本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)檢測，尤其涉及一種普通免疫比濁法中的抗血清保護(hù)液制備方法及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、目前人體中已發(fā)現(xiàn)的血漿蛋白有1000種以上，各自執(zhí)行著不同功能，在研究中的約有500種，分離成純品的約有200種，在臨床上已應(yīng)用的約有50種左右。這些特定蛋白在許多病理?xiàng)l件下會(huì)發(fā)生相應(yīng)的變化，因此對其進(jìn)行定量檢測，可以為臨床診斷，判斷療效，分析預(yù)后提供重要的依據(jù)。因?yàn)檫@些蛋白都具有“某一特定抗原性”，多采用免疫方法對其進(jìn)行檢測。免疫比濁法(turbidimetric?inhibition?immuno?assay)是將液相內(nèi)的沉淀反應(yīng)與光學(xué)儀器和自動(dòng)分析技術(shù)相結(jié)合的一種分析技術(shù)。其基本原理是：當(dāng)抗原與抗體在特殊稀釋系統(tǒng)中反應(yīng)而且比例合適(一般規(guī)定抗體過量)時(shí)，形成的可溶性免疫復(fù)合物在稀釋系統(tǒng)中的促聚劑(聚乙二醇等)的作用下，自液相析出，形成微粒，使反應(yīng)液出現(xiàn)濁度。當(dāng)抗體濃度固定時(shí)，形成的免疫復(fù)合物的量隨著檢樣中抗原量的增加而增加，反應(yīng)液的濁度也隨之增加。通過測定反應(yīng)液的濁度與一系列標(biāo)準(zhǔn)品對照，即可計(jì)算出檢樣中抗原的含量。

2、目前，關(guān)于普通免疫比濁試劑及其制備方法的專利有：專利號(hào)為cn113985029a的一種適用于提升免疫比濁試劑穩(wěn)定性的組合物，是通過在免疫比濁試劑r2中添加特定的糖類、氨基酸、醇類以及表面活性劑組合，可以提高抗體在試劑r2中的穩(wěn)定性，進(jìn)而顯著提升試劑的穩(wěn)定性(包括熱穩(wěn)定性以及開瓶穩(wěn)定性)，延長試劑的使用時(shí)間，此專利的糖醇類物質(zhì)加入占比約為15％～20％，容易滋生細(xì)菌，造成試劑變質(zhì)。專利號(hào)為cn116577513a的一種長期穩(wěn)定的免疫比濁試劑及其制備方法，此專利提供一種長期穩(wěn)定的免疫比濁試劑，加入抗血清后需在2℃～8℃的條件下靜置3-10天，生產(chǎn)過程時(shí)間長。專利號(hào)為cn112240931a的一種免疫比濁試劑盒，此專利通過添加表面活性劑使試劑低值變異系數(shù)小，并提高試劑靈敏度，未解決試劑長期存儲(chǔ)后產(chǎn)生沉淀的問題。

3、綜上所述，現(xiàn)有的大部分試劑基本上都存在一些不足，不能滿足臨床應(yīng)用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于提供一種普通免疫比濁法中的抗血清保護(hù)液制備方法及其應(yīng)用，解決了現(xiàn)有的大部分試劑基本上都存在一些不足，不能滿足臨床應(yīng)用的問題。

2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種普通免疫比濁法中的抗血清保護(hù)液制備方法，包括以下步驟：

3、在設(shè)定溫度下，取配制量的純化水；

4、在純化水中依次加入設(shè)定量的tris緩沖液、氯化鈉、一水檸檬酸、抗沉聚劑、proclin?300，并攪拌至完全溶解；

5、調(diào)節(jié)溶解后的溶液ph值至設(shè)定值，獲得一種普通免疫比濁法中的抗血清保護(hù)液。

6、其中，在設(shè)定溫度下，取配制量的純化水，所述步驟還包括：

7、在18℃～28℃的條件下，取配制量50％的純化水。

8、其中，在純化水中依次加入設(shè)定量的tris緩沖液、氯化鈉、一水檸檬酸、抗沉聚劑、proclin?300，并攪拌至完全溶解，所述步驟還包括：

9、在純化水中依次加入tris緩沖液0.02～0.05mol/l、0.9％氯化鈉、0.02％～0.2％一水檸檬酸、0.1％～5％抗沉聚劑、0.1％proclin?300，攪拌至完全溶解。

10、其中，tris緩沖液采用三羥甲基氨基甲烷或三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽中的任意一種。

11、其中，抗沉聚劑采用藻酸、卡拉膠、阿拉伯膠、黃原膠或果膠中的任意一種或兩種。

12、其中，調(diào)節(jié)溶解后的溶液ph值至設(shè)定值，獲得一種普通免疫比濁法中的抗血清保護(hù)液，所述步驟還包括：

13、調(diào)節(jié)溶解后的溶液ph值至7.6～8.3。

14、一種由所述的普通免疫比濁法中的抗血清保護(hù)液制備方法制備得到的一種普通免疫比濁法中的抗血清保護(hù)液。

15、其中，所述的一種普通免疫比濁法中的抗血清保護(hù)液在羊多克隆抗血清或兔多克隆抗血清的應(yīng)用。

16、本發(fā)明的一種普通免疫比濁法中的抗血清保護(hù)液制備方法及其應(yīng)用，在18℃～28℃的條件下，取配制量50％的純化水；依次加入tris緩沖液0.02mol/l、氯化鈉0.9％、一水檸檬酸0.05％、抗沉聚劑3％、proclin?3000.1％，攪拌至完全溶解，調(diào)節(jié)ph值至7.6～8.3；最終制得一種普通免疫比濁法中的抗血清保護(hù)液。選用的抗沉聚劑集保護(hù)劑、乳化劑與一體，可使體系蛋白穩(wěn)定，使其不易絮凝和聚結(jié)；采用抗血清保護(hù)液制備的普通免疫比濁法試劑運(yùn)輸后和長期存儲(chǔ)后不產(chǎn)生明顯沉淀；提供的抗血清保護(hù)液可廣泛用于各種羊多克隆抗血清或兔多克隆抗血清普通免疫比濁法試劑的制備，具有更廣泛的通用性，應(yīng)用過程中經(jīng)過加速穩(wěn)定步驟，加快試劑穩(wěn)定進(jìn)程，縮短試劑穩(wěn)定時(shí)間，解決了現(xiàn)有的大部分試劑基本上都存在一些不足，不能滿足臨床應(yīng)用的問題，經(jīng)濟(jì)環(huán)保、操作簡便，檢測準(zhǔn)確。

技術(shù)特征：

1.一種普通免疫比濁法中的抗血清保護(hù)液制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

2.如權(quán)利要求1所述的普通免疫比濁法中的抗血清保護(hù)液制備方法，其特征在于，在設(shè)定溫度下，取配制量的純化水，所述步驟還包括：

3.如權(quán)利要求1所述的普通免疫比濁法中的抗血清保護(hù)液制備方法，其特征在于，在純化水中依次加入設(shè)定量的tris緩沖液、氯化鈉、一水檸檬酸、抗沉聚劑、proclin?300，并攪拌至完全溶解，所述步驟還包括：

4.如權(quán)利要求3所述的普通免疫比濁法中的抗血清保護(hù)液制備方法，其特征在于，

5.如權(quán)利要求3所述的普通免疫比濁法中的抗血清保護(hù)液制備方法，其特征在于，

6.如權(quán)利要求1所述的普通免疫比濁法中的抗血清保護(hù)液制備方法，其特征在于，調(diào)節(jié)溶解后的溶液ph值至設(shè)定值，獲得一種普通免疫比濁法中的抗血清保護(hù)液，所述步驟還包括：

7.一種由權(quán)利要求1至權(quán)利要求6任一項(xiàng)所述的普通免疫比濁法中的抗血清保護(hù)液制備方法制備得到的一種普通免疫比濁法中的抗血清保護(hù)液。

8.如權(quán)利要求7所述的一種普通免疫比濁法中的抗血清保護(hù)液在羊多克隆抗血清或兔多克隆抗血清的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種普通免疫比濁法中的抗血清保護(hù)液制備方法及其應(yīng)用，18℃～28℃的條件下，取配制量50％的純化水；依次加入Tris緩沖液0.02mol/L、氯化鈉0.9％、一水檸檬酸0.05％、抗沉聚劑3％、Proclin?3000.1％，攪拌至完全溶解，調(diào)節(jié)pH值至7.6～8.3；最終制得一種普通免疫比濁法中的抗血清保護(hù)液。選用的抗沉聚劑集保護(hù)劑、乳化劑與一體，可使體系蛋白穩(wěn)定，使其不易絮凝和聚結(jié)；采用抗血清保護(hù)液制備的普通免疫比濁法試劑運(yùn)輸后和長期存儲(chǔ)后不產(chǎn)生明顯沉淀；解決了現(xiàn)有的大部分試劑基本上都存在一些不足，不能滿足臨床應(yīng)用的問題，經(jīng)濟(jì)環(huán)保、操作簡便，檢測準(zhǔn)確。

技術(shù)研發(fā)人員：覃肖珍,趙麗珍,吳樂清,韋迎春,蘇鈺清
受保護(hù)的技術(shù)使用者：桂林優(yōu)利特醫(yī)療電子有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/10/21