(fā)酵罐，然后再把已在滅菌罐內(nèi)以1000L無(wú)菌水配制的濃度為7%的脫脂奶粉營(yíng)養(yǎng)源水溶液以100°C、15分鐘滅菌處理后，取800L放入發(fā)酵罐，加入后使脫脂奶粉相對(duì)于糖蜜其濃度為1.2%，綜合以上營(yíng)養(yǎng)源制備液態(tài)底物進(jìn)行發(fā)酵，在發(fā)酵罐中發(fā)酵時(shí)發(fā)酵溫度為37°C，發(fā)酵時(shí)間為24小時(shí)(發(fā)酵過(guò)程中攪拌速度控制在150rpm，通氣量為0.5v/V.min，以0.5mol/L的氫氧化鈉調(diào)節(jié)發(fā)酵過(guò)程中的酸堿值)，在發(fā)酵終止時(shí)加入分解酶(分解酶采用的是纖維分解酶)，其加入量為占步驟c中所述固態(tài)底物總量的0.01%，加入分解酶的同時(shí)，發(fā)酵罐夾套內(nèi)以冰水循環(huán)將發(fā)酵菌液溫度降至78。C即可(發(fā)酵后枯草芽孢桿菌Tsao060605菌液中菌數(shù)為2l.2xl07CFU/ml、酸堿值pH為5.86.5);b、凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)的制備先將糖蜜以無(wú)菌水稀釋至以糖度計(jì)測(cè)量濃度為2.0brix，在IO(TC條件下、滅菌處理15分鐘后，取3500L放入發(fā)酵罐，再將初期經(jīng)常規(guī)方法培養(yǎng)的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887菌液(該菌液中凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887菌數(shù)為$1.0xl08CFU/ml、酸堿值pH為4.65.8)500L倒入發(fā)酵罐，再把已在滅菌罐內(nèi)以1000L無(wú)菌水配制的濃度為8%的脫脂奶粉、1%的無(wú)水磷酸二鉀營(yíng)養(yǎng)源水溶液，以100'C、15分鐘滅菌處理后取1000L放入發(fā)酵罐，加入后使脫脂奶粉、無(wú)水磷酸二鉀相對(duì)于糖蜜其濃度分別達(dá)到1.8%和0.2%，綜合以上營(yíng)養(yǎng)源制備液態(tài)底物進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)發(fā)酵溫度為37X:,發(fā)酵時(shí)間為42小時(shí)(發(fā)酵過(guò)程中攪拌速度控制在100rpm，通氣量為0.1v/v.min，以O(shè).5mol/L的氫氧化鈉調(diào)節(jié)發(fā)酵過(guò)程中的酸堿值)，發(fā)酵終止時(shí)加入菠蘿酶與a-半乳糖苷酶，菠蘿酶的加入量占步驟c中所述固態(tài)底物總量的0.0005%，所述a-半乳糖苷酶的加入量占步驟c中所述固態(tài)底物總量的0.05%，加入酶的同時(shí)，發(fā)酵罐夾套內(nèi)以冰水循環(huán)將發(fā)酵菌液溫度降至78""C即可(發(fā)酵后凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887菌液中菌數(shù)為2l.2xl07CFU/ml、酸堿值pH為4.35.8);c、枯草芽孢桿菌Tsao060605和凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887固態(tài)生物活性物質(zhì)的制備先將固態(tài)底物(所述固態(tài)底物為去皮黃豆粕和黃豆粕)以蒸氣調(diào)質(zhì)1015分鐘，降溫至4043。C，然后將步驟a制備的枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)和步驟b制備的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)混合均勻，混合時(shí)枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為30%，將處理后的固態(tài)底物與混合后的液態(tài)生物活性物質(zhì)進(jìn)行混合發(fā)酵，固態(tài)底物與混合后的液態(tài)生物活性物質(zhì)混合時(shí)，其中混合后的液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為40%，發(fā)酵時(shí)發(fā)酵溫度為37"C，發(fā)酵時(shí)間為24小時(shí)，在固態(tài)發(fā)酵結(jié)束前6小時(shí)加入海藻粉，所述海藻粉的加入量占固態(tài)底物總量的7%，發(fā)酵結(jié)束后將其物料在70'C的溫度下烘干，烘干至發(fā)酵底物水分含量^7%，最后粉碎過(guò)40目篩，得到固態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)；d、生物活性物質(zhì)載體的制備將步驟a、b制備的枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)和凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)分別濃縮成干物量為25%的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)，將兩種濃縮后的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)進(jìn)行混合，其中干物量為25%的枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)所占得重量百分含量為45%，將混合后的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)噴灑在步驟c中制備的固態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)上，所述混合后的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)噴灑量占固態(tài)生物發(fā)酵活性物質(zhì)總量的1.0%,噴灑后即得生物活性物質(zhì)載體。一種雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料，該生物添加劑預(yù)混合詞料是以上述制備的生物活性物質(zhì)為載體，制備1000g預(yù)混合飼料所需的原料為生物活性物質(zhì)載體250.0g、磷酸二氫鈣267.5g、碳酸鈣260.0g、維生素添加劑25.0g、胺基酸添加劑60.0g、礦物元素12.5g、酶制劑12.5g、霉菌毒素吸附劑12.5g、亞麻油酸80.0g、干物量為25°/。的枯草芽孢桿菌Tsao060607液態(tài)生物活性物質(zhì)4.5ml和干物量為25%的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)5.5ml。雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料中采用的維生素添加劑、胺基酸添加劑、礦物元素、酶制劑和霉菌毒素吸附劑均為市場(chǎng)上銷售的國(guó)家規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)品。實(shí)施例2:本發(fā)明生物活性物質(zhì)載體的制備方法與實(shí)施例一基本相同，不同之處在于:步驟a:將糖蜜以無(wú)菌水稀釋至濃度為3brix，稀釋的糖蜜滅菌處理后取3500L放入發(fā)酵罐，取1000L滅菌處理后的脫脂奶粉營(yíng)養(yǎng)源水溶液，加入后脫脂奶粉相對(duì)于糖蜜的濃度為1.5%，發(fā)酵溫度為27'C，發(fā)酵時(shí)間為48小時(shí)，加入的分解酶為a-淀粉分解酶，其加入量占步驟c所采用的固態(tài)底物總量的0.05%;步驟b:先將糖蜜以無(wú)菌水稀釋至濃度為3brix，稀釋的糖蜜滅菌處理后取4200L放入發(fā)酵罐，取300L滅菌處理后的脫脂奶粉、無(wú)水磷酸二鉀營(yíng)養(yǎng)源水溶液，加入后脫脂奶粉、無(wú)水磷酸二鉀相對(duì)于糖蜜的濃度分別為0.7。/。、0.08%,發(fā)酵溫度為42'C，發(fā)酵時(shí)間為18小時(shí)，菠蘿酶的加入量占步驟c中所采用固態(tài)底物總量的0.001%，(i-半乳糖苷酶的加入量占步驟c中所述固態(tài)底物總量的0.05%;步驟C中固態(tài)底物為黃豆粉、黃豆渣和蠶豆粕的混合物，將其固態(tài)底物以蒸氣調(diào)質(zhì)510分鐘，兩種液態(tài)生物活性物質(zhì)混合時(shí)枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為10%,固態(tài)底物與混合后的液態(tài)生物活性物質(zhì)混合時(shí)，混合后的液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為70%,發(fā)酵溫度為50。C，發(fā)酵時(shí)間為18小時(shí)，在固態(tài)發(fā)酵結(jié)束前4小時(shí)加入海藻粉，海藻粉的加入量占固態(tài)底物總量的6.5%，發(fā)酵結(jié)束后物料在IO(TC條件下烘干；步驟d:將步驟a、b制備的兩種液態(tài)生物活性物質(zhì)分別濃縮成干物量為30%的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)，兩種濃縮后的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)混合時(shí)，干物量為30。/。的枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為50%，混合后的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)的噴灑量占固態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)總量的0.5%。一種雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料，該生物添加劑預(yù)混合飼料是以上述制備的生物活性物質(zhì)為載體，制備1000g預(yù)混合飼料所需的原料為生物活性物質(zhì)載體315.0g、磷酸二氫鈣200.0g、碳酸鈣245.0g、維生素添加劑25.0g、胺基酸添加劑60.0g、礦物元素12.5g、酶制劑20.0g、霉菌毒素吸附劑12.5g、亞麻油酸90.0g、干物量為30%的枯草芽孢桿菌Tsao060607液態(tài)生物活性物質(zhì)5.0ml和干物量為30%的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)5.0ml。實(shí)施例3:本發(fā)明生物活性物質(zhì)載體的制備方法與實(shí)施例一基本相同，不同之處在于:步驟a:將糖蜜以無(wú)菌水稀釋至濃度為7.0brix，稀釋的糖蜜滅菌處理后取3800L放入發(fā)酵罐，取700L滅菌處理后的脫脂奶粉營(yíng)養(yǎng)源水溶液，加入后脫脂奶粉相對(duì)于糖蜜的濃度為1.1%，發(fā)酵溫度為55'C，發(fā)酵時(shí)間為IO小時(shí)，加入的分解酶為半纖維分解酶，其加入量占步驟c所采用的固態(tài)底物總量的0.10%;步驟b:先將糖蜜以無(wú)菌水稀釋至濃度為9.0brix，稀釋的糖蜜滅菌處理后取3800L放入發(fā)酵罐，取700L滅菌處理后的脫脂奶粉、無(wú)水磷酸二鉀營(yíng)養(yǎng)源水溶液，加入后脫脂奶粉、無(wú)水磷酸二鉀相對(duì)于糖蜜的濃度分別為1.2%、0.15%，發(fā)酵溫度為4(TC，發(fā)酵時(shí)間為35小時(shí)，菠蘿酶的加入量占步驟c中所采用固態(tài)底物總量的0.005%,所述a-半乳糖苷酶的加入量占步驟c中所述固態(tài)底物總量的0.01%;步驟c中固態(tài)底物為黃豆粉，將其固態(tài)底物以蒸氣調(diào)質(zhì)1520分鐘，兩種液態(tài)生物活性物質(zhì)混合時(shí)枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為20%，固態(tài)底物與混合后的液態(tài)生物活性物質(zhì)混合時(shí)，混合后的液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為50%,發(fā)酵溫度為3(TC，發(fā)酵時(shí)間為72小時(shí)，在固態(tài)發(fā)酵結(jié)束前8小時(shí)加入海藻粉，海藻粉的加入量占固態(tài)底物總量的10%，發(fā)酵結(jié)束后物料在7(TC條件下烘干；步驟d:將步驟a、b制備的兩種液態(tài)生物活性物質(zhì)分別濃縮成干物量為40%的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)，兩種濃縮后的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)混合時(shí)，干物量為40。/。的枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為40%，混合后的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)的噴灑量占固態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)總量的1.0%。一種雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料，該生物添加劑預(yù)混合飼料是以上述制備的生物活性物質(zhì)為載體，制備lOOOg預(yù)混合詞料所需的原料為生物活性物質(zhì)載體242.0g、磷酸二氫鈣195.0g、碳酸鈣280.0g、維生素添加劑30.5g、胺基酸添加劑70.0g、礦物元素12.5g、酶制劑12.5g、霉菌毒素吸附劑12.5g、亞麻油酸125.0g、干物量為40%的枯草芽孢桿菌Tsao060607液態(tài)生物活性物質(zhì)4.0ml和干物量為40%的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)6.0ml。實(shí)施例4:本發(fā)明生物活性物質(zhì)載體的制備方法與實(shí)施例一基本相同，不同之處在于:步驟a:將糖蜜以無(wú)菌水稀釋至濃度為1.0brix，稀釋的糖蜜滅菌處理后取3600L放入發(fā)酵罐，取900L滅菌處理后的5%的黃豆粉(內(nèi)含濃度為0.001%的菠蘿酵素，黃豆粉的粒度為全部通過(guò)4060目篩分析篩)營(yíng)養(yǎng)源水溶液，加入后黃豆粉相對(duì)于糖蜜的濃度為1%，發(fā)酵溫度為30'C，發(fā)酵時(shí)間為30小時(shí)，加入的分解酶為木聚醣酶，加入量占步驟c所采用的固態(tài)底物總量的0.20%;步驟b:先將糖蜜以無(wú)菌水稀釋至濃度為1.5brix，稀釋的糖蜜滅菌處理后取4000L放入發(fā)酵罐，取500L滅菌處理后的7%的黃豆粉(內(nèi)含濃度為0.001%的菠蘿酵素，黃豆粉的粒度為全部通過(guò)4060目篩分析篩)、無(wú)水磷酸二鉀營(yíng)養(yǎng)源水溶液，加入后黃豆粉、無(wú)水磷酸二鉀相對(duì)于糖蜜的濃度分別為0.8%、0.1%,發(fā)酵溫度為4(TC，發(fā)酵時(shí)間為20小時(shí)，菠蘿酶的加入量占步驟c中所采用固態(tài)底物總量的O.OP/。，所述a-半乳糖苷酶的加入量占步驟c中所述固態(tài)底物總量的0.01%;步驟C中固態(tài)底物為蠶豆粕和豌豆粕的混合物，將其固態(tài)底物以蒸氣調(diào)質(zhì)2025分鐘，兩種液態(tài)生物活性物質(zhì)混合時(shí)枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為30%,固態(tài)底物與混合后的液態(tài)生物活性物質(zhì)混合時(shí)，混合后的液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為50%,發(fā)酵溫度為55"C，發(fā)酵時(shí)間為12小時(shí)，在固態(tài)發(fā)酵結(jié)束前4小時(shí)加入海藻粉，海藻粉的加入量占固態(tài)底物總量的4%，發(fā)酵結(jié)束后物料在55。C條件下烘干；步驟d:將步驟a、b制備的兩種液態(tài)生物活性物質(zhì)分別濃縮成干物量為40%的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)，兩種濃縮后的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)混合時(shí)，干物量為40%的枯草芽孢桿菌1幼0060605液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為50%，混合后的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)的噴灑量占固態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)總量的1.5%。一種雞專用生物添加劑預(yù)混合詞料，該生物添加劑預(yù)混合飼料是以上述制備的生物活性物質(zhì)為載體，制備lOOOg預(yù)混合飼料所需的原料為生物活性物質(zhì)載體320.0g、磷酸二氫鈣215.0g、碳酸鈣230.0g、維生素添加劑25.0g、胺基酸添加劑60.0g、礦物元素12.5g、酶制劑15.0g、霉菌毒素吸附劑12.5g、亞麻油酸90.0g、干物量為40%的枯草芽孢桿菌Tsao060607液態(tài)生物活性物質(zhì)12.0ml和干物量為40%的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)3.0ml。實(shí)施例5:本發(fā)明生物活性物質(zhì)載體的制備方法與實(shí)施例一基本相同，不同之處在于步驟a:將豆?jié){以無(wú)菌水稀釋至濃度為5brix，稀釋的豆?jié){滅菌處理后取3900L放入發(fā)酵罐，取600L滅菌處理后的5%的黃豆粉(內(nèi)含濃度為0.001%的菠蘿酵素，黃豆粉的粒度為全部通過(guò)4060目篩分析篩)營(yíng)養(yǎng)源水溶液，加入后黃豆粉相對(duì)于豆槳的濃度為0.7%,發(fā)酵溫度為4(TC，發(fā)酵時(shí)間為28小時(shí)，加入的分解酶為甘露聚醣酶，其加入量占步驟c所采用的固態(tài)底物總量的0.30%;步驟b:先將豆?jié){以無(wú)菌水稀釋至濃度為4.5brix，稀釋的豆?jié){滅菌處理后取3600L放入發(fā)酵罐，取900L滅菌處理后的脫脂奶粉、無(wú)水磷酸二鉀營(yíng)養(yǎng)源水溶液，加入后脫脂奶粉、無(wú)水磷酸二鉀相對(duì)于豆?jié){的濃度分別為1.6%、0.2%,發(fā)酵溫度為37"C，發(fā)酵時(shí)間為24小時(shí)，菠蘿酶的加入量占步驟c中所采用固態(tài)底物總量的0.001%，所述a-半乳糖苷酶的加入量占步驟c中所述固態(tài)底物總量的0.04%;步驟C中固態(tài)底物為蠶豆粕和豌豆粕的混合物，將其固態(tài)底物以蒸氣調(diào)質(zhì)2530分鐘，兩種液態(tài)生物活性物質(zhì)混合時(shí)枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為25%，固態(tài)底物與混合后的液態(tài)生物活性物質(zhì)混合時(shí)，混合后的液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為25%，發(fā)酵溫度為42"C，發(fā)酵時(shí)間為36小時(shí)，在固態(tài)發(fā)酵結(jié)束前2小時(shí)加入海藻粉，海藻粉的加入量占固態(tài)底物總量的10%，發(fā)酵結(jié)束后物料在9(TC條件下烘干；步驟d:將步驟a、b制備的兩種液態(tài)生物活性物質(zhì)分別濃縮成干物量為45%的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)，兩種濃縮后的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)混合時(shí)，干物量為45。/。的枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為48%，混合后的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)的噴灑量占固態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)總量的1.5%。一種雞專用生物添加劑預(yù)混合伺料，該生物添加劑預(yù)混合飼料是以上述制備的生物活性物質(zhì)為載體，制備1000g預(yù)混合飼料所需的原料為生物活性物質(zhì)載體325.0g、磷酸二氫鈣160.0g、碳酸鈣260.0g、維生素添加劑12.5g、胺基酸添加劑72.5g、礦物元素25.0g、酶制劑12.5g、霉菌毒素吸附劑12.5g、亞麻油酸100.0g、干物量為45%的枯草芽孢桿菌Tsao060607液態(tài)生物活性物質(zhì)10.8ml和干物量為45%的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)7.2ml。實(shí)施例6:本發(fā)明生物活性物質(zhì)載體的制備方法與實(shí)施例一基本相同，不同之處在于步驟a:將豆?jié){以無(wú)菌水稀釋至濃度為4.5brix，稀釋的豆?jié){滅菌處理后取4000L放入發(fā)酵罐，取500L滅菌處理后5%的黃豆粉(內(nèi)含濃度為0.001%的菠蘿酵素，黃豆粉的粒度為全部通過(guò)4060目篩分析篩)營(yíng)養(yǎng)源水溶液，加入后黃豆粉相對(duì)于豆?jié){的濃度為0.6%，發(fā)酵溫度為4(TC，發(fā)酵時(shí)間為22小時(shí)，加入的分解酶為纖維分解酶和半纖維分解酶，其加入量占步驟c所采用的固態(tài)底物總量的0.40%;步驟b:先將豆?jié){以無(wú)菌水稀釋至濃度為4brix，稀釋的豆?jié){滅菌處理后取3900L放入發(fā)酵罐，取600L滅菌處理后的脫脂奶粉、無(wú)水磷酸二鉀營(yíng)養(yǎng)源水溶液，加入后脫脂奶粉、無(wú)水磷酸二鉀相對(duì)于豆?jié){的濃度分別為1.1%、0.1%，發(fā)酵溫度為42"C，發(fā)酵時(shí)間為18小時(shí)，菠蘿酶的加入量占步驟c中所采用固態(tài)底物總量的0.005%,所述a-半乳糖苷酶的加入量占步驟c中所述固態(tài)底物總量的0.005%;步驟C中固態(tài)底物為去皮黃豆粕、黃豆粉、黃豆渣和小麥麩的混合物，將其固態(tài)底物以蒸氣調(diào)質(zhì)1015分鐘，兩種液態(tài)生物活性物質(zhì)混合時(shí)枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為15%，固態(tài)底物與混合后的液態(tài)生物活性物質(zhì)混合時(shí)，混合后的液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為65%，發(fā)酵溫度為40'C，發(fā)酵時(shí)間為20小時(shí)，在固態(tài)發(fā)酵結(jié)束前6小時(shí)加入海藻粉，海藻粉的加入量占固態(tài)底物總量的2%，發(fā)酵結(jié)束后物料在IO(TC條件下烘干；步驟d:將步驟a、b制備的兩種液態(tài)生物活性物質(zhì)分別濃縮成干物量為35%的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)，兩種濃縮后的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)混合時(shí)，干物量為35。/。的枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為40%，混合后的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)的噴灑量占固態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)總量的0.5%。一種雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料，該生物添加劑預(yù)混合飼料是以上述制備的生物活性物質(zhì)為載體，制備1000g預(yù)混合飼料所需的原料為生物活性物質(zhì)載體387.0g、磷酸二氫鈣190.5g、碳酸鈣200.0g、維生素添加劑12.5g、胺基酸添加劑60.0g、礦物元素12.5g、酶制劑15.0g、霉菌毒素吸附劑12.5g、亞麻油酸90.0g、干物量為35%的枯草芽孢桿菌Tsao060607液態(tài)生物活性物質(zhì)l.Oml和干物量為35%的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)4.0ml。實(shí)施例7:本發(fā)明生物活性物質(zhì)載體的制備方法與實(shí)施例一基本相同，不同之處在于步驟a:將豆?jié){以無(wú)菌水稀釋至濃度為5.5brix，稀釋的豆?jié){滅菌處理后取3500L放入發(fā)酵罐，取1000L滅菌處理后的脫脂奶粉營(yíng)養(yǎng)源水溶液，加入后脫脂奶粉相對(duì)于豆?jié){的濃度為1.6%，發(fā)酵溫度為50。C，發(fā)酵時(shí)間為IO小時(shí)，加入的分解酶為纖維分解酶和木聚醣酶的混合物，混合酶的加入量占步驟c所采用的固態(tài)底物總量的0.50%;步驟b:先將豆?jié){以無(wú)菌水稀釋至濃度為5brix，稀釋的豆?jié){滅菌處理后取4000L放入發(fā)酵罐，取500L滅菌處理后的黃豆粉(內(nèi)含濃度為0.001%的菠蘿酵素，黃豆粉的粒度為全部通過(guò)4060目篩分析篩)、無(wú)水磷酸二鉀營(yíng)養(yǎng)源水溶液，加入后黃豆粉、無(wú)水磷酸二鉀相對(duì)于豆?jié){的濃度分別為0.7%、0.1%，發(fā)酵溫度為37t，發(fā)酵時(shí)間為24小時(shí)，菠蘿酶的加入量占步驟c中所采用固態(tài)底物總量的0.002%，所述a-半乳糖苷酶的加入量占步驟c中所述固態(tài)底物總量的0.03%;步驟C中固態(tài)底物為去皮黃豆粕、黃豆粉、黃豆渣和小麥麩的混合物，將其固態(tài)底物以蒸氣調(diào)質(zhì)1015分鐘，兩種液態(tài)生物活性物質(zhì)混合時(shí)枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為25%，固態(tài)底物與混合后的液態(tài)生物活性物質(zhì)混合時(shí)，混合后的液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為95%，發(fā)酵溫度為45'C，發(fā)酵時(shí)間為16小時(shí)，在固態(tài)發(fā)酵結(jié)束前6小時(shí)加入海藻粉，海藻粉的加入量占固態(tài)底物總量的1%，發(fā)酵結(jié)束后物料在9(TC條件下烘干；步驟d:將步驟a、b制備的兩種液態(tài)生物活性物質(zhì)分別濃縮成干物量為35%的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)，兩種濃縮后的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)混合時(shí)，干物量為35%的枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為40%，混合后的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)的噴灑量占固態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)總量的0.8%。一種雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料，該生物添加劑預(yù)混合飼料是以上述制備的生物活性物質(zhì)為載體，制備1000g預(yù)混合飼料所需的原料為生物活性物質(zhì)載體257.0g、磷酸二氫鈣200.0g、碳酸鈣260.5g、維生素添加劑25.0g、胺基酸添加劑60.0g、礦物元素25.0g、酶制劑20.0g、霉菌毒素吸附劑12.5g、亞麻油酸120.0g、干物量為35%的枯草芽孢桿菌Tsao060607液態(tài)生物活性物質(zhì)3.2ml和干物量為35%的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)4.8ml。實(shí)施例8:本發(fā)明生物活性物質(zhì)載體的制備方法與實(shí)施例一基本相同，不同之處在于:步驟a:將豆?jié){以無(wú)菌水稀釋至濃度為6brix，稀釋的豆?jié){滅菌處理后取3800L放入發(fā)酵罐，取700L滅菌處理后的脫脂奶粉營(yíng)養(yǎng)源水溶液，加入后脫脂奶粉相對(duì)于豆?jié){的濃度為1.1%,發(fā)酵溫度為37"C，發(fā)酵時(shí)間為24小時(shí)，加入的分解酶為纖維分解酶和甘露聚醣酶的混合物，混合酶加入量占步驟c所采用的固態(tài)底物總量的0.05%;步驟b:先將豆?jié){以無(wú)菌水稀釋至濃度為5.5brix，稀釋的豆?jié){滅菌處理后取4200L放入發(fā)酵罐，取300L滅菌處理后的黃豆粉(內(nèi)含濃度為0.001%的菠蘿酵素，黃豆粉的粒度為全部通過(guò)4060目篩分析篩)、無(wú)水磷酸二鉀營(yíng)養(yǎng)源水溶液，加入后黃豆粉、無(wú)水磷酸二鉀相對(duì)于豆?jié){的濃度分別為0.6%、0.08%,發(fā)酵溫度為37"C，發(fā)酵時(shí)間為24小時(shí)，菠蘿酶的加入量占步驟c中所采用固態(tài)底物總量的0.008%，所述a-半乳糖苷酶的加入量占步驟c中所述固態(tài)底物總量的0.05%;步驟c中固態(tài)底物為去皮黃豆粕、黃豆粉、黃豆渣和米糠的混合物，將其固態(tài)底物以蒸氣調(diào)質(zhì)1015分鐘，兩種液態(tài)生物活性物質(zhì)混合時(shí)枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為30%，固態(tài)底物與混合后的液態(tài)生物活性物質(zhì)混合時(shí)，混合后的液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為30%，發(fā)酵溫度為37。C，發(fā)酵時(shí)間為24小時(shí)，在固態(tài)發(fā)酵結(jié)束前6小時(shí)加入海藻粉，海藻粉的加入量占固態(tài)底物總量的8%，發(fā)酵結(jié)束后物料在7(TC條件下烘干；步驟d:將步驟a、b制備的兩種液態(tài)生物活性物質(zhì)分別濃縮成干物量為30%的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)，兩種濃縮后的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)混合時(shí)，干物量為30。/。的枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為45%，混合后的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)的噴灑量占固態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)總量的1.2%。一種雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料，該生物添加劑預(yù)混合飼料是以上述制備的生物活性物質(zhì)為載體，制備1000g預(yù)混合飼料所需的原料為生物活性物質(zhì)載體397.0g、磷酸二氫鈣160.0g、碳酸鈣200.0g、維生素添加劑18.0g、胺基酸添加劑65.0g、礦物元素12.5g、酶制劑20.0g、霉菌毒素吸附劑12.5g、亞麻油酸95.0g、干物量為30%的枯草芽孢桿菌Tsao060607液態(tài)生物活性物質(zhì)4.2ml和干物量為30%的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)7.8ml。實(shí)施例9:本發(fā)明生物活性物質(zhì)載體的制備方法與實(shí)施例一相同。一種雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料，該生物添加劑預(yù)混合飼料是以上述制備的生物活性物質(zhì)為載體，制備1000g預(yù)混合飼料所需的原料為生物活性物質(zhì)載體262.5g、磷酸二氫鈣267.5g、碳酸鈣260.0g、維生素添加劑25.0g、胺基酸添加劑60.0g、礦物元素12.5g、酶制劑12.5g、亞麻油酸80.0g、干物量為25%的枯草芽孢桿菌Tsao060607液態(tài)生物活性物質(zhì)4.5ml和干物量為25%的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)5.5ml。實(shí)施例10:本發(fā)明生物活性物質(zhì)載體的制備方法與實(shí)施例四相同。一種雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料，該生物添加劑預(yù)混合飼料是以上述制備的生物活性物質(zhì)為載體，制備lOOOg預(yù)混合飼料所需的原料為生物活性物質(zhì)載體320.0g、磷酸二氫鈣215.0g、碳酸鈣242.5g、維生素添加劑25.0g、胺基酸添加劑60.0g、礦物元素12.5g、酶制劑15.0g、亞麻油酸90.0g、干物量為40%的枯草芽孢桿菌Tsao060607液態(tài)生物活性物質(zhì)12.0ml和干物量為40%的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)3.0ml。權(quán)利要求1、一種生物活性物質(zhì)載體的制備方法，其特征在于，所述生物活性物質(zhì)載體的制備方法包括以下步驟a、枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)的制備先將糖蜜或豆?jié){以無(wú)菌水稀釋至以巴林糖度計(jì)測(cè)量濃度為1～7brix，在100℃條件下、滅菌處理12～18分鐘后，取3500～4200L放入發(fā)酵罐，再將初期經(jīng)常規(guī)方法培養(yǎng)的枯草芽孢桿菌Tsao060605菌液500L倒入發(fā)酵罐，然后再把已在滅菌罐內(nèi)以1000L無(wú)菌水配制的濃度為7％的脫脂奶粉或5％的黃豆粉營(yíng)養(yǎng)源水溶液以100℃、12～18分鐘滅菌處理后，取300～1000L放入發(fā)酵罐，使所述脫脂奶粉或黃豆粉相對(duì)于糖蜜或豆?jié){其濃度分別為0.6～2.1％或0.4～1.5％，所述在滅菌罐內(nèi)以無(wú)菌水配制的5％的黃豆粉水溶液中含有濃度為0.001％的菠蘿酵素，綜合以上營(yíng)養(yǎng)源制備液態(tài)底物進(jìn)行發(fā)酵，在發(fā)酵罐中發(fā)酵溫度為27～55℃，發(fā)酵時(shí)間為10～48小時(shí)，在發(fā)酵終止時(shí)加入分解酶，其加入量為占步驟c中所述固態(tài)底物總量的0.01～0.5％，加入分解酶的同時(shí)，發(fā)酵罐夾套內(nèi)以冰水循環(huán)將發(fā)酵菌液溫度降至7～8℃即可；b、凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)的制備先將糖蜜或豆?jié){以無(wú)菌水稀釋至以巴林糖度計(jì)測(cè)量濃度為1.5～9brix，在100℃條件下、滅菌處理12～18分鐘后，取3500～4200L放入發(fā)酵罐，再將初期經(jīng)常規(guī)方法培養(yǎng)的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887菌液500L倒入發(fā)酵罐，再把已在滅菌罐內(nèi)以1000L無(wú)菌水配制的濃度為8％的脫脂奶粉或7％的黃豆粉和1％的無(wú)水磷酸二鉀營(yíng)養(yǎng)源水溶液，以100℃、12～18分鐘滅菌處理后取300～1000L放入發(fā)酵罐，使所述脫脂奶粉或黃豆粉和無(wú)水磷酸二鉀相對(duì)于糖蜜或豆?jié){其濃度分別為0.7～2.4％或0.6～2.1％和0.08～0.3％，所述在滅菌罐內(nèi)以無(wú)菌水配制的7％的黃豆粉水溶液中含有濃度為0.001％的菠蘿酵素，綜合以上營(yíng)養(yǎng)源制備液態(tài)底物進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)發(fā)酵溫度為37～42℃，發(fā)酵時(shí)間為18～48小時(shí)，發(fā)酵終止時(shí)加入菠蘿酶和α-半乳糖苷酶，所述菠蘿酶的加入量占步驟c中所述固態(tài)底物總量的0.0005～0.01％，所述α-半乳糖苷酶的加入量占步驟c中所述固態(tài)底物總量的0.005～0.05％，加入酶的同時(shí)，發(fā)酵罐夾套內(nèi)以冰水循環(huán)將發(fā)酵菌液溫度降至7～8℃即可；c、枯草芽孢桿菌Tsao060605和凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887固態(tài)生物活性物質(zhì)的制備先將固態(tài)底物以蒸氣調(diào)質(zhì)5～30分鐘，降溫至40～43℃，然后將步驟a制備的枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)和步驟b制備的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)混合均勻，混合時(shí)枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為10～30％，將處理后的固態(tài)底物與混合后的液態(tài)生物活性物質(zhì)進(jìn)行混合發(fā)酵，固態(tài)底物與混合后的液態(tài)生物活性物質(zhì)混合時(shí)，其中混合后的液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為25～95％，發(fā)酵時(shí)發(fā)酵溫度為30～55℃，發(fā)酵時(shí)間為12～72小時(shí)，在固態(tài)發(fā)酵結(jié)束前0～8小時(shí)加入海藻粉，所述海藻粉的加入量占固態(tài)底物總量的1～10％，發(fā)酵結(jié)束后將其物料在55～100℃的溫度下烘干，烘干至發(fā)酵底物水分含量≤7％，最后粉碎，得到固態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)；d、生物活性物質(zhì)載體的制備將步驟a、b制備的枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)和凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)分別濃縮成干物量為20～45％的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)，將兩種濃縮后的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)進(jìn)行混合，其中干物量為20～45％的枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為40～50％、干物量為20～45％的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)所占的重量百分含量為50～60％，將混合后的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)噴灑在步驟c中制備的固態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)上，所述混合后的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)噴灑量占固態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)總量的0.5～1.5％，噴灑后即得生物活性物質(zhì)載體。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物活性物質(zhì)載體的制備方法，其特征在于步驟a中所述初期經(jīng)常規(guī)方法培養(yǎng)的枯草芽孢桿菌Tsao060605菌液中菌數(shù)為2l.0xl08CFU/ml,酸堿值pH為5.86.5;所述發(fā)酵后枯草芽孢桿菌Tsao060605菌液中菌數(shù)為2L2xl07CFU/ml，酸堿值pH為5.86.5。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物活性物質(zhì)載體的制備方法，其特征在于步驟a中所述黃豆粉的粒度為全部通過(guò)4060目篩分析篩；所述分解酶為酸性蛋白分解酶、菠蘿酶、a-淀粉分解酶、纖維分解酶、半纖維分解酶、a-半乳糖苷酶、木聚醣酶、甘露聚醣酶中的至少一種。4、根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物活性物質(zhì)載體的制備方法，其特征在于步驟b中所述初期經(jīng)常規(guī)方法培養(yǎng)的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887菌液中菌數(shù)為2l.0xl08CFU/ml，酸堿值pH為4.65.8;發(fā)酵后凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887菌液中菌數(shù)為2l.2xl(^CFU/ml，酸堿值pH為4.35.8;所述黃豆粉的粒度為全部通過(guò)4060目篩分析篩。5、根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物活性物質(zhì)載體的制備方法，其特征在于步驟c中所述固態(tài)底物為去皮黃豆粕、黃豆粉、黃豆渣、去脂米糠、蠶豆粕、豌豆粕、棉籽粕、菜籽粕、小麥麩、大麥麩、啤酒糟、玉米酒糟、大米酒糟和玉米粉中的至少一種；所述物料粉碎后過(guò)2040目篩。6、一種雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料，其特征在于，所述生物添加劑預(yù)混合飼料是以權(quán)利要求1所制備的生物活性物質(zhì)為載體，制備1000g雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料所需的原料為生物活性物質(zhì)載體242.0g397.0g、磷酸二氫鈣160.0g267.5g、碳酸鈣200.0g280.0g、維生素添加劑12.5g30.5g、胺基酸添加劑60.0g72.5g、礦物元素12.5g25.0g、酶制劑12.5g20.0g、亞麻油酸80.0g125.0g、干物量為2045%的枯草芽孢桿菌Tsao060607液態(tài)生物活性物質(zhì)1.0ml12.0ml和干物量為2045%的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)3.0ml7.8ml。7、根據(jù)權(quán)利要求6所述的雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料，其特征在于所述制備1000g雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料還需加入霉菌毒素吸附劑12.5g。8、根據(jù)權(quán)利要求6所述的雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料，其特征在于所述生物活性物質(zhì)載體中枯草芽孢桿菌Tsao060605的含量為1.0x1053.0xl01()CFU/kg，凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887的含量為1.0xl()65.0xloHCFU/kg;所述雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料中枯草芽孢桿菌Tsao060605的含量為1.0xl042.0xl01GCFU/kg，凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887的含量為1.0xl052.0xlO"CFU/kg。9、根據(jù)權(quán)利要求6所述的雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料，其特征在于所述干物量為2045%的枯草芽孢桿菌Tsao06065液態(tài)生物活性物質(zhì)是將權(quán)利要求1步驟a中制備的枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)按照常規(guī)方法濃縮而成的；所述干物量為2045%的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)是將權(quán)利要求1步驟b中制備的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)按照常規(guī)方法濃縮而成的。10、根據(jù)權(quán)利要求6所述的雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料，其特征在于所述維生素添加劑、胺基酸添加劑、礦物元素、酶制劑和霉菌毒素吸附劑均為市場(chǎng)上銷售的國(guó)家規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)品。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了一種雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料及其生物活性物質(zhì)載體的制備方法。該雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料中含有生物活性物質(zhì)載體、磷酸二氫鈣、碳酸鈣、維生素添加劑、胺基酸添加劑、礦物元素、酶制劑、霉菌毒素吸附劑、亞麻油酸、干物量為20～45％的枯草芽孢桿菌Tsao060605液態(tài)生物活性物質(zhì)和干物量為20～45％的凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887液態(tài)生物活性物質(zhì)。其中生物活性物質(zhì)載體是由枯草芽孢桿菌Tsao060605和凝結(jié)芽孢桿菌Leehai887的液態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)與固態(tài)發(fā)酵生物活性物質(zhì)，并添加海藻粉制備而成的。利用本發(fā)明技術(shù)制備的雞專用生物添加劑預(yù)混合飼料成本低，并且是一種喂飼雞的綠色飼料，無(wú)副作用、無(wú)殘留、無(wú)抗藥性且無(wú)毒的新型飼料。文檔編號(hào)A23K1/18GK101642198SQ20091006592公開(kāi)日2010年2月10日申請(qǐng)日期2009年8月25日優(yōu)先權(quán)日2009年8月25日發(fā)明者周俊吉,曹君平,陳炎祥申請(qǐng)人:曹君平;周冬根