一種去苦味兒茶素的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于兒茶素的制備領(lǐng)域，具體涉及一種去苦味兒茶素的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]兒茶素是茶葉中最重要的生理活性物質(zhì)，約占多酚類80%，屬黃烷醇類，其基本結(jié)構(gòu)是α-苯基苯并吡喃，分為酯型和非酯型兩類，結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別在于氫基取代的數(shù)量和位置不同。兒茶素主要由表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)、表沒食子兒茶素(EGC)、表兒茶素沒食子酸酯(ECG)和表兒茶素(EC)等單體組成。兒茶素具有明顯的抗衰老、防癌抗突變、降脂減肥、降低血糖、血脂和膽固醇、預(yù)防心血管疾病等藥理功能，已廣泛應(yīng)用于食品加工、醫(yī)藥保健和日用化工等領(lǐng)域。衛(wèi)生部已批準了茶多酚為我國食品添加劑。國內(nèi)外研究成果表明，兒茶素可防心血管疾病，預(yù)防癌癥，抗氧化作用，具有明顯的抗衰老功能，有望開發(fā)成為一種天然的護膚品。從1990開始，由于有關(guān)茶多酚/兒茶素的保健與藥理功能研究的突破，不僅擴大了綠茶在國際市場上的份額，而且極大地推進了我國茶葉深加工產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展，為茶葉功能成分的研究與開發(fā)奠定了良好的產(chǎn)業(yè)與市場基礎(chǔ)，目前，我國已經(jīng)形成年產(chǎn)5000多噸茶多酚/兒茶素的產(chǎn)業(yè)規(guī)模。兒茶素粗品傳統(tǒng)的提取分離工藝主要包括離子沉淀法、有機溶劑萃取法和吸附柱色譜法。由于茶葉的功能成分復(fù)雜，各功能成分的化學結(jié)構(gòu)相似，從茶葉中制取無苦味的兒茶素具有相當難度。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明提供一種去苦味兒茶素的制備方法，該方法簡便，只使用食用添加酶制劑，制備周期短，成本低，符合綠色和安全的要求，去苦味兒茶素的提取率及產(chǎn)品純度高，適宜規(guī)?；a(chǎn)。
[0004]本發(fā)明提供的技術(shù)方案是:一種去苦味兒茶素的制備方法，包括如下步驟:
(1)加入純水溶解綠茶兒茶素提取物，配置成濃度為5%W/v的溶液，加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值為4.0-5.0，制得茶湯料液，備用；
(2)按照0.025%w/v的比例，在茶湯料液中添加果膠酶，在35°C_37°C下靜止酶解，間歇攪拌，得酶解液；
(3)加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)酶解液pH值為5，離心過濾；
(4)將步驟(3)中過濾后的上清液通過微孔陶瓷膜過濾器，濾去極微小雜質(zhì)，并用反向滲透濃縮器進行濃縮，收集濃縮液，將所述洗脫液濃縮至16-18波美度，得濃縮液；
(5)將所述濃縮液在180°C下通過離心噴霧干燥塔進行離心干燥，得脫去苦味的兒茶素。
[0005]本發(fā)明步驟(2)中，加入果膠酶，靜置酶解16-24小時，間歇60分鐘攪拌10分鐘。
[0006]本發(fā)明步驟(4)中所述反向滲透濃縮器所采用的反滲透膜材料為醋酸纖維素、芳香族聚酰胺、聚醚砜或聚偏氟乙烯其中之一。
[0007]本發(fā)明具有以下有益效果:本發(fā)明以小葉綠茶兒茶素提取物為原料，經(jīng)過果膠酶酶解，微孔超濾及反向滲透濃縮，從綠茶提取物中分離去苦味兒茶素，優(yōu)化了產(chǎn)品分離純化工藝流程，單體提取率及產(chǎn)品純度高。產(chǎn)品可防心血管疾病，預(yù)防癌癥，抗氧化作用，具有明顯的抗衰老功能，有望開發(fā)成為一種天然的護膚品。也是許多功能食品開發(fā)的重要原料，可單獨或者與維生素類、天然植物成分復(fù)配應(yīng)用于保健食品、化妝品等領(lǐng)域。本發(fā)明方法簡便，制備周期短，成本低，符合環(huán)保和安全的要求，適宜規(guī)模化生產(chǎn)。
【具體實施方式】
[0008]以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。本發(fā)明中，果膠酶購自諾維信(中國)生物技術(shù)有限公司。
[0009]本發(fā)明中，綠茶兒茶素提取物最好是(小葉種茶樹上米摘的)小葉綠茶兒茶素提取物。
[0010]實施例1
一種去苦味兒茶素的制備方法，包括如下步驟:
1、取小葉綠茶兒茶素提取物100克，配成2000ml兒茶素溶液，加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值為4.0-5.0，向所述溶液中添加0.5克果膠酶，在35-37°C溫度下酶解16小時，間歇60分鐘攪拌10分鐘，(加入氫氧化鈉)將酶解液調(diào)節(jié)pH值至5，在1200 r/min條件下離心過濾；
2、將步驟I中過濾后的上清液緩慢通過微孔陶瓷膜過濾器，出去部分肉眼不可見雜質(zhì)，再通過(截留分子量為2500的反滲透膜)反向滲透濃縮器濃縮至16-18波美度，得濃縮液；
3、將所述濃縮液在180°C溫度下離心噴霧干燥，得到87.25g磚紅色固體。
[0011]將步驟3得到的磚紅色固體與兒茶素標準品(購自美國Sigma-Aldrich公司，Ci5HwO6,M.W.290.27，編號:E4018，純度2 98%(HPLC))對照鑒定并經(jīng)高效液相色譜法分析檢測(鑒定、檢測結(jié)果為:所述磚紅色固體，分子量為290，(-)ES1-MS m/z:289 [Μ—H]-，熔點240 0C，分子式為:C15HwO6，(ECG+EGCG+GCG)含量< 1.5%表明所述磚紅色固體為無苦味(去苦味)兒茶素，而且純度2 98%。
[0012]實施例2
一種去苦味兒茶素的制備方法，包括如下步驟:
1、取小葉綠茶兒茶素提取物100克，配成2000ml兒茶素溶液，加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值為4.0-5.0，向所述溶液中添加0.5克果膠酶，在35-37°C溫度下酶解20小時，間歇60分鐘攪拌10分鐘，(加入氫氧化鈉)將酶解液調(diào)節(jié)pH值至5，在1200 r/min條件下離心過濾；
2、將步驟I中過濾后的上清液緩慢通過微孔陶瓷膜過濾器，出去部分肉眼不可見雜質(zhì)，再通過(截留分子量為2500的反滲透膜)反向滲透濃縮器濃縮至16-18波美度，得濃縮液；
3、將所述濃縮液在180°C溫度下離心噴霧干燥，得到87.25g磚紅色固體。
[0013]將步驟3得到的磚紅色固體與兒茶素標準品(購自美國Sigma-Aldrich公司，Ci5HwO6,M.W.290.27，編號:E4018，純度2 98%(HPLC))對照鑒定并經(jīng)高效液相色譜法分析檢測(鑒定、檢測結(jié)果為:所述磚紅色固體，分子量為290，(-)ES1-MS m/z:289 [Μ—H]-，熔點240 0C，分子式為:C15HwO6，(ECG+EGCG+GCG)含量< 1.5%表明所述磚紅色固體為無苦味(去苦味)兒茶素，而且純度2 98%。
[0014]實施例3
一種去苦味兒茶素的制備方法，包括如下步驟: 1、取小葉綠茶兒茶素提取物100克，配成2000ml兒茶素溶液，加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值為4.0-5.0，向所述溶液中添加0.5克果膠酶，在35-37°C溫度下酶解24小時，間歇60分鐘攪拌10分鐘，(加入氫氧化鈉)將酶解液調(diào)節(jié)pH值至5，在1200 r/min條件下離心過濾；
2、將步驟I中過濾后的上清液緩慢通過微孔陶瓷膜過濾器，出去部分肉眼不可見雜質(zhì)，再通過(截留分子量為2500的反滲透膜)反向滲透濃縮器濃縮至16-18波美度，得濃縮液；
3、將所述濃縮液在180°C溫度下離心噴霧干燥，得到87.25g磚紅色固體。
[0015]將步驟3得到的磚紅色固體與兒茶素標準品(購自美國Sigma-Aldrich公司，Ci5HwO6,M.W.290.27，編號:E4018，純度2 98%(HPLC))對照鑒定并經(jīng)高效液相色譜法分析檢測(鑒定、檢測結(jié)果為:所述磚紅色固體，分子量為290，(-)ES1-MS m/z:289 [Μ—H]-，熔點240 0C，分子式為:C15HwO6，(ECG+EGCG+GCG)含量< 1.5%表明所述磚紅色固體為無苦味(去苦味)兒茶素，而且純度2 98%。
【主權(quán)項】
1.一種去苦味兒茶素的制備方法，其特征在于，包括如下步驟: (1)加入純水溶解綠茶兒茶素提取物，配置成濃度為5%W/v的溶液，加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值為4.0-5.0，制得茶湯料液，備用； (2)按照0.025%w/v的比例，在茶湯料液中添加果膠酶，在35°C-37 °C下靜止酶解，間歇攪拌，得酶解液； (3)加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)酶解液pH值為5，離心過濾； (4)將步驟(3)中過濾后的上清液通過微孔陶瓷膜過濾器，濾去極微小雜質(zhì)，并用反向滲透濃縮器進行濃縮，收集濃縮液，將所述洗脫液濃縮至16-18波美度，得濃縮液； (5)將所述濃縮液在180°C下通過離心噴霧干燥塔進行離心干燥，得脫去苦味的兒茶素。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種去苦味兒茶素的制備方法，其特征在于:步驟(2)中加入果膠酶，靜置酶解16-24小時，間歇60分鐘攪拌10分鐘。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種去苦味兒茶素的制備方法，其特征在于:步驟(4)中所述反向滲透濃縮器所采用的反滲透膜材料為醋酸纖維素、芳香族聚酰胺、聚醚砜或聚偏氟乙烯其中之一。
【專利摘要】本發(fā)明提出了一種去苦味兒茶素的制備方法，包含如下步驟：（1）向含有綠茶兒茶素提取物的溶液中添加果膠酶，35-37℃溫度下靜止酶解，間歇攪拌，離心過濾，得酶解液；（2）將酶解液通入微孔陶瓷膜過濾器，并用反向滲透濃縮器濃縮，收集濃縮液，將濃縮液濃縮至16-18波美度，得濃縮液；將濃縮液通過離心噴霧干燥塔進行離心干燥，得去苦味兒茶素。本發(fā)明使用果膠酶對綠茶兒茶素進行酶解，具較好的轉(zhuǎn)化效果，是一種轉(zhuǎn)化率高，產(chǎn)品純度高的制備方法，而且制備周期短，成本低，適宜規(guī)模化生產(chǎn)。
【IPC分類】A23L5/10, C07D311/62, C12P17/06, A23L33/105
【公開號】CN105585548
【申請?zhí)枴緾N201511001383
【發(fā)明人】葉艷, 龍菲菲, 羅祥, 馬松, 吳世華
【申請人】湖北中鑫生物科技有限公司
【公開日】2016年5月18日
【申請日】2015年12月29日