本發(fā)明屬于蛋白質(zhì)、多肽，涉及一種燕窩抗氧化肽，涉及其制備方法，還涉及其抗氧化肽的用途。

背景技術(shù)：

1、燕窩(edible?bird's?nest，ebn)是指雨燕科多種金絲燕用唾液和少量絨羽等凝結(jié)所筑的巢窩。燕窩是一種名貴補(bǔ)品，具有養(yǎng)陰潤(rùn)燥、補(bǔ)中益氣、入胃補(bǔ)脾、化痰止咳等功能，被譽(yù)為“八珍之首”。中醫(yī)認(rèn)為燕窩：養(yǎng)陰潤(rùn)燥、益氣補(bǔ)中、治虛損、咳痰喘、咯血、久痢，適宜于體質(zhì)虛弱，營(yíng)養(yǎng)不良，久痢久瘧，痰多咳嗽，老年慢性支氣管炎、支氣管擴(kuò)張、肺氣腫、肺結(jié)核、咯血吐血和胃痛病人食用。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)發(fā)現(xiàn)，燕窩可促進(jìn)免疫功能，有延緩人體衰老，延年益壽的功效。研究發(fā)現(xiàn)，燕窩主要成分有：水溶性蛋白質(zhì)、碳水化合物、微量元素：鈣、磷、鐵、鈉、鉀及對(duì)促進(jìn)人體活力起重要作用的氨基酸。其中燕窩中比較重要的物質(zhì)燕窩酸占燕窩含量的10％左右，其能夠有效提高智力和記憶力，表皮生長(zhǎng)因子和水提物質(zhì)能夠強(qiáng)烈刺激細(xì)胞再生、分裂和組織重建。燕窩中的蛋白質(zhì)含量在60％左右，具有抵御骨質(zhì)疏松、增加真皮厚度、抗氧化等多種功效。

2、活性氧(reactive?oxygen?species，ros)和活性氮(reactive?nit?rogenspecies，rns)是引起蛋白質(zhì)氧化損傷的重要原因。ros和rns可以通過(guò)多種代謝途徑產(chǎn)生，如化學(xué)毒物與藥物代謝、細(xì)胞呼吸、輻射、光照等。由活性氧引起的蛋白質(zhì)氧化性損傷與衰老、腫瘤、糖尿病及許多神經(jīng)退行性疾病的發(fā)生相關(guān)。抗氧化是指任何能夠在低濃度下有效抑制自由基氧化反應(yīng)的物質(zhì)。其機(jī)制可以是直接作用于自由基或間接消耗易產(chǎn)生自由基的物質(zhì)，以防止進(jìn)一步反應(yīng)?，F(xiàn)研究已表明體外攝入抗氧化劑可以增強(qiáng)身體抗氧化防衛(wèi)系統(tǒng)、保護(hù)細(xì)胞免受自由基侵害、促進(jìn)新陳代謝的作用。

3、綜上，抗氧化劑對(duì)人體健康具有重要意義，而燕窩營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，具有多種功效，申請(qǐng)人通過(guò)本發(fā)明技術(shù)，在燕窩蛋白中制備出抗氧化肽，可應(yīng)用于藥品、食品和化妝品等方面。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、基于背景技術(shù)存在的技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提出了一種燕窩抗氧化肽及其制備方法和用途。

2、本發(fā)明所要解決的第一個(gè)技術(shù)問(wèn)題是提供一種燕窩抗氧化肽，該燕窩抗氧化肽可通過(guò)清除自由基達(dá)到抗氧化作用。

3、本發(fā)明所要解決的第二個(gè)技術(shù)問(wèn)題是提供一種燕窩抗氧化肽的制備方法，其方法工藝科學(xué)合理、易操作。

4、本發(fā)明所要解決的第三個(gè)技術(shù)問(wèn)題是提供一種燕窩抗氧化肽的應(yīng)用。

5、本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

6、本發(fā)明為解決上述第一個(gè)技術(shù)問(wèn)題所采取的技術(shù)方案為：一種燕窩抗氧化肽，其氨基酸序列為gly-gln-arg-cys-asp-trp(gqrcdw)，ms測(cè)定分子量為763.75da。

7、本發(fā)明為解決上述第二個(gè)技術(shù)問(wèn)題所采取的技術(shù)方案為：一種燕窩抗氧化肽的制備方法，其通過(guò)如下步驟的制備方法制備：

8、(1)取干凈的燕窩，進(jìn)行粉碎；

9、(2)對(duì)粉碎后的燕窩進(jìn)行蛋白質(zhì)變性；

10、(3)將變性后的燕窩進(jìn)行酶解；

11、(4)將酶解后的燕窩肽進(jìn)行分離；

12、(5)任選對(duì)分離后的溶液進(jìn)行濃縮、干燥。

13、優(yōu)選的，所述的步驟(1)中，燕窩可以是燕盞、燕條和/或燕碎等燕窩相關(guān)物質(zhì)。

14、優(yōu)選的，所述的步驟(1)中，粉碎的方法可以是超微粉碎、膠體磨粉碎、破壁粉碎、球磨機(jī)粉碎、均質(zhì)機(jī)均質(zhì)和/或高壓均質(zhì)機(jī)的一種或者幾種的組合。在本發(fā)明的具體實(shí)施方式中，粉碎是干燕窩粉碎機(jī)粉碎。

15、優(yōu)選的，所述的步驟(2)中，蛋白質(zhì)變性的方法可以是物理方法，如加熱、加壓、脫水、攪拌、振蕩、紫外線(xiàn)照射和/或超聲波處理等，也可以是化學(xué)方法，如用強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、尿素、重金屬鹽和/或十二烷基硫酸鈉(sds)等處理等，還可以是上述物理或化學(xué)方法中兩種或兩種以上的組合。在本發(fā)明的具體實(shí)施方式中，變性是加熱變性。

16、優(yōu)選的，所述的步驟(2)中，加熱的溫度為90-100℃，優(yōu)選為95-100℃，如95℃。

17、優(yōu)選的，所述的步驟(2)中，加熱的時(shí)間為10-60分鐘，優(yōu)選為20-40分鐘，如30分鐘。

18、優(yōu)選的，所述的步驟(3)中，蛋白酶為胃蛋白酶、胰蛋白酶、動(dòng)物蛋白水解酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、堿性蛋白酶、基質(zhì)蛋白酶、風(fēng)味酶中的一種或者兩種以上的組合。在本發(fā)明的具體實(shí)施方式中，蛋白酶是堿性蛋白酶和/或木瓜蛋白酶。

19、優(yōu)選的，所述的步驟(3)中，酶解的溫度為25-60℃，優(yōu)選為30-55℃，如45℃。

20、優(yōu)選的，所述的步驟(3)中，酶解的時(shí)間為1-6小時(shí)，優(yōu)選為2-5小時(shí)，如3小時(shí)。

21、優(yōu)選的，所述的步驟(4)中，分離可以是過(guò)濾、超濾、離心、層析、透析、色譜等方式一種或者兩種以上的組合。在本發(fā)明的具體實(shí)施方式中，分離是過(guò)濾、超濾和/或色譜。經(jīng)過(guò)分離純化后獲得燕窩肽gly-gln-arg-cys-asp-trp(gqrcdw)，ms測(cè)定分子量為763.75da。

22、優(yōu)選的，所述的步驟(4)中，過(guò)濾的膜孔徑為100-400目，優(yōu)選為200-300目，如200目。

23、優(yōu)選的，所述的步驟(4)中，超濾膜孔徑截留分子量1000da以上，如1000da。

24、優(yōu)選的，所述的步驟(4)中，色譜為制備色譜，如凝膠滲透制備色譜。

25、在本文中，任選表示可以選擇，也可以不選擇。即，本發(fā)明第二個(gè)技術(shù)問(wèn)題的燕窩抗氧化肽的制備步驟(5)是可以不被選擇進(jìn)行的，則本發(fā)明第二個(gè)技術(shù)問(wèn)題的燕窩抗氧化肽存在于溶液中；也可以選擇進(jìn)行該步驟(5)，使得本發(fā)明第一方面的燕窩活性肽以固體形式存在。

26、優(yōu)選的，所述的步驟(5)中，對(duì)分離后的溶液進(jìn)行濃縮、干燥，優(yōu)選干燥的方式為冷凍干燥。

27、本發(fā)明為解決上述第三個(gè)技術(shù)問(wèn)題所采取的技術(shù)方案為：一種燕窩抗氧化肽的應(yīng)用，即：gly-gln-arg-cys-asp-trp(gqrcdw)對(duì)dpph自由基(ic501.17mg/ml)和abts自由基(ic50?0.24mg/ml)具有良好的清除作用。gqrcdw具有安全無(wú)毒副作用、抗氧化活性強(qiáng)和易于吸收等優(yōu)點(diǎn)，可以作為藥品、食品和化妝品等的成分添加。

28、本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明從燕窩中提取了一種燕窩抗氧化肽：gly-gln-arg-cys-asp-trp(gqrcdw)，并提供了該燕窩抗氧化肽的制備方法和用途，其發(fā)明工藝科學(xué)合理，使用方便，可作為藥品、食品和化妝品等的成分添加，顯著擴(kuò)大了燕窩的應(yīng)用范圍。

技術(shù)特征：

1.一種燕窩抗氧化肽，其特征在于，所述的燕窩肽的氨基酸序列為gly-gln-arg-cys-asp-trp，ms測(cè)定分子量為763.75da。

2.如權(quán)利要求1所述的燕窩抗氧化肽，其特征在于，其通過(guò)如下步驟的制備方法制備：

3.如權(quán)利要求1所述的燕窩抗氧化肽，其特征在于，所述的步驟(1)中的粉碎方法是干燕窩的粉碎機(jī)粉碎或濕燕窩的均質(zhì)機(jī)均質(zhì)。

4.如權(quán)利要求1所述的燕窩抗氧化肽，其特征在于，所述的步驟(2)中的變性方法是物理變性或者化學(xué)變性。

5.如權(quán)利要求1所述的燕窩抗氧化肽，其特征在于，所述的步驟(2)中的變性方法是加熱，加熱的溫度為95-100℃，時(shí)間為20-40分鐘。

6.如權(quán)利要求1所述的燕窩抗氧化肽，其特征在于，所述的步驟(3)中的蛋白酶為胃蛋白酶、胰蛋白酶、動(dòng)物蛋白水解酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、堿性蛋白酶、基質(zhì)蛋白酶、風(fēng)味酶中的任意一種或者兩種以上的組合。

7.如權(quán)利要求1所述的燕窩抗氧化肽，其特征在于，所述的步驟(3)中的蛋白酶為堿性蛋白酶和/或木瓜蛋白酶；酶解的溫度為25-60℃；酶解的時(shí)間為1-6小時(shí)。

8.如權(quán)利要求1所述的燕窩抗氧化肽，其特征在于，所述的步驟(4)中的分離是過(guò)濾、超濾、離心、層析、透析、色譜中的任意一種或者兩種以上的組合。

9.權(quán)利要求1-8中任一所述的燕窩抗氧化肽的用途，其特征在于，gly-gln-arg-cys-asp-trp在制備食品、化妝品或藥品中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了一種燕窩抗氧化肽及其制備方法和用途。其特征在于：該燕窩抗氧化肽為六肽，氨基酸序列為Gly?Gln?Arg?Cys?Asp?Trp(GQRCDW),其分子量為763.75Da。其制備方法包括粉碎、變性、酶解、分離等步驟。GQRCDW具有較強(qiáng)的自由基清除活性和良好的脂質(zhì)過(guò)氧化抑制等抗氧化作用，可作為藥品、特殊食品或食品添加劑以及化妝品等進(jìn)行開(kāi)發(fā)。

技術(shù)研發(fā)人員：楊樹(shù)旺
受保護(hù)的技術(shù)使用者：廣西中寶澤瑞生物技術(shù)有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/10/21