青霉素類抗生素的外觀評(píng)定方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種青霉素類抗生素的外觀評(píng)定方法，通過分光光度法確定某種青霉素類抗生素的外觀標(biāo)準(zhǔn)，再通過其它批次該種青霉素類抗生素溶液的吸光度與所確定的外觀標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較來評(píng)定所測(cè)批次的該種青霉素類抗生素產(chǎn)品外觀是否合格。該方法代替了青霉素類抗生素外觀的肉眼觀察法，使外觀的標(biāo)準(zhǔn)可量化，易于控制，客觀、準(zhǔn)確，不隨時(shí)間、地點(diǎn)、人員的改變而發(fā)生變化。本發(fā)明在工業(yè)生產(chǎn)的推廣應(yīng)用中具有低成本、高精確、高效率的特點(diǎn)。
【專利說明】青霉素類抗生素的外觀評(píng)定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及藥物質(zhì)量控制領(lǐng)域，尤其是指青霉素類抗生素的外觀評(píng)定方法。
【背景技術(shù)】
[0002]藥品的外觀顏色是藥品內(nèi)在質(zhì)量的一個(gè)客觀表征，其與規(guī)定顏色的差異能在一定程度上反映藥物的純度。各國藥典都將藥品顏色或者藥品溶液的顏色作為藥品質(zhì)量控制的一個(gè)重要檢查項(xiàng)目。
[0003]青霉素類抗生素是一種含有β -內(nèi)酰胺環(huán)的抗生素，結(jié)構(gòu)如式I所示。在pH為4左右的環(huán)境中，青霉素類抗生素分子內(nèi)的β-內(nèi)酰胺環(huán)會(huì)發(fā)生分子重排，生成青霉烯酸(penicillenic acid),其結(jié)構(gòu)如式II所示。青霉烯酸具有B,惡唑酮結(jié)構(gòu),容易吸潮而導(dǎo)致發(fā)黃變質(zhì)，青霉素類抗生素中混有青霉烯酸就會(huì)引起青霉素類抗生素產(chǎn)品外觀顏色的改變。
[0004]
HWU5,1
—Xk
COOR1
[0005]青霉素母核6-APA雖然沒有α氨基，但是研究過程中發(fā)現(xiàn)也存在這樣的現(xiàn)象。
[0006]目前，對(duì)上述青霉素類抗生素的外觀質(zhì)量控制，一般都采用人工目視法，即通過目視法直接肉眼觀察并判定，顏色為白色的青霉素類抗生素是合格產(chǎn)品，而顏色為類白色或黃色的青霉素類抗生素則為不合格產(chǎn)品。但是對(duì)于白色和類白色的界定很難，不同的人有不同的標(biāo)準(zhǔn)，主觀影響因素太大。通過人工目視法來判定藥品的質(zhì)量的方法不夠客觀科學(xué)；工人在長(zhǎng)期查看顏色的情況下，也容易產(chǎn)生視覺疲勞，從而加大了誤判的可能性。
[0007]因此，尋找一種客觀、準(zhǔn)確的青霉素類抗生素的外觀評(píng)定方法是十分必要的。
[0008]紫外-可見吸收光譜法的定量依據(jù)為L(zhǎng)amber-Beer定律。Lamber-Beer定律適用于任何均勻、非散射的固體、液體或氣體介質(zhì)。溶液對(duì)光的吸收程度，與溶液濃度、液層厚度及入射光波長(zhǎng)等因素有關(guān)。如果保持入射光波長(zhǎng)不變，則溶液對(duì)光的吸收程度只與溶液濃度和液層厚度有關(guān)，而液層厚度在紫外-可見光掃描色譜儀中是固定不變的，因此，溶液對(duì)光的吸收程度只與溶液濃度有關(guān)。因?yàn)榍嗝瓜┧岬奈舛纫哂谇嗝顾仡惪股氐奈舛?，所以，選用同樣的入射光波長(zhǎng)來檢測(cè)不同溶液的吸光度時(shí)，溶液中青霉烯酸的含量越高，溶液的吸光度越大；青霉烯酸的含量越大，該青霉素類抗生素的外觀顏色越接近于黃色。因此，本發(fā)明的使用原理如下:
[0009]青霉素類抗生素顏色α青霉烯酸濃度318nm-342nm處吸光度。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0010]本發(fā)明需要解決的技術(shù)問題是提供一種客觀的、準(zhǔn)確的青霉素類抗生素的外觀評(píng)定方法。
[0011]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案如下:
[0012]青霉素類抗生素的外觀評(píng)定方法，針對(duì)任意一種青霉素類抗生素，包括以下步驟:
[0013]A.取目測(cè)外觀為白色、類白色和黃色的該種青霉素類抗生素各一份，分別配制成相同濃度的定波溶液，以水為空白對(duì)照對(duì)三份定波溶液進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，確定檢測(cè)該種青霉素類抗生素溶液用的入射光波長(zhǎng)；
[0014]B.取不少于三個(gè)批次的目測(cè)為白色的該種青霉素類抗生素，分別配制成相同濃度的定標(biāo)溶液，以水為空白對(duì)照組，以步驟A確定的檢測(cè)波長(zhǎng)，用分光光度法測(cè)定每份定標(biāo)溶液的吸光度；
[0015]C.計(jì)算所測(cè)定標(biāo)溶液吸光度的平均值，所得平均值保留小數(shù)點(diǎn)后三位，將小數(shù)點(diǎn)后第三位數(shù)值取零，所得數(shù)值作為該種青霉素類抗生素的外觀標(biāo)準(zhǔn)；
[0016]D.取任意批次的該種青霉素類抗生素，配制成待測(cè)溶液，以水為空白對(duì)照組，以步驟A確定的檢測(cè)波長(zhǎng)，用分光光度法測(cè)定待測(cè)溶液的吸光度，若待測(cè)溶液的吸光度大于步驟C中所確定的外觀標(biāo)準(zhǔn)，則所測(cè)批次的該種青霉素類抗生素外觀不合格；若待測(cè)溶液的吸光度小于等于步驟C中所確定的外觀標(biāo)準(zhǔn)，則所測(cè)批次的該種青霉素類抗生素外觀合格。
[0017]本發(fā)明所述青霉素類抗生素為6-APA、氨芐西林、阿莫西林、阿撲西林、阿帕西林、苯唑西林、氯唑西林、雙氯西林、氟氯西林、甲氧西林、萘夫西林、阿洛西林、美洛西林、哌拉西林、呋布西林、羧芐西林、卡茚西林、替卡西林、替卡西林二鈉、替莫西林、磺芐西林、巴氨西林、匹氨西林、酞氨西林、侖氨西林、海他西林、美西林、匹美西林、巴美西林、青霉素V鉀、非奈西林、左普皮西林、丙匹西林、異丙西林、阿度西林、環(huán)己西林、非布西林、喹那西林、依匹西林、美坦西林、沙匹西林、沙莫西林、呋洛西林、吡芐西林、苯明青霉素、普唑西林、匹氨西林中的任意一種。
[0018]本發(fā)明所述定波溶液、定標(biāo)溶液和待測(cè)溶液所用的溶劑是相同的，所述溶劑是堿液、堿性緩沖液或水中的一種；所述定波溶液、定標(biāo)溶液和待測(cè)溶液的濃度是相同的，為0.lg/ml ?0.35g/ml，優(yōu)選 0.lg/ml ?0.13g/ml。。
[0019]本發(fā)明所述堿液是有機(jī)堿和/或無機(jī)堿溶液。
[0020]本發(fā)明所述有機(jī)堿是甲胺、脲、乙胺、乙醇胺、乙二胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、丙胺、異丙胺、1，3-丙二胺、1，2-丙二胺、三丙胺、三乙醇胺、丁胺、異丁胺、叔丁胺、己胺、辛胺、芐胺、環(huán)己胺、吡啶、六甲基四胺、鄰甲苯胺、間甲苯胺、對(duì)甲苯胺中的任意一種或幾種，所述無機(jī)堿溶液是氨水、氫氧化鈉溶液、碳酸鈉溶液、碳酸氫鈉溶液中的任意一種或幾種。
[0021]本發(fā)明所述堿性緩沖溶液是磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液、磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液、磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖液、磷酸二氫鉀-氫氧化鈉緩沖液、巴比妥鈉-鹽酸緩沖液、Tris-鹽酸緩沖液、硼酸-硼砂緩沖液、硼酸-硼砂緩沖液、甘氨酸-氫氧化鈉緩沖液、硼砂-氫氧化鈉緩沖液、碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液中的任意一種或幾種。
[0022]本發(fā)明所述步驟A中的檢測(cè)波長(zhǎng)為318nm?342nm，優(yōu)選323nm?329nm。
[0023]本發(fā)明所述步驟B和步驟D中的定標(biāo)溶液和待測(cè)溶液的吸光度測(cè)定在溶液配制完成后的15分鐘內(nèi)完成；定標(biāo)溶液和待測(cè)溶液的測(cè)定溫度為0°C?30°C。
[0024]由于采用了上述技術(shù)方案，本發(fā)明取得的技術(shù)進(jìn)步如下:
[0025]本發(fā)明通過分光光度法測(cè)定目測(cè)為白色的任意一種青霉素類抗生素溶液的吸光度，確立該種青霉素類抗生素的外觀標(biāo)準(zhǔn)；再通過其它批次的該種青霉素類抗生素溶液的吸光度與所確定的外觀標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較來評(píng)定所測(cè)批次的該種青霉素類抗生素產(chǎn)品外觀是否合格。該方法代替了傳統(tǒng)的青霉素類抗生素外觀的肉眼觀察法，使外觀的標(biāo)準(zhǔn)可量化，易于控制，客觀、準(zhǔn)確，不隨時(shí)間、地點(diǎn)、人員的改變而發(fā)生變化。本發(fā)明在工業(yè)生產(chǎn)的推廣應(yīng)用中具有低成本、高精確、高效率的特點(diǎn)。
[0026]本發(fā)明中的溶劑選用堿液、堿性緩沖液或水，杜絕了青霉素類抗生素在酸性條件下的降解，從而避免了降解產(chǎn)物青霉烯酸對(duì)溶液吸光度的影響，使得檢測(cè)結(jié)果更加客觀、準(zhǔn)確。本發(fā)明通過對(duì)青霉素類抗生素溶液進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描實(shí)驗(yàn)來確定檢測(cè)波長(zhǎng)，在檢測(cè)波長(zhǎng)下青霉烯酸的出峰最大化，增加了檢測(cè)的準(zhǔn)確性。318nm?342nm為檢測(cè)青霉素類抗生素溶液吸光度的通用波長(zhǎng)。本發(fā)明中對(duì)青霉素類抗生素溶液的吸光度測(cè)定控制在溶液配制完成后的15分鐘內(nèi)完成，這樣就能有效避免由于溶液放置時(shí)間過長(zhǎng)而出現(xiàn)的青霉素類抗生素降解、生成青霉烯酸的副反應(yīng)，避免在測(cè)試過程中使溶液的吸光度值產(chǎn)生誤差。待測(cè)溶液的溫度控制在0°C?30°C，優(yōu)選10°C?25°C，能夠有效避免溶液溫度過高而導(dǎo)致青霉素類抗生素的降解；而且溶液溫度接近于室溫，操作簡(jiǎn)單方便。
【具體實(shí)施方式】
[0027]下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作更進(jìn)一步詳細(xì)說明，但是本發(fā)明并不僅限于下述實(shí)施例。
[0028]下列實(shí)施例中所使用的儀器型號(hào)為島津紫外可見分光光度計(jì)UV2550 ;所使用的青霉素類抗生素均由華北制藥集團(tuán)有限責(zé)任公司生產(chǎn)。
[0029]青霉素類抗生素的外觀評(píng)定方法，針對(duì)任意一種青霉素類抗生素，包括以下步驟:
[0030]A.取目測(cè)外觀為白色、類白色和黃色的一種青霉素類抗生素各一份，分別配制成相同濃度的定波溶液，以水為空白對(duì)照對(duì)三份定波溶液進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，確定檢測(cè)該種青霉素類抗生素溶液用的入射光波長(zhǎng)；
[0031]B.取不少于三個(gè)批次的目測(cè)為白色的該種青霉素類抗生素，分別配制成相同濃度的定標(biāo)溶液，以水為空白對(duì)照組，以步驟A確定的檢測(cè)波長(zhǎng)，用分光光度法測(cè)定每份定標(biāo)溶液的吸光度；
[0032]C.計(jì)算步驟B中所有定標(biāo)溶液吸光度的平均值，所得平均值保留小數(shù)點(diǎn)后三位，將小數(shù)點(diǎn)后第三位數(shù)值取零，所得數(shù)值作為該種青霉素類抗生素的外觀標(biāo)準(zhǔn)；
[0033]D.取任意批次的該種青霉素類抗生素，配制成待測(cè)溶液，以水為空白對(duì)照組，以步驟A確定的檢測(cè)波長(zhǎng)，用分光光度法測(cè)定待測(cè)溶液的吸光度，若待測(cè)溶液的吸光度大于步驟C中所確定的外觀標(biāo)準(zhǔn)，則所測(cè)批次的該種青霉素類抗生素外觀不合格；若待測(cè)溶液的吸光度小于等于步驟C中所確定的外觀標(biāo)準(zhǔn)，則所測(cè)批次的該種青霉素類抗生素外觀合格。
[0034]本發(fā)明所述青霉素類抗生素包括6-APA、氨芐西林、阿莫西林、阿撲西林、阿帕西林、苯唑西林、氯唑西林、雙氯西林、氟氯西林、甲氧西林、萘夫西林、阿洛西林、美洛西林、哌拉西林、呋布西林、羧芐西林、卡茚西林、替卡西林、替卡西林二鈉、替莫西林、磺芐西林、巴氨西林、匹氨西林、酞氨西林、侖氨西林、海他西林、美西林、匹美西林、巴美西林、青霉素V鉀、非奈西林、左普皮西林、丙匹西林、異丙西林、阿度西林、環(huán)己西林、非布西林、喹那西林、依匹西林、美坦西林、沙匹西林、沙莫西林、呋洛西林、吡芐西林、苯明青霉素、普唑西林、匹氨西林。
[0035]本發(fā)明所述定波溶液、定標(biāo)溶液和待測(cè)溶液所用的溶劑是相同的，所述溶劑是堿液、堿性緩沖液或水中的一種；所述定波溶液、定標(biāo)溶液和待測(cè)溶液的濃度是相同的，均取0.lg/ml?0.35g/ml范圍中的任一數(shù)值,并優(yōu)選0.lg/ml?0.13g/ml范圍中的任一數(shù)值。
[0036]所述堿液是有機(jī)堿和/或無機(jī)堿溶液，有機(jī)堿是甲胺、脲、乙胺、乙醇胺、乙二胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、丙胺、異丙胺、1，3-丙二胺、1，2-丙二胺、三丙胺、三乙醇胺、丁胺、異丁胺、叔丁胺、己胺、辛胺、芐胺、環(huán)己胺、吡唆、六甲基四胺、鄰甲苯胺、間甲苯胺、對(duì)甲苯胺中的任意一種或幾種，所述無機(jī)堿溶液是氨水、氫氧化鈉溶液、碳酸鈉溶液、碳酸氫鈉溶液中的任意一種或幾種的混合。
[0037]所述堿性緩沖溶液是磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液、磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液、磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖液、磷酸二氫鉀-氫氧化鈉緩沖液、巴比妥鈉-鹽酸緩沖液、Tris-鹽酸緩沖液、硼酸-硼砂緩沖液、硼酸-硼砂緩沖液、甘氨酸-氫氧化鈉緩沖液、硼砂-氫氧化鈉緩沖液、碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液中的任意一種或幾種的混合。
[0038]本發(fā)明所述步驟A中的檢測(cè)波長(zhǎng)為318nm?342nm,優(yōu)選323nm?329nm。
[0039]本發(fā)明所述步驟B和步驟D中的定標(biāo)溶液和待測(cè)溶液的吸光度測(cè)定在溶液配制完成后的15分鐘內(nèi)完成，優(yōu)選在溶液配制完成后10分鐘內(nèi)完成；定標(biāo)溶液和待測(cè)溶液的測(cè)定溫度為0°C?30°C，優(yōu)選10°C?25°C。
[0040]實(shí)施例1
[0041]氨芐西林的外觀評(píng)定方法，包括以下步驟:
[0042]A.取目測(cè)外觀為白色、類白色和黃色的氨芐西林各I份，每份藥品取1.7g，不斷攪拌下投入3ml純化水中，攪拌下滴加3mll0%氨水,定容至1ml,配制成相同濃度的三份定波溶液，定波溶液濃度為0.17g/ml,以水為空白對(duì)照對(duì)三份定波溶液進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，對(duì)比三份定波溶液的全波長(zhǎng)掃描結(jié)果，發(fā)現(xiàn)三份定波溶液在325nm處吸光度差別很大，因此確定檢測(cè)氨節(jié)西林溶液的波長(zhǎng)為325nm ；
[0043]B.取3個(gè)批次的目測(cè)外觀為白色的氨芐西林樣品，按步驟A中所述方法分別配制成相同濃度的三份定標(biāo)溶液，定標(biāo)溶液濃度為0.3g/ml ;以水為空白對(duì)照組，以325nm為檢測(cè)波長(zhǎng)，測(cè)定三份定標(biāo)溶液的吸光度；定標(biāo)溶液的溫度為15°C，測(cè)定過程在定標(biāo)溶液配制完成后的5min之內(nèi)結(jié)束；測(cè)定結(jié)果見表I ;
[0044]表I白色氨節(jié)西林溶液在325nm處的吸光度
[0045]
【權(quán)利要求】
1.一種青霉素類抗生素的外觀評(píng)定方法，其特征在于包括以下步驟: A.取目測(cè)外觀為白色、類白色和黃色的一種青霉素類抗生素各一份，分別配制成相同濃度的定波溶液，以水為空白對(duì)照對(duì)三份定波溶液進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，確定檢測(cè)該種青霉素類抗生素溶液用的入射光波長(zhǎng)； B.取不少于三個(gè)批次的目測(cè)為白色的該種青霉素類抗生素，分別配制成相同濃度的定標(biāo)溶液，以水為空白對(duì)照組，以步驟A確定的檢測(cè)波長(zhǎng)，用分光光度法測(cè)定每份定標(biāo)溶液的吸光度； C.計(jì)算步驟B的所有定標(biāo)溶液吸光度的平均值，所得平均值保留小數(shù)點(diǎn)后三位，并將小數(shù)點(diǎn)后的第三位數(shù)值取零，所得數(shù)值作為該種青霉素類抗生素的外觀標(biāo)準(zhǔn)； D.取任意批次的該種青霉素類抗生素，配制成待測(cè)溶液，以水為空白對(duì)照組，以步驟A確定的檢測(cè)波長(zhǎng)，用分光光度法測(cè)定待測(cè)溶液的吸光度；若待測(cè)溶液的吸光度大于步驟C中所確定的外觀標(biāo)準(zhǔn)，則所測(cè)批次的該種青霉素類抗生素外觀不合格；若待測(cè)溶液的吸光度小于等于步驟C中所確定的外觀標(biāo)準(zhǔn)，則所測(cè)批次的該種青霉素類抗生素外觀合格。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的青霉素類抗生素的外觀評(píng)定方法，其特征在于:所述青霉素類抗生素包括6-APA、氨芐西林、阿莫西林、阿撲西林、阿帕西林、苯唑西林、氯唑西林、雙氯西林、氟氯西林、甲氧西林、萘夫西林、阿洛西林、美洛西林、哌拉西林、呋布西林、羧芐西林、卡茚西林、替卡西林、替卡西林二鈉、替莫西林、磺芐西林、巴氨西林、匹氨西林、酞氨西林、侖氨西林、海他西林、美西林、匹美西林、巴美西林、青霉素V鉀、非奈西林、左普皮西林、丙匹西林、異丙西林、阿度西林、環(huán)己西林、非布西林、喹那西林、依匹西林、美坦西林、沙匹西林、沙莫西林、呋洛西林、吡芐西林、苯明青霉素、普唑西林、匹氨西林。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的青霉素類抗生素的外觀評(píng)定方法，其特征在于:所述定波溶液、定標(biāo)溶液和待測(cè)溶液中所用的溶劑相同，所述溶劑是堿液、堿性緩沖液或水中的任意一種；所述定波溶液、定標(biāo)溶液和待測(cè)溶液的濃度是相同的，均取0.lg/ml?0.35g/ml范圍中的任一數(shù)值。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的青霉素類抗生素的外觀評(píng)定方法，其特征在于:所述堿液是有機(jī)堿和/或無機(jī)堿溶液。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種青霉素類抗生素的外觀評(píng)定方法，其特征在于:所述有機(jī)堿是甲胺、脲、乙胺、乙醇胺、乙二胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、丙胺、異丙胺、1，3-丙二胺、1，2-丙二胺、三丙胺、三乙醇胺、丁胺、異丁胺、叔丁胺、己胺、辛胺、芐胺、環(huán)己胺、卩比唆、六甲基四胺、鄰甲苯胺、間甲苯胺、對(duì)甲苯胺中的任意一種或幾種；所述無機(jī)堿溶液是氨水、氫氧化鈉溶液、碳酸鈉溶液、碳酸氫鈉溶液中的任意一種或幾種的混合。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的青霉素類抗生素的外觀評(píng)定方法，其特征在于:所述堿性緩沖溶液是磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液、磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液、磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖液、磷酸二氫鉀-氫氧化鈉緩沖液、巴比妥鈉-鹽酸緩沖液、Tris-鹽酸緩沖液、硼酸-硼砂緩沖液、硼酸-硼砂緩沖液、甘氨酸-氫氧化鈉緩沖液、硼砂-氫氧化鈉緩沖液、碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液中的任意一種或幾種的混合。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的青霉素類抗生素的外觀評(píng)定方法，其特征在于:所述定波溶液、定標(biāo)溶液和待測(cè)溶液的濃度均取0.lg/ml?0.13g/ml中的任一數(shù)值。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的青霉素類抗生素的外觀評(píng)定方法，其特征在于:所述步驟A中的檢測(cè)波長(zhǎng)為318nm?342nm。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的青霉素類抗生素的外觀評(píng)定方法，其特征在于:所述步驟A中的檢測(cè)波長(zhǎng)為323nm?329nm。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的青霉素類抗生素的外觀評(píng)定方法，其特征在于:所述步驟B和步驟D中，定標(biāo)溶液和待測(cè)溶液的吸光度測(cè)定在溶液配制完成后的15分鐘內(nèi)完成；定標(biāo)溶液和待測(cè)溶液的測(cè)定溫度為0°c?30°C。
【文檔編號(hào)】G01N21/31GK104132899SQ201410307150
【公開日】2014年11月5日 申請(qǐng)日期:2014年6月30日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月30日
【發(fā)明者】左麗華, 嚴(yán)正人, 黃娟, 劉慧勤, 張春青, 王虹 申請(qǐng)人:華北制藥集團(tuán)先泰藥業(yè)有限公司