本發(fā)明涉及中藥材有效成分含量檢測前處理，具體涉及一種總黃酮檢測穩(wěn)定性更高的砂仁藥材前處理方法。

背景技術：

1、砂仁為姜科植物陽春砂amomum?villosum?lour.、綠殼砂amomum?villosumlour.var.xanthioides?t.l.wu?et?senjen或海南砂amomum?longiligulare?t.l.wu的干燥成熟果實。根據產地不同可分為中國廣東省的陽春砂，西雙版納、云南的綠殼砂、海南砂。砂仁作為藥食同源的中藥材，具有較高的藥用和食用價值；現(xiàn)代研究證明，砂仁總黃酮具有抑菌、抗氧化、抗腫瘤等多種活性，在食品、藥品、功能性保健品中有良好的應用前景和開發(fā)價值。

2、《不同產地陽春砂總酚與總黃酮測定及抗氧化活性研究》論文公布了一種砂仁藥材總黃酮檢測前處理方法，砂仁藥材進行粉碎、超聲(甲醇)、定容、濾過，即得供試品溶液。供試品溶液采用硝酸鋁絡合分光光度法進行顯色后，需對顯色液進行離心處理，說明供試品溶液中存在對顯色過程存在干擾的雜質。

3、《砂仁中黃酮類化合物的提取及其生物活性研究》論文公布了一種砂仁藥材總黃酮檢測前處理方法，砂仁藥材進行烘干、粉碎、乙醇微波超聲萃取提取-濃縮-提取液，即得供試品溶液。供試品溶液采用硝酸鋁絡合分光光度法進行顯色與檢測，但提取設備采購成本高，操作復雜，單次僅處理一個樣品。

4、《春砂仁總黃酮提取物的抗氧化性及抑菌性研究》論文公布了一種砂仁藥材總黃酮檢測前處理方法，砂仁藥材洗凈、烘干、粉碎、超聲(乙醇)、濃縮、有機溶劑脫脂，即得供試品溶液。供試品溶液采用硝酸鋁絡合分光光度法進行顯色與檢測，本方法中藥材先提取再脫脂，所用脫脂有機溶劑使用量大。

5、硝酸鋁絡合分光光度法操作簡單、快速，廣泛應用于中藥材總黃酮的檢測，但硝酸鋁絡合分光光度法檢測的穩(wěn)定性受藥材前處理工藝影響較大，主要原因為藥材成分豐富且復雜，各組分含量占比均不大，若藥材前處理不徹底，易出現(xiàn)其他組分對總黃酮檢測結果產生干擾的情況，影響檢測結果的穩(wěn)定性。

6、不同產地品種砂仁藥材所含活性成分種類及含量均存在顯著差別，根據功能需求(活性成分選擇)，因地選藥，因材選藥，才能真正實現(xiàn)中藥材價值最大化。砂仁藥材活性成分豐富、復雜且含量均不高，采用現(xiàn)有文獻報道的方法對砂仁藥材進行前處理，除有機溶劑使用量大、操作復雜外，出現(xiàn)對總黃酮檢測結果具有干擾性(顯色反應過程出現(xiàn)絮狀或者紅色顆粒)的現(xiàn)象，導致砂仁藥材總黃酮含量檢測結果偏高、穩(wěn)定性不佳；如何進一步保障砂仁藥材總黃酮檢測的穩(wěn)定性，為砂仁道地藥材的選用提供檢測技術支持，是亟待解決的問題。

技術實現(xiàn)思路

1、有鑒于此，本發(fā)明提出了一種總黃酮檢測穩(wěn)定性更高的砂仁藥材前處理方法，旨在解決上述技術問題，從而保障砂仁藥材總黃酮檢測結果的可靠性。

2、本發(fā)明的技術方案是這樣實現(xiàn)的：本發(fā)明提供了一種總黃酮檢測可靠性更高的砂仁藥材前處理方法，包括如下步驟：

3、步驟一、將砂仁藥材放入烘箱內烘干，超微粉碎后取篩下物；

4、步驟二、將篩下物放入脫脂濾紙包內，置索氏提取管中，提取瓶內加入低沸點有機溶劑，加熱回流提取至提取液無色，棄去有機溶劑溶液，藥渣包揮去有機溶劑；

5、步驟三、用40-95％乙醇提取藥渣包1-3次，每次4-8h，合并提取液；

6、步驟四、用40-95％乙醇洗滌提取溶液，洗滌液與步驟三提取液合并，加40-95％乙醇定容。

7、在一些實施方式中，步驟一中，藥材烘干溫度為30-55℃，烘干時間為5-8h，過篩目數為30-80目。

8、在一些實施方式中，步驟二中，脫脂用低沸點有機溶劑為三氯甲烷、無水乙醚和石油醚(60-90℃)中的一種。

9、在一些實施方式中，步驟二中，低沸點有機溶劑的用量為篩下物的70-90倍。

10、在一些實施方式中，步驟三中，提取方式為水浴抽提法或索式抽提法。

11、在一些實施方式中，步驟三中，單次提取所用溶媒為篩下物的40-60倍。

12、在一些實施方式中，步驟三中，提取溫度為85-95℃。

13、在一些實施方式中，步驟四中，定容體積為篩下物的50-150倍。

14、本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術具有以下有益效果：

15、本發(fā)明根據砂仁藥材成分類別，對藥材進行脫脂處理，去除脂類、揮發(fā)油等組分，再利用多糖、蛋白質等組分不溶于高度醇的特性，用抽提的方式讓純的高度醇不斷對砂仁藥材進行充分提取，既實現(xiàn)了總黃酮的完全提取，又避免了揮發(fā)油、脂類、多糖、蛋白質等雜質組分對總黃酮檢測結果的干擾，從而解決了顯色過程出現(xiàn)絮狀或紅色顆粒等，對檢測結果造成干擾的問題。顯著提高了砂仁藥材總黃酮檢測結果的穩(wěn)定性。

16、而且本發(fā)明的整體工藝操作比較簡單，提取設備常見，多個樣品可以同時進行處理，適用于不同產地、品種砂仁藥材的總黃酮含量的對比檢測。

技術特征：

1.一種總黃酮檢測穩(wěn)定性更高的砂仁藥材前處理方法，其特征在于，包括如下步驟：

2.如權利要求1所述的總黃酮檢測穩(wěn)定性更高的砂仁藥材前處理方法，其特征在于：步驟一中，藥材烘干溫度為30-55℃，烘干時間為5-8h，過篩目數為30-80目。

3.如權利要求1所述的總黃酮檢測穩(wěn)定性更高的砂仁藥材前處理方法，其特征在于，步驟二中，脫脂用低沸點有機溶劑為三氯甲烷、無水乙醚和石油醚(60-90℃)中的一種。

4.如權利要求1所述的總黃酮檢測穩(wěn)定性更高的砂仁藥材前處理方法，其特征在于，步驟二中，低沸點有機溶劑的用量為篩下物的70-90倍。

5.如權利要求1所述的總黃酮檢測穩(wěn)定性更高的砂仁藥材前處理方法，其特征在于，步驟三中，提取方式為水浴抽提法或索式抽提法。

6.如權利要求1所述的總黃酮檢測穩(wěn)定性更高的砂仁藥材前處理方法，其特征在于，步驟三中，單次提取所用溶媒為篩下物的40-60倍。

7.如權利要求1所述的總黃酮檢測穩(wěn)定性更高的砂仁藥材前處理方法，其特征在于，步驟三中，提取溫度為85-95℃。

8.如權利要求1所述的總黃酮檢測穩(wěn)定性更高的砂仁藥材前處理方法，其特征在于，步驟四中，定容體積為篩下物的50-150倍。

技術總結
本發(fā)明涉及藥材前處理技術領域，具體提出了一種總黃酮檢測穩(wěn)定性更高的砂仁藥材前處理方法。所述處理方法包括，將砂仁藥材進行粉碎、脫脂、抽提、定容，該方法通過除雜、定向提取，能夠有效降低雜質組分對總黃酮檢測結果的干擾，使檢測結果更準確、穩(wěn)定，適用于砂仁藥材總黃酮檢測前處理。

技術研發(fā)人員：彭婷,王玉,陳陽,陳存,胡佑彪,陳志元,楊強,馬闖
受保護的技術使用者：勁牌有限公司
技術研發(fā)日：
技術公布日：2024/10/21