°(：/11^11)下采集數(shù)據(jù)）】。從圖10中可以看出，隨著溫度的變化』11 = 4.3\103的？1^-171?4-PLA多元嵌段聚合物水溶液的儲能模量(G'）和耗散模量(G"）有著顯著的變化?？傮w來看，在 凝膠階段G' >G"，而在溶膠階段G" >G'。
[0091 ] 3)按照實施例8的方式制樣進行掃描電鏡(SEM)觀察，其孔徑較小的為2微米，較大 的為20微米。
[0092] 實施例13
[0093]將實施例6制備的PLA-17R4-PLA多元嵌段聚合物按配置后濃度為50wt%的量加入 生理鹽水中混合均勻，然后升溫至50°C攪拌形成溶液，將所得溶液于4°C處理24h后即可作 為水凝膠使用。
[0094] 所得水凝膠溶液按照實施例8的方式制樣進行掃描電鏡(SEM)觀察，其孔徑較小的 為2微米，較大的為25微米。
[0095] 實施例14
[0096] 將實施例7制備的PLA-17R4-PLA多元嵌段聚合物按配置后濃度為10wt%的量加入 生理鹽水中混合均勻，然后升溫至60°C攪拌形成溶液，將所得溶液于4°C處理24h后即可作 為水凝膠使用。
[0097] 所得水凝膠溶液按照實施例8的方式制樣進行掃描電鏡(SEM)觀察，其孔徑較小的 為1微米，較大的為25微米。
[0098] 作為醫(yī)用防粘連材料的使用方法有兩種:一種是將溶膠狀水凝膠直接注入創(chuàng)面周 圍，通過人體溫度來升高形成凝膠，第二種方法是將防粘連水溶膠在高于其相轉變溫度的 條件下放置約30分鐘，使其通過溫度的升高而形成水凝膠，應用時，直接將水凝膠涂抹在腹 腔創(chuàng)面上。
[0099] 另外，考慮到多元嵌段聚合物溶液保存的方便和穩(wěn)定性，本發(fā)明選擇采用-20°C保 存，材料呈固體狀態(tài)，在此溫度下保存易于放置，且降解速度較慢。使用時先于4°C解凍，使 之成為溶液狀態(tài)，再根據(jù)實際應用的需要選擇不同的使用方法。
[0100] 為了考察本發(fā)明制備的水凝膠是否能作為醫(yī)用防粘連材料使用，本發(fā)明對其作了 以下試驗：
[0101] 1、細胞毒性試驗
[0102] 本發(fā)明用實施例1和5不同濃度的PLA-10R5-PLA和PLA-17R4-PLA多元嵌段聚合物 的生理鹽水溶液與腎上皮細胞HEK293和成纖維細胞L929作用，結果見圖12和圖13。從圖12 和圖13結果表明多元嵌段聚合物PLA-10R5-PLA和PLA-17R4-PLA幾乎無細胞毒性。
[0103] 2、防粘連效果評價
[0104]本發(fā)明將實施例1和5的多元嵌段聚合物溶于生理鹽水中，配成25%水溶液，再將 該溶膠狀水凝膠在4°C以下冷藏處理24小時，應用時，直接將水凝膠均勻涂抹在腹腔創(chuàng)面周 圍。
[0105]腹壁-盲腸摩擦損傷模型:將動物麻醉，開腹，將盲腸用干紗布摩擦，使表面漿膜層 損傷，同時將相鄰腹壁用解剖刀將漿膜層剝離(小鼠：1 X lcm;大鼠：2 X 2cm)，然后在損傷面 應用PLA-PP0-PE0-PP0-PLA水凝膠(小鼠：0.2ml;大鼠 ：lml)涂抹均勻，關腹腔。本試驗采用 的是SD大鼠。
[0106] 大鼠腹壁-盲腸摩擦試驗結果見圖14:其中A為大鼠腹壁-盲腸摩擦模型初建圖；B 為鼠腹壁-盲腸摩擦模型建立后涂抹Mn = 4.0 X 103的PLA-10R5-PLA水凝膠后的初步圖；C為 對照組(生理鹽水組)術后七天的照片，可見大鼠盲腸與腹壁間發(fā)生粘連;D為對照組（用透 明質酸鈉作為防粘連阻隔劑組)術后七天的照片，可見大鼠盲腸與腹壁間發(fā)生部分粘連，同 時水凝膠已經(jīng)完全被降解吸收;E為治療組1 (應用Μη = 4.0 X 103的PLA-10R5-PLA多元嵌段 聚合物的25%溶液作為防粘連阻隔劑的水凝膠）術后七天的照片，可見盲腸與腹壁已經(jīng)修 復完好，沒有粘連發(fā)生，同時水凝膠已經(jīng)完全被降解吸收;F為治療組2(應用Mn = 4.3X103 的PLA-17R4-PLA多元嵌段聚合物的25%溶液作為防粘連阻隔劑的水凝膠）術后七天的照 片，可見盲腸與腹壁已經(jīng)修復完好，沒有粘連發(fā)生，同時水凝膠已經(jīng)完全被降解吸收。
[0107] 術后7天各實驗組的大鼠腹壁和盲腸的HE染色結果見圖15:其中A為生理鹽水組粘 連的腹壁和盲腸;B為透明質酸作為防粘連阻隔劑組部分粘連的腹壁和盲腸;C為治療組1應 用Mn = 4.0X103的PLA-10R5-PLA多元嵌段聚合物的25%水凝膠作為防粘連阻隔材料組愈 合的腹壁;D為治療組1應用Mn = 4.0X103的PLA-10R5-PLA多元嵌段聚合物的25%水凝膠作 為防粘連阻隔材料組愈合的盲腸壁;E為治療組2應用Mn = 4.3X103的PLA-17R4-PLA多元嵌 段聚合物的25%水凝膠作為防粘連阻隔材料組愈合的腹壁;F為治療組2應用Mn = 4.3X103 的PLA-17R4-PLA多元嵌段聚合物的25%水凝膠作為防粘連阻隔材料組愈合的盲腸壁。從生 理鹽水組和透明質酸組的HE染色結果可以看出受損盲腸的平滑肌與缺損的腹壁粘連在一 起，從Μη = 4·3Χ103 的 PLA-17R4-PLA 多元嵌段聚合物和Μη = 4·3Χ103 的 PLA-17R4-PLA 多元 嵌段聚合物的25%水凝膠作為防粘連阻隔材料組的HE染色結果可以看出，受損的盲腸和腹 壁完全分離，且形成新生間質層。
[0108] 同時，本發(fā)明其他水凝膠材料的同類試驗也表明具有接近的防粘連效果。結果表 明其防粘連效果良好，未見水凝膠有任何毒副作用，故而不會影響創(chuàng)面愈合;其抗粘連效果 優(yōu)于生理鹽水對照組和透明質酸鈉對照組。本領域技術人員可以根據(jù)手術創(chuàng)面大小、手術 創(chuàng)面愈合時間及手術所需凝膠強度高低等實際需求進行防粘連材料的選擇。
[0109] 上述試驗結果綜合表明，本發(fā)明PLA-PP0-PE0-PP0-PLA多元嵌段聚合物溶于生理 鹽水中制得的醫(yī)用防粘連材料無毒無害，是一種防粘連效果好、生物相容性好的醫(yī)用防粘 連材料。
【主權項】
1. 一種溫度敏感型多元嵌段聚合物的制備方法，其特征在于該方法的工藝步驟和條件 如下： 在惰性氣體保護下，將L-丙交酯、反式泊洛沙姆按質量比0.185~1.4與以反式泊洛沙 姆與L-丙交酯的總質量計0.3 %的辛酸亞錫催化劑混合，并于130-160 °C加熱反應5-12h，冷 卻，然后加入溶劑溶解反應所得物，繼后再放入在_20°C的石油醚中沉淀，過濾，反復操作2 ~3次后干燥、提純。2. 根據(jù)權利要求1所述的溫度敏感型多元嵌段聚合物的制備方法，該方法中所用的反 式泊洛沙姆為10R5或17R4。3. 根據(jù)權利要求1或2所述的溫度敏感型多元嵌段聚合物的制備方法，其特征在于該方 法中所用的溶劑為二氯甲烷，三氯甲烷和四氫呋喃中的至少一種。4. 根據(jù)權利要求1或2所述的溫度敏感型多元嵌段聚合物的制備方法，其特征在于該方 法中所用的L-丙交酯與反式泊洛沙姆10R5的質量比為0.25~1.4，L-丙交酯與反式泊洛沙 姆17R4的質量比為0.185~1.185。5. 根據(jù)權利要求3所述的溫度敏感型多元嵌段聚合物的制備方法，其特征在于該方法 中所用的L-丙交酯與反式泊洛沙姆10R5的質量比為0.25~1.4，L-丙交酯與反式泊洛沙姆 17R4的質量比為0.185~1.185。6. -種由權利要求1所述方法制備的溫度敏感型多元嵌段聚合物，其特征在于該多元 嵌段聚合物的結構式為PLA-10R5-PLA或PLA-17R4-PLA，其中PLA-10R5-PLA的數(shù)均分子量 Mnc為2.59-4.92 X 103，PLA-17R4-PLA的數(shù)均分子量Mnc為3.37-5.69 X 103，其紅外圖譜顯示 二者在17500^1和600-800(31^1處均有新增加的吸收峰，其核磁圖譜5.20ppm處顯示的峰代 表PLA鏈段中-CH(CH 3) -C0-的次甲基中的氫原子，3 · 35-3 · 70ppm處顯示的峰代表Pluronic-R鏈段中-OCH2-CH2-和-〇CH2-CH(CH3)-的亞甲基中的氫原子，4.3-4.4ppm處顯示的峰代表 PLA-C〇-〇CH2-CH2-〇-Pluronic中亞甲基中的氫原子，該多元嵌段聚合物的敏感溫度2 25°C。7. -種由權利要求6所述溫度敏感型多元嵌段聚合物在溫度敏感型水凝膠中的應用。8. 根據(jù)權利要求7所述的溫度敏感型多元嵌段聚合物在溫度敏感型水凝膠中的應用， 其特征在于應用所得水凝膠的濃度2 l〇wt%，臨界凝膠溫度2 25°C。9. 根據(jù)權利要求7所述的溫度敏感型多元嵌段聚合物在溫度敏感型水凝膠中的應用， 其特征在于應用所得水凝膠的濃度為10~50wt%，臨界凝膠溫度為25~35°C。10. -種權利要求7所述溫度敏感型水凝膠在制備醫(yī)用防粘連材料中的應用。
【專利摘要】本發(fā)明公開的溫度敏感型多元嵌段聚合物是在惰性氣體保護下，將L-丙交酯、反式泊洛沙姆按質量比0.185～1.4與催化劑混合，并于130-160℃加熱反應5-12h，冷卻，然后加入溶劑溶解反應所得物，繼后沉淀、過濾、干燥、提純即得結構式為PLA-10R5-PLA或PLA-17R4-PLA，其中PLA-10R5-PLA的數(shù)均分子量Mnc為2.59-4.92×103，PLA-17R4-PLA的數(shù)均分子量Mnc為3.37-5.69×103，該多元嵌段聚合物配制的溫度敏感型水凝膠的濃度≥10wt％，且臨界凝膠溫度≥25℃。本發(fā)明公開的多元嵌段聚合物不僅可在較低的臨界凝膠濃度下形成水凝膠，制備成本低，具有凝膠溶膠轉變特性且可生物降解，防粘連效果和生物相容性均好，為醫(yī)用防粘連材料提供了一種新的品種。
【IPC分類】C08G63/08, A61L31/14, A61L31/06, C08G63/85
【公開號】CN105622903
【申請?zhí)枴緾N201610151641
【發(fā)明人】郭剛, 危加麗
【申請人】四川大學
【公開日】2016年6月1日
【申請日】2016年3月16日