專利名稱：Ace－抑制劑硝酸鹽的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有抗高血壓活性兼有抗血小板凝聚活性的產(chǎn)品，及其藥用組合物。
具體地說，本發(fā)明涉及與目前市售的抗高血壓藥劑產(chǎn)品相比具有較好的抗高血壓活性和較少的副作用(尤其在支氣管方面)的產(chǎn)品?？垢哐獕夯钚允桥c抗血小板凝聚活性有關(guān)的。
本領(lǐng)域中已知抗高血壓藥劑。特別是ACE抑制劑，其在心血管疾病如高血壓、心絞痛、心肌缺血、充血性心力衰竭等的治療中代表首選的藥物學(xué)措施。ACE抑制劑作用于腎素-血管緊張素系統(tǒng)，該系統(tǒng)釋放血管緊張素II，其是已知最有效的升壓劑之一。更確切地說，這些藥物抑制血管緊張素轉(zhuǎn)化酶的活性，該酶是主要存在于肺、腎和血管中的一種羧肽酶。這種酶的作用是非特異性的。它滅活血漿緩激肽，緩激肽具有血管舒張活性，并且也有助于利尿，尤其是促尿鈉排出。換言之，血漿緩激肽具有與血管緊張素II相反的作用。因此，ACE抑制劑阻止血管緊張素II的形成，同時阻止緩激肽的降解。因而，ACE抑制劑肯定代表了過去幾十年最重要的藥理學(xué)創(chuàng)新之一。
然而，ACE抑制劑的應(yīng)用常常伴有呼吸系統(tǒng)的副作用(大約病例的20-30％)，如咳嗽、呼吸困難、支氣管收縮。此外，這些藥物還顯示出頗受限制的治療模式，例如它們沒有抗血小板凝聚活性，所以在上述心血管疾病的治療中，它們常與其它的具有抗血小板凝聚活性的藥物聯(lián)合使用。例如，在心肌梗塞的治療和復(fù)發(fā)的預(yù)防中，需要采用多種心血管藥物治療，其中包括抗高血壓藥與抗凝劑的聯(lián)合使用。
因此需要有較好的治療效果和較少副作用(尤其是呼吸系統(tǒng)，如支氣管副作用)的藥物。
本申請人意外和驚奇地發(fā)現(xiàn)一類特殊的ACE-抑制劑鹽，其特征在于這一事實，即與同樣化合物的其它鹽相比，它們具有較好的抗高血壓活性和較少的支氣管的副作用。
因此，本發(fā)明的目標的是具有下式的ACE抑制劑的硝酸鹽
在式(I)中
或N-CH3；Y＝CH3、苯基；RIII＝H，RIII與RIV一起形成在4位碳上的下列環(huán)
RIII與RV一起(在4和5位碳上)形成環(huán)己烷或環(huán)戊烷環(huán)
RIV＝H，或RIV和RIII形成環(huán)(IVa)；RV＝H，或一個自由價，或者RV和RIII形成環(huán)(IIIa)或(IIIb)；當RV是一個自由價時，RIV＝H或一個單鍵-O，以便與5位的碳原子形成酮基團。
優(yōu)選的式(I)的硝酸鹽包括當如上述所定義的X＝C(RIII)(RIV)時，Y＝苯基，RIII＝RIV＝RV＝RVI＝H，所述依那普利(Enalapril)的殘基；如在依那普利中那樣，但是RIII與RIV一起形成環(huán)(IVa)，所述斯哌普利(Spirapril)的殘基；如在依那普利中那樣，但是RIII與RV一起形成環(huán)(IIIb)，所述雷米普利的殘基；如在依那普利中那樣，但是Y＝CH3，并且RIII與RV一起形成環(huán)(IIIa)，所述培哚普利(Perindopri1)的殘基；如在依那普利中那樣，但是X＝N-CH3，RV是一個自由價和RIV＝-O，以便與碳原子C5形成酮基團，所述咪噠普利的殘基。
本發(fā)明的這類化合物(其為所述鹽的前體)是作為旋光活性的單一異構(gòu)體或作為其混合物或者以外消旋體的形式使用的。
已知類型II的前體稱作賴諾普利，類型III的前體稱作阿拉普利。按照在“The Mercx Index，Ed.12”中所描述的方法制備所述前體，該文通過引用結(jié)合到本文中。
按照下列方法制備本發(fā)明的所述鹽。將待成鹽的物質(zhì)溶于不含有分子游離羥基基團的有機溶劑中，然后加入化學(xué)計量的濃硝酸。通過過濾回收所述鹽，并用溶劑(如在反應(yīng)中所使用的溶劑)洗滌幾次。優(yōu)選極性有機溶劑，例如，乙腈、乙酸乙酯等等。
已驚奇地發(fā)現(xiàn)，與同樣的物質(zhì)和普通ACE鹽相比，本發(fā)明的所述化合物改善了上述ACE抑制劑的藥理學(xué)模式，并且顯示了更為滿意的全身和局部的可耐受性。
本發(fā)明的所述化合物能作為心血管藥物使用，具體地說，能用于高血壓、心絞痛、心肌缺血、充血性心力衰竭的治療。
按照本領(lǐng)域技術(shù)人員已熟知的方法，例如在Remington’sPharmaceutical Science，Ed.15中所描述的方法，將本發(fā)明的所述鹽配制成相應(yīng)的藥用組合物。
以下實施例意味著對本發(fā)明的描述，而不應(yīng)理解為限制本發(fā)明。實施例1(S)-1-[N-[1-(乙氧羰基)-3-苯丙基]-L-丙氨酰基]-L-脯氨酸(依那普利)的合成，和乙腈中硝酸鹽的獲得在室溫下用氰基氫硼化鈉(0.4g)的乙醇/水1/1的溶液緩慢處理乙基-2-氧代-4-苯基丁酸酯(2.1g)和L-丙氨酰基-L-脯氨酸(0.4g)的乙醇/水1/1的混合物。
在反應(yīng)結(jié)束時，將該產(chǎn)物吸收在強酸離子交換樹脂上，并用含有2％(v/v)吡啶的水溶液洗脫。冷凍干燥含有該產(chǎn)物的部分，獲得粗制化合物。然后層析使分離的所需異構(gòu)體(-)純化(0.24g)。
然后將該異構(gòu)體溶于乙腈中，并用溶于乙腈中的化學(xué)計量的濃硝酸處理，維持該反應(yīng)物在冰浴中。冷卻和過濾后，用冷乙腈洗滌該固體，回收97％-純的(H-PLC高壓液相層析)依那普利硝酸鹽。通過從乙腈中結(jié)晶可獲得99％-純的(HPLC)鹽。實施例2依那普利的合成，和乙酸乙酯中硝酸鹽的獲得在室溫和大約3個大氣壓下將乙基-2-氧代-4-苯基丁酸酯(15g)、L-丙氨酰基-L-脯氨酸(9g)、3A°分子篩(40g)和阮內(nèi)鎳(10.8g)的乙醇(300ml)混合物氫化，直到氫不再被消耗。在不溶解的物質(zhì)濾出后(用乙醇充分洗滌)，真空下蒸發(fā)該溶劑，獲得85％由所需產(chǎn)物形成的非對映異構(gòu)體的混合物(通過HPLC)。將獲得的產(chǎn)物溶于200ml水和70ml乙酸甲酯制成的混合物中。持續(xù)攪拌該溶液，用50％NaOH調(diào)節(jié)pH至8.6。分離有機相，并用乙酸乙酯(3×50ml)充分洗滌含水相。用鹽酸調(diào)節(jié)該含水相至pH4.3，用氯化鈉飽和，然后用乙酸乙酯(4×100ml)萃取。在用硫化鈉干燥和真空蒸發(fā)該溶劑以后，將殘余物溶于乙酸乙酯中，維持該反應(yīng)物在冰浴中，通過用化學(xué)計量的濃硝酸處理成鹽。攪拌2小時后，將其冷卻、過濾、用乙酸乙酯洗滌并從乙腈中再結(jié)晶，獲得12.5g大約99％-純(通過HPLC)的硝酸鹽異構(gòu)體(-)。實施例3急性毒性試驗一組10只小鼠(體重15到25g)接受100mg/Kg的單次口服劑量。在觀察期間(14天)所有動物均存活。沒有觀察到毒性癥狀。實施例4抗高血壓活性按照Laubie等的方法(J.Cardiovasc.Pharmacol.6，1076，1984年)測定本發(fā)明化合物硝酸鹽的抗高血壓活性。每個試驗組采用6只體重約200到250g的大鼠。共分四組，如下所示，每組分別腹腔內(nèi)給予-依那普利馬來酸鹽 100μg/Kg-依那普利馬來酸鹽 300μg/Kg-依那普利硝酸鹽100μg/Kg-依那普利硝酸鹽300μg/Kg該劑量是參照依那普利(陽離子)在鹽中的量。如以上文章中所描述的，通過靜脈注射給予100μg/Kg劑量的血管緊張素I誘導(dǎo)高血壓，以高血壓抑制的百分比來評估抗高血壓作用。
結(jié)果顯示于表I表I化合物 劑量血管緊張素I誘導(dǎo)的(μg/Kg/i.p.) 高血壓抑制％依那普利馬來酸鹽100 18依那普利馬來酸鹽300 55依那普利硝酸鹽 100 35依那普利硝酸鹽 300 67實施例5本發(fā)明的鹽對由給予P物質(zhì)而誘導(dǎo)的支氣管痙攣的藥理學(xué)作用按照Subissi等(Br.J.Pharmacol.100，502-6，1990年)確立的方法，通過測定由P物質(zhì)誘導(dǎo)的支氣管痙攣的強度來評估其活性。Subissi描述的模型可預(yù)測因給予ACE抑制劑而引起的支氣管副作用。
四組雌性豚鼠(6只動物/組)，體重約300到400g，在人工壓力下以恒定的正壓用氨基甲酸乙酯(200mg/Kg)麻醉。在給予P物質(zhì)以前30分鐘腹腔內(nèi)給予所述化合物。給予的所述鹽的劑量與實施例4中的相同。然后按照Konzett的方法(Arch.Exp.Pathol.Pharmacol.195，71，1940年)，在給予P物質(zhì)(200μg/Kg)以前和以后，使用或未使用受試鹽(即依那普利馬來酸鹽和硝酸鹽)，測定潮氣流(tidal air)的變化。
結(jié)果顯示于表II從數(shù)據(jù)中可以看出，在兩個試驗劑量中，依那普利硝酸鹽均比依那普利馬來酸鹽具有更好的呼吸效用。
表II化合物 劑量P物質(zhì)誘導(dǎo)的支氣管(μg/Kg/i.p.) 痙攣中潮流氣變化％依那普利馬來酸鹽100 +16依那普利馬來酸鹽300 +28依那普利硝酸鹽 100 -5依那普利硝酸鹽 300 -7實施例6抗血小板凝聚活性采用Pinon等描述的活體模型(J.Pharm.Methods 12，79-84，1984年)。
兩組大鼠，每組6只，體重約200到250g，分別口服給予10mg/Kg/日劑量的依那普利馬來酸鹽或硝酸鹽(該劑量參照依那普利陽離子在鹽中的量)進行處理，連續(xù)5天，而第三組作為對照組。在最后一次給藥前大約18小時，動物禁食。這次給藥后1小時，用10％氨基甲酸乙酯(1g/Kg腹腔內(nèi)注射)麻醉動物，在左頸靜脈和右頸動脈中插管。然后以2mg/Kg的劑量靜脈給予膠原蛋白(6型，Sigma)。三分鐘后，從每只動物的頸動脈采集兩個血樣，A和B。
將1.6ml的EDTA/福爾馬林緩沖液(24mMEDTA四鈉鹽、1.3mM KH2PO4、13.4mM Na2HPO4)加入到第一個含有0.4ml血液的樣本(樣本A)中。
第二個血樣(樣本B)具有與前一樣本相同的體積(0.4ml血液)，但是加入1.6ml的生理鹽水(生理NaCl溶液)來代替緩沖液。
然后將所述樣本轉(zhuǎn)移到5-ml試管中，并允許在室溫放置15分鐘。
然后進行顯微鏡血小板計數(shù)。樣本B和A中的血小板計數(shù)分別代表血小板的總數(shù)和凝聚的血小板的總數(shù)。結(jié)果顯示于表III，以血小板凝聚的％表示，并且參照對照組中獲得的％值。
表III化合物 劑量/die抗凝聚活性％(mg/Kg/os)依那普利馬來酸鹽10 5依那普利硝酸鹽 10 58
權(quán)利要求
1.具有下式的ACE抑制劑的硝酸鹽
在式(I)中
或N-CH3；Y＝CH3、苯基；RIII＝H，RIII與RIV一起形成在4位碳上的下列環(huán)
RIII與RV一起(在4和5位碳上)形成環(huán)己烷或環(huán)戊烷環(huán)
RIV＝H，或RIV和RIII形成環(huán)(IVa)；RV＝H，或一個自由價，或者RV和RIII形成環(huán)(IIIa)或(IIIb)；當RV是一個自由價時，RIV＝H或單鍵-O，以便與5位的碳原子形成酮基團。
2.按照權(quán)利要求1的硝酸鹽，其中，在式(I)中，X＝C(RIII)(RIV)，Y＝苯基，RIII＝RIV＝RV＝RVI＝H，所述依那普利的殘基；如在依那普利中那樣，但是RIII與RIV一起形成環(huán)(IVa)，所述斯哌普利(Spirapril)的殘基；如在依那普利中那樣，但是RIII與RV一起形成環(huán)(IIIb)，所述雷米普利的殘基；如在依那普利中那樣，但是Y＝CH3，并且RIII與RV一起形成(IIIa)，所述培哚普利(Perindopril)的殘基；如在依那普利中那樣，但是X＝N-CH3，RV是一個自由價和RIV＝-O，以便與碳原子C5形成一個酮基團，所述咪噠普利的殘基。
3.按照權(quán)利要求2的硝酸鹽，其中，在式(I)中，X＝C(RIII)(RIV)，Y＝苯基，RIII＝RIV＝RV＝RVI＝H，所述依那普利的殘基。
4.按照權(quán)利要求1到3的硝酸鹽，用于制備作為抗高血壓藥的藥用組合物。
5.按照權(quán)利要求1到3的硝酸鹽，用于制備作為抗凝劑的藥用組合物。
6.按照權(quán)利要求1到3的硝酸鹽，用于制備作為抗高血壓和抗凝劑的藥用組合物。
7.按照權(quán)利要求1到3的硝酸鹽，用于制備作為治療高血壓、心絞痛、心肌缺血、充血性心力衰竭的心血管藥的藥用組合物。
全文摘要
具有式(Ⅰ)、(Ⅱ)、(Ⅲ)的Ace－抑制劑硝酸鹽。
文檔編號A61P9/12GK1260780SQ98806276
公開日2000年7月19日 申請日期1998年6月24日 優(yōu)先權(quán)日1997年6月27日
發(fā)明者P·德爾索達托 申請人:尼科克斯公司