燒傷愈合膏的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種燒傷愈合膏。
【背景技術(shù)】
[0002] 重組人表皮細(xì)胞生長因子（rh-EGF)是近年來開發(fā)并應(yīng)用于燒傷創(chuàng)面治療的一種 生長因子，研究認(rèn)為rh-EGF可刺激多種細(xì)胞的增殖，主要是表皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等，促進(jìn)新 生肉芽組織形成和創(chuàng)面的再上皮化。對于深I(lǐng)I度及以上程度的燒傷，由于傷及皮膚深層和 部分網(wǎng)狀層以及皮膚附件，創(chuàng)面在愈合過程中，壞死組織的持續(xù)存在，過度炎癥反應(yīng)以及創(chuàng) 面繼發(fā)感染，不僅阻礙了 rh-EGF與肉芽組織的接觸，同時感染分泌物中酶的降解作用也會 降低rh-EGF的生物活性，阻礙了創(chuàng)面的愈合。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種將rh-EGF與多種中藥材加以復(fù)配而成的燒 傷愈合膏，該藥膏可有效抑菌，幫助rh-EGF迅速滲入創(chuàng)面并提高rh-EGF的生物活性，起到 快速愈合創(chuàng)面的作用，對深度燒傷尤為有效。
[0004] 本發(fā)明提供的技術(shù)方案是燒傷愈合膏，由以下重量份的成分組成：rh_EGF 0. 01~0. 05份、撤欖油5~10份、三七5~15份、黃柏6~8份、茅草根8~12份、冬瓜 皮6~10份、綠茶5~10份、槐米8~15份、側(cè)柏葉5~12份。
[0005] 各成分的重量份為：rh-EGF 0. 02~0. 03份、橄欖油8~10份、三七5~8份、黃 柏6~8份、茅草根8~10份、冬瓜皮9~10份、綠茶5~8份、槐米8~12份、側(cè)柏葉 10~12份。
[0006] 其制備方法包括以下步驟：
[0007] 1)將配方量的三七、黃柏、茅草根、冬瓜皮、綠茶、槐米和側(cè)柏葉粉碎，得到粗粉；
[0008] 2)按罐組動態(tài)逆流提取工藝提取，以罐數(shù)3~5為一批次，將上述粗粉投入每罐 中，加入粗粉10~20倍重量的水，加熱至75~100°C，保溫提取30~60分鐘，收集提取液 到儲罐，經(jīng)過多級動態(tài)循環(huán)逆流提取后，合并提取液；
[0009] 3)提取液經(jīng)離心過濾后，濃縮至相對密度為1. 03~1. 05的浸膏；
[0010] 4)將配方量的rh-EGF與步驟3)中的浸膏混合，加入橄欖油，調(diào)勻，即為燒傷愈合 膏。
[0011] 本發(fā)明具有以下有益效果：
[0012] 1、本發(fā)明選用三七、黃柏、茅草根、冬瓜皮、綠茶、槐米和側(cè)柏葉，并以橄欖油為基 質(zhì)，與rh-EGF復(fù)配制成燒傷愈合膏，這些中草藥組分以及橄欖油基質(zhì)中均含有大量的槲皮 素，在燙傷早期可較好地控制壞死組織，抑制炎細(xì)胞浸潤，還可以通過減少壞死物中酶的降 解作用，保持rh-EGF的生物活性，通過收斂降低燒傷燙傷早期高滲出，避免rh-EGF透過壞 死組織間接作用于創(chuàng)面，使rh-EGF在直接切持續(xù)性接觸中更好的發(fā)揮生物活性，從而起到 加快創(chuàng)面愈合的效果。對于深I(lǐng)I度及以上程度的燒傷，尤為有效。
[0013] 2、本發(fā)明采用罐組動態(tài)逆流提取工藝可充分提取三七、黃柏、茅草根、冬瓜皮、綠 茶、槐米和側(cè)柏葉中的槲皮素，可大大增強燒傷愈合膏的藥效，大幅縮短創(chuàng)面愈合周期。
【具體實施方式】
[0014] 以下具體實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但不作為對本發(fā)明的限定。
[0015] 實施例1
[0016] 配方：rh-EGF 0.01份、橄欖油5份、三七5份、黃柏6份、茅草根8份、冬瓜皮6份、 綠茶5份、槐米8份、側(cè)柏葉5份。
[0017] 制備方法：
[0018] 1)將三七、黃柏、茅草根、冬瓜皮、綠茶、槐米和側(cè)柏葉粉碎，得到粗粉；
[0019] 2)按罐組動態(tài)逆流提取工藝提取，以罐數(shù)3為一批次，將上述粗粉投入每罐中，加 入粗粉10倍重量的水，加熱至75°C，保溫提取30分鐘，收集提取液到儲罐，經(jīng)過多級動態(tài)循 環(huán)逆流提取后，合并提取液；
[0020] 3)提取液經(jīng)離心過濾后，濃縮至相對密度為1. 03的浸膏；
[0021] 4)將配方量的rh-EGF與步驟3)中的浸膏混合，加入橄欖油，調(diào)勻，即為燒傷愈合 膏。
[0022] 實施例2
[0023] 配方：rh-EGF 0. 05份、橄欖油10份、三七15份、黃柏8份、茅草根12份、冬瓜皮 10份、綠茶10份、槐米15份、側(cè)柏葉12份。
[0024] 制備方法：
[0025] 1)將三七、黃柏、茅草根、冬瓜皮、綠茶、槐米和側(cè)柏葉粉碎，得到粗粉；
[0026] 2)按罐組動態(tài)逆流提取工藝提取，以罐數(shù)5為一批次，將上述粗粉投入每罐中，加 入粗粉20倍重量的水，加熱至100°C，保溫提取60分鐘，收集提取液到儲罐，經(jīng)過多級動態(tài) 循環(huán)逆流提取后，合并提取液；
[0027] 3)提取液經(jīng)離心過濾后，濃縮至相對密度為1. 05的浸膏；
[0028] 4)將配方量的rh-EGF與步驟3)中的浸膏混合，加入橄欖油，調(diào)勻，即為燒傷愈合 膏。
[0029] 實施例3
[0030] 配方：rh-EGF 0. 02份、橄欖油8份、三七5份、黃柏6份、茅草根8份、冬瓜皮9份、 綠茶5份、槐米8份、側(cè)柏葉10份。
[0031] 制備方法：
[0032] 1)將三七、黃柏、茅草根、冬瓜皮、綠茶、槐米和側(cè)柏葉粉碎，得到粗粉；
[0033] 2)按罐組動態(tài)逆流提取工藝提取，以罐數(shù)4為一批次，將上述粗粉投入每罐中，加 入粗粉15倍重量的水，加熱至85°C，保溫提取45分鐘，收集提取液到儲罐，經(jīng)過多級動態(tài)循 環(huán)逆流提取后，合并提取液；
[0034] 3)提取液經(jīng)離心過濾后，濃縮至相對密度為1. 04的浸膏；
[0035] 4)將配方量的rh-EGF與步驟3)中的浸膏混合，加入橄欖油，調(diào)勻，即為燒傷愈合 膏。
[0036] 實施例4
[0037] 配方：rh-EGF 0.03份、橄欖油10份、三七8份、黃柏8份、茅草根10份、冬瓜皮10 份、綠茶8份、槐米12份、側(cè)柏葉12份。
[0038] 制備方法：
[0039] 1)將三七、黃柏、茅草根、冬瓜皮、綠茶、槐米和側(cè)柏葉粉碎，得到粗粉；
[0040] 2)按罐組動態(tài)逆流提取工藝提取，以罐數(shù)4為一批次，將上述粗粉投入每罐中，加 入粗粉15倍重量的水，加熱至85°C，保溫提取45分鐘，收集提取液到儲罐，經(jīng)過多級動態(tài)循 環(huán)逆流提取后，合并提取液；
[0041] 3)提取液經(jīng)離心過濾后，濃縮至相對密度為1. 04的浸膏；
[0042] 4)將配方量的rh-EGF與步驟3)中的浸膏混合，加入橄欖油，調(diào)勻，即為燒傷愈合 膏。
[0043] 為了驗證本發(fā)明藥物的療效，進(jìn)行以下動物實驗。
[0044] 1、實驗動物
[0045] 健康成年新西蘭大白兔20只，體重為2. 0±0. 5kg，雌雄不計，于25°C、50%濕度環(huán) 境下分籠飼養(yǎng)。
[0046] 2、實驗方法
[0047] 2. 1動物燒傷模型的建立
[0048] 實驗前一周，于25°C、50%濕度環(huán)境下單籠飼養(yǎng)，自由攝食飲水。新西蘭大白兔稱 重后以2%戊巴比妥鈉（30mg/kg)耳緣靜脈注射麻醉，起效后，剪短背部毛，8%硫化鈉脫 毛，溫?zé)崴疀_洗殘留于皮膚上的硫化鈉，以35層醫(yī)用紗布為熱載體，恒溫?zé)崴≈屑訜嶂?99°C保持15s，分別于兔脊柱兩側(cè)各制作1個圓形、深I(lǐng)I度燙傷創(chuàng)面，創(chuàng)面直徑3. 0cm，創(chuàng)緣 間距保持2cm，使創(chuàng)面與創(chuàng)周正常皮膚形成明顯分界。傷后病例學(xué)觀察證實為深I(lǐng)I度燙傷， 燙傷后Ih腹腔注射生理鹽水30ml/kg抗休克，分組用藥，予以凡士林紗布瘋愛，無菌敷料包 扎后麻醉復(fù)蘇。
[0049] 2. 2實驗分組與給藥方案
[0050] 采用自身對照研究方法，將20只新西蘭大白兔脊柱左側(cè)的創(chuàng)面分為實驗組，將右 側(cè)的創(chuàng)面分為對照組。實驗組使用實施例3的藥物，對照組使用重組人表皮生長因子凝膠 (配方：重組人表皮生長因子10~l〇〇y g/g，卡波姆2. 8%，甘油20%，聚乙二醇10%、羥 苯乙酯0. 8%、甘露醇2%，注射用水至100% )。每組均勻涂抹藥物厚度約2~3mm，凡士林 紗布覆蓋后無菌敷料包扎，外用膠布纏繞固定，每天下午3點定時更換一次，觀察并記錄創(chuàng) 面情況。
[0051] 3、檢測指標(biāo)及方法
[0052] 3. 1創(chuàng)面大體觀察
[0053] 每天下午3點更換藥物時，肉眼觀察并記錄實驗動物各組創(chuàng)面滲出、創(chuàng)緣紅腫等 反應(yīng)、痂殼脫落及上皮形成情況。
[0054] 3. 2創(chuàng)面愈合率
[0055] 麻醉狀態(tài)下，以透明網(wǎng)格紙描出所有燙傷模型分組創(chuàng)面用藥前的圖形，計算原創(chuàng) 面面積，于燙傷后第4d、第7d、第10d、第14d，分別再次用透明網(wǎng)格紙描出被隨機(jī)選取的10 只新西蘭大白兔處死后的分組創(chuàng)面圖形并計算面積，為剩余創(chuàng)面面積。創(chuàng)面愈合率=(原 創(chuàng)面面積-剩余創(chuàng)面面積）/原創(chuàng)面面積X 100 %。
[0056] 3. 2組織學(xué)觀察及痂下細(xì)菌定量分析
[0057] 于燙傷后第4d、第7d、第10d、第14d，隨機(jī)選取5只兔子，采用無菌術(shù)取痂下組 織lg，置于無菌試管中，加入1ml無菌生理鹽水，以電動組織勻漿器，將組織制成勻漿液， 100倍梯度稀釋，取〇. Iml稀釋液與熔融狀態(tài)的營養(yǎng)瓊脂混勻，37°C孵育24h，計算平板上 生長的總菌落，計算公式：每g組織細(xì)菌含量（cfu/g)=菌落數(shù)（cfu) X稀釋倍數(shù)（100) + 組織重量（Ig)。以每g組織細(xì)菌含量> IX 105cfu/g判定為陽性，以每g組織細(xì)菌含量 < lX105cfu/g判定為陰性進(jìn)行比較。
[0058] 4、結(jié)果
[0059] 表1 :兩組創(chuàng)面觀察結(jié)果

[0067] 實驗組燙傷后第4d時細(xì)菌數(shù)量開始減少，而對照組第7d才開始減少，燙傷后第 14d，兩組細(xì)菌大部分被機(jī)體自身清除。
【主權(quán)項】
1. 燒傷愈合膏，其特征在于：由以下重量份的成分組成：rh-EGF 0.0 l~0. 05份、橄欖 油5~10份、三七5~15份、黃柏6~8份、茅草根8~12份、冬瓜皮6~10份、綠茶5~ 10份、槐米8~15份、側(cè)柏葉5~12份。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的燒傷愈合膏，其特征在于：各成分的重量份為：rh-EGF 0. 02~0. 03份、橄欖油8~10份、三七5~8份、黃柏6~8份、茅草根8~10份、冬瓜皮 9~10份、綠茶5~8份、槐米8~12份、側(cè)柏葉10~12份。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的燒傷愈合膏，其特征在于：其制備方法包括以下步驟： 1) 將配方量的三七、黃柏、茅草根、冬瓜皮、綠茶、槐米和側(cè)柏葉粉碎，得到粗粉； 2) 按罐組動態(tài)逆流提取工藝提取，以罐數(shù)3~5為一批次，將上述粗粉投入每罐中，加 入粗粉10~20倍重量的水，加熱至75~KKTC，保溫提取30~60分鐘，收集提取液到儲 罐，經(jīng)過多級動態(tài)循環(huán)逆流提取后，合并提取液； 3) 提取液經(jīng)離心過濾后，濃縮至相對密度為1. 03~1. 05的浸膏； 4) 將配方量的rh-EGF與步驟3)中的浸膏混合，加入橄欖油，調(diào)勻，即為燒傷愈合膏。
【專利摘要】本發(fā)明提供一種燒傷愈合膏，由以下重量份的成分組成：rh-EGF0.01～0.05份、橄欖油5～10份、三七5～15份、黃柏6～8份、茅草根8～12份、冬瓜皮6～10份、綠茶5～10份、槐米8～15份、側(cè)柏葉5～12份。該藥膏可有效抑菌，幫助rh-EGF迅速滲入創(chuàng)面并提高rh-EGF的生物活性，起到快速愈合創(chuàng)面的作用，對深度燒傷尤為有效。
【IPC分類】A61K38/18, A61K36/32, A61K36/42, A61K36/258, A61K36/489, A61K36/756, A61P17/02, A61K47/46, A61K9/06, A61K36/82, A61K36/14, A61K36/899
【公開號】CN105031617
【申請?zhí)枴緾N201510377609
【發(fā)明人】韋忠明, 黃啟斌, 莫冬海, 唐申秀, 包能創(chuàng), 秦芳
【申請人】桂林華諾威基因藥業(yè)有限公司
【公開日】2015年11月11日
【申請日】2015年6月30日