本發(fā)明涉及一種具有抗病蟲促生長功能的芽孢桿菌復(fù)合微生物菌劑及其制備方法和應(yīng)用，屬于微生物農(nóng)藥。

背景技術(shù)：

1、芽孢桿菌作為一類重要的植物促生菌，在植物防病和促進(jìn)植物生長方面體現(xiàn)出良好的應(yīng)用效果。已有研究發(fā)現(xiàn)，有益芽孢桿菌可通過溶菌和抗菌作用、營養(yǎng)及空間競爭、調(diào)節(jié)根際微生態(tài)和誘導(dǎo)植物抗性等途徑發(fā)揮防病促生作用，是被廣泛認(rèn)可的能夠抑制多種植物病原菌的細(xì)菌之一，可有效抑制連作引起的病害。目前可以利用的芽孢桿菌包括枯草芽孢桿菌、側(cè)孢芽孢桿菌、多粘芽孢桿菌等。然而在應(yīng)用的過程中，菌種常發(fā)生變異、退化，出現(xiàn)生長瘠薄、繁殖力降低、抗生效應(yīng)減弱甚至喪失等現(xiàn)象。小麥?zhǔn)鞘澜缰匾Z食作物，但是常受到多種真菌病害的侵害造成減產(chǎn)。使用外源生物制劑，由于微生物難定殖，或者不能和宿主形成良好共生關(guān)系，常造成效果不佳。篩選具有防治植物病害，促進(jìn)植物生長等功能的新一代優(yōu)良菌種資源極為重要。

2、cn114410498?a的專利申請(qǐng)公開了一種微生物制劑組合，包括解淀粉芽孢桿菌(菌株保藏編號(hào)cctcc?m?2021846)和貝萊斯芽孢桿菌(菌株保藏編號(hào)cctcc?m?2021864)，所述解淀粉芽孢桿菌與貝萊斯芽孢桿菌的比例為3:2。該發(fā)明申請(qǐng)將解淀粉芽孢桿菌和貝萊斯芽孢桿菌安3:2混合作用于刺吸式口器害蟲，通過區(qū)分解淀粉芽孢桿菌為快釋菌劑與貝萊斯芽孢桿菌為緩釋菌劑，形成兩種菌劑的釋放時(shí)間差，在先利用解淀粉芽孢桿菌分泌的活性酶、蛋白多肽等先破壞害蟲的表皮，在后釋放貝萊斯芽孢桿菌作用，可以實(shí)現(xiàn)一次實(shí)施，同時(shí)取得兩次菌劑不同時(shí)段作用的效果，顯著提高刺吸式口器害蟲防治效果。該申請(qǐng)中僅公開了解淀粉芽孢桿菌與貝萊斯芽孢桿菌組合用于防治刺吸式口器害蟲，未公開混合菌劑是否還有其他作用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明所要解決的第一個(gè)技術(shù)問題是提供一種對(duì)多種病原菌有顯著的防治效果的微生物菌劑。

2、本發(fā)明微生物菌劑，其活性成分為解淀粉芽孢桿菌dxm-1(菌株保藏編號(hào)cctccm2021860)和貝萊斯芽孢桿菌dxm-11(菌株保藏編號(hào)cctcc?m?2021859)，所述解淀粉芽孢桿菌與貝萊斯芽孢桿菌的質(zhì)量比為0.9-1.1:1。

3、其中，為了節(jié)約成本，上述的解淀粉芽孢桿菌和貝萊斯芽孢桿菌可以分別由其活菌發(fā)酵液代替。

4、進(jìn)一步的，為了提高本發(fā)明微生物菌劑的效果，上述解淀粉芽孢桿菌和貝萊斯芽孢桿菌的質(zhì)量比優(yōu)選為1:1。

5、其中，本發(fā)明微生物菌劑可以為常規(guī)的劑型，比如：固體菌劑、液體菌劑等，優(yōu)選為液體菌劑。

6、本發(fā)明所要解決的第二個(gè)技術(shù)問題是提供制備上述微生物菌劑的方法。

7、本發(fā)明微生物菌劑的制備方法包括如下步驟：

8、a、種子培養(yǎng)：分別將解淀粉芽孢桿菌和貝萊斯芽孢桿菌接種于lb液體培養(yǎng)基中，得到種子液；

9、b、發(fā)酵液制備：a步驟所得解淀粉芽孢桿菌種子液和貝萊斯芽孢桿菌種子液分別進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，制得活菌發(fā)酵液；其中，發(fā)酵培養(yǎng)的溫度為28±1℃，發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)間為72±1h；

10、c、微生物制劑配置：將b步驟制備的活菌發(fā)酵液按質(zhì)量比混勻，即得微生物菌劑。

11、其中，上述b步驟發(fā)酵培養(yǎng)所用發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)選為：將洋芋湯培養(yǎng)基與黃豆湯培養(yǎng)基按照體積比為1:3的比例混合后，加入酵母粉5g/l，氯化鈉3g/l，混合均勻后，調(diào)節(jié)ph至7.0；

12、所述洋芋湯培養(yǎng)基為：洋芋200g，水1l，將新鮮洋芋清洗去皮切片后用冷水清洗多次，煮沸30分鐘過濾，補(bǔ)水至1l，取上清液備用；

13、所述黃豆湯培養(yǎng)基為：黃豆200g，水1l，黃豆磨碎后倒入水中煮沸40min，過濾，補(bǔ)水至1l，取上清備用。

14、本發(fā)明所要解決的第三個(gè)技術(shù)問題是提供上述微生物菌劑用作植物生長促進(jìn)劑的用途。所述植物優(yōu)選為小麥。

15、本發(fā)明所要解決的第四個(gè)技術(shù)問題是提供上述微生物菌劑用作病菌抑制劑的用途。

16、進(jìn)一步的，所述的病菌優(yōu)選為禾谷鐮孢菌、尖孢鐮孢菌、黃色鐮孢菌、布氏白粉菌、禾谷絲核菌或平臍蠕孢菌。

17、本發(fā)明所要解決的第五個(gè)技術(shù)問題是提供上述微生物菌劑用于防治小麥蚜蟲的用途。

18、本發(fā)明還提供了兩種菌株，分別為：

19、解淀粉芽孢桿菌菌株dxm-1，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)為cctccm2021860。

20、貝萊斯芽孢桿菌菌株dxm-11，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)為cctccm2021859。

21、本發(fā)明微生物菌劑對(duì)多種病原菌有顯著的防治效果，特別是禾谷鐮孢菌、尖孢鐮孢菌、黃色鐮孢菌、布氏白粉菌、禾谷絲核菌或平臍蠕孢菌。本發(fā)明微生物菌劑對(duì)用作植物生長促進(jìn)劑效果顯著，特別是促進(jìn)植物小麥的生長、防病，同時(shí)還能防治小麥蚜蟲。

技術(shù)特征：

1.一種微生物菌劑，其特征在于：其活性成分為解淀粉芽孢桿菌dxm-1(菌株保藏編號(hào)cctcc?m?2021860)和貝萊斯芽孢桿菌dxm-11(菌株保藏編號(hào)cctcc?m?2021859)，所述解淀粉芽孢桿菌與貝萊斯芽孢桿菌的質(zhì)量比為0.9-1.1:1。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微生物菌劑，其特征在于：所述解淀粉芽孢桿菌和貝萊斯芽孢桿菌分別由其活菌發(fā)酵液代替。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微生物菌劑，其特征在于：所述解淀粉芽孢桿菌和貝萊斯芽孢桿菌的質(zhì)量比為1:1。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微生物菌劑，其特征在于：所述微生物制劑的劑型為液體菌劑。

5.制備權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的微生物菌劑的方法，其特征在于包括如下步驟：

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備微生物菌劑的方法，其特征在于：b步驟發(fā)酵培養(yǎng)所用發(fā)酵培養(yǎng)基為：將洋芋湯培養(yǎng)基與黃豆湯培養(yǎng)基按照體積比為1:3的比例混合后，加入酵母粉5g/l，氯化鈉3g/l，混合均勻后，調(diào)節(jié)ph至7.0；

7.權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的微生物菌劑用作植物生長促進(jìn)劑、抑制劑或用于防治小麥蚜蟲的用途。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用途，其特征在于：所述的病菌為禾谷鐮孢菌、尖孢鐮孢菌、黃色鐮孢菌、布氏白粉菌、禾谷絲核菌或平臍蠕孢菌。

9.解淀粉芽孢桿菌菌株dxm-1，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)為cctccm2021860。

10.貝萊斯芽孢桿菌菌株dxm-11，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)為cctccm?2021859。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及一種具有抗病蟲促生長功能的芽孢桿菌復(fù)合微生物菌劑及其制備方法和應(yīng)用，屬于微生物農(nóng)藥技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明所解決的技術(shù)問題是提供了一種對(duì)多種病原菌有顯著的防治效果的微生物菌劑。本發(fā)明微生物菌劑，其活性成分為解淀粉芽孢桿菌DXM?1(菌株保藏編號(hào)CCTCC?M?2021860)和貝萊斯芽孢桿菌DXM?11(菌株保藏編號(hào)CCTCC?M?2021859)，所述解淀粉芽孢桿菌與貝萊斯芽孢桿菌的質(zhì)量比為0.9?1.1:1。

技術(shù)研發(fā)人員：許潔,趙帥,霍小鵬,彭斌,唐春凌,田長彥,楊剛,趙振勇,喻偉婕,袁勇,劉毅,翁幫華,張毅,李冀川
受保護(hù)的技術(shù)使用者：中國石油天然氣股份有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/10/21