本發(fā)明屬于醫(yī)藥，具體涉及苯基氨基嘧啶化合物在制備wrn抑制劑中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、在精準(zhǔn)醫(yī)療時代，發(fā)現(xiàn)和利用合成致死相互作用一直是開發(fā)新的抗癌療法的主要目標(biāo)之一。合成致死是指一種基因的遺傳或表觀遺傳改變使細(xì)胞完全依賴另一種基因來生存，靶向第二個基因可以殺死突變的癌細(xì)胞，而使正常細(xì)胞基本不受影響(o'neil?nigelj,et?al.nature?reviews.genetics,2017,18(10):613-623.)。

2、dna修復(fù)機(jī)制是合成致死熱門的靶點之一，因為多種癌癥在dna修復(fù)途徑中存在遺傳缺陷，dna錯配修復(fù)(mmr)可以在dna復(fù)制過程中識別和修復(fù)自發(fā)錯配的堿基，微衛(wèi)星不穩(wěn)定性(msi)是由mmr受損引起的，與廣泛的癌癥相關(guān)，最常發(fā)生于結(jié)腸、胃、卵巢和子宮內(nèi)膜腫瘤中。wrn是dna解旋酶recq家族的成員之一，是唯一一種同時具有解旋酶和外切酶結(jié)構(gòu)域的recq酶，在維持基因組穩(wěn)定性，dna修復(fù)、復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和端粒維持方面發(fā)揮著重要作用。wrn解旋酶在dna損傷的同源重組(hr)介導(dǎo)的復(fù)制叉重啟和防止復(fù)制叉崩潰中發(fā)揮著重要作用(shibani?mukherjee,et?al.international?journal?of?molecular?sciences,2018,19(11).)，是dmmr/msi-h癌癥的合成致死靶點，在結(jié)直腸癌細(xì)胞系中具有很高的敏感性。

3、wrn解旋酶是通過特定的高擴(kuò)增微衛(wèi)星重復(fù)序列進(jìn)行dna復(fù)制所必需的(vanwietmarschen?niek,et?al.nature,2020,586(7828):292-298.)，wrn缺失導(dǎo)致msi細(xì)胞中高水平的dna損傷(dsbs)(andres?canela,et?al.molecular?cell,2016,63(5).)，在不同的msi細(xì)胞系中，dsbs恰好發(fā)生在分散在整個基因組中的數(shù)千個(ta)n二核苷酸重復(fù)序列中，并且(ta)n重復(fù)序列位置高度保守。與重復(fù)擴(kuò)增相關(guān)的其他疾病中觀察到的相似，這些(ta)n二核苷酸重復(fù)序列確定是非典型的dna結(jié)構(gòu)(khristich?alexandra?n,et?al.thejournal?of?biological?chemistry,2020,295(13).)，已經(jīng)有研究表明，長(ta)n重復(fù)序列可以折疊成十字形結(jié)構(gòu)(simran?kaushal,charles?e,et?al.cell?reports,2019,27(4).)，因此猜想wrn是解開十字形dna的必要條件，以防止復(fù)制叉在這些位點上停滯或崩潰。并且十字形dna在msi細(xì)胞系中特異性形成，在mss細(xì)胞系中沒有發(fā)現(xiàn)(ta)n重復(fù)。

4、使用化療治療癌癥的一個主要問題是細(xì)胞可能對藥物產(chǎn)生耐藥性，有研究在60個耐藥性結(jié)直腸癌實驗?zāi)Ｐ椭羞M(jìn)行了wrn基因敲除，證明wrn依賴性是耐藥性結(jié)直腸癌的突出特征(picco?gabriele,et?al.cancer?discovery,2021.)，顯示了針對dmmr/msi-h結(jié)直腸癌患者的wrn基因的治療潛力，靶向wrn基因有望幫助開發(fā)治療耐藥性結(jié)直腸癌的新型靶向療法。

5、目前研究已經(jīng)清楚地確定了wrn作為msi癌癥的治療靶點，wrn抑制劑可以有效地治療msi癌癥，同時最大限度地減少潛在的副作用。因此開發(fā)新的wrn抑制劑對擴(kuò)展msi癌癥治療策略很有必要。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明通過研究證實，式(i)所示苯基氨基嘧啶化合物，特別是化合物2c2和14c9，可以直接與wrn蛋白結(jié)合，并抑制wrn蛋白解旋雙鏈dna，因此其可以作為靶向wrn的小分子抑制劑。

2、基于此，第一方面，本發(fā)明提供式(i)所示苯基氨基嘧啶化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備wrn抑制劑中的應(yīng)用：

3、

4、式(i)中，

5、x選自c(＝o)nh、nh、o或s；

6、n選自1、2、3或4；

7、y不存在，或y為nh、o或s；

8、r1選自氫、c1-c4烷基；

9、r2選自氫、c1-c4烷基、

10、在具體的實施方式中，式(i)中，

11、x選自c(＝o)nh或nh；

12、n為2或3；

13、y不存在，或y為nh；

14、r1選自氫或甲基；

15、r2選自氫、甲基、

16、在具體的實施方式中，所述式(i)所示苯基氨基嘧啶化合物選自如下結(jié)構(gòu)：

17、

18、本發(fā)明第二方面，提供上述式(i)所示苯基氨基嘧啶化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備治療和/或預(yù)防m(xù)si(微衛(wèi)星不穩(wěn)定性)癌癥的藥物中的應(yīng)用，特別是在制備治療和/或預(yù)防dna錯配修復(fù)缺陷(dmmr)/微衛(wèi)星高度不穩(wěn)定(msi-h)癌癥的藥物中的應(yīng)用。

19、dmmr/msi-h突變在很多癌癥中都存在，例如結(jié)直腸癌、子宮內(nèi)膜癌、胃癌、肝癌、甲狀腺癌、壺腹癌及皮膚癌(黑色素瘤)、卵巢癌、宮頸癌、食管腺癌、軟組織瘤、頭頸癌、腎癌、鱗狀細(xì)胞皮膚癌，基底細(xì)胞皮膚癌、前列腺癌、肺癌、乳腺癌、骨肉瘤、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、胰腺導(dǎo)管腺瘤、膀胱癌及睪丸生殖細(xì)胞癌。本文所述msi-h/msi癌癥即包括上述癌癥疾病。

20、在具體的實施方式中，根據(jù)式(i)所示苯基氨基嘧啶化合物在制備治療和/或預(yù)防m(xù)si(微衛(wèi)星不穩(wěn)定性)癌癥的藥物中的應(yīng)用，其中，式(i)所示苯基氨基嘧啶化合物為化合物2c2和/或14c9。

21、如本文所用，“c1-c4烷基”是指完全飽和的直鏈或支鏈的含1-4個碳原子的一價烴基團(tuán)，包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基和叔丁基。本發(fā)明優(yōu)選為甲基、乙基、丙基，更優(yōu)選為甲基。

22、如本文所用，所述化合物藥學(xué)上可接受的鹽是指保持化合物的生物學(xué)效應(yīng)和性能的鹽，并且該鹽在生物學(xué)上或其它方面不是不被期望的。所述鹽的非限制性示例包括化合物的無毒的、無機(jī)或有機(jī)酸的加成鹽。由化合物他衍生得到鹽的無機(jī)酸包括例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，有機(jī)酸包括例如乙酸、丙酸、羥基乙酸、丙酮酸、草酸、馬來酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸等。

23、有益效果

24、本發(fā)明通過體外活性評價方法，發(fā)現(xiàn)化合物2c2和14c9可以與wrn蛋白直接結(jié)合，抑制其解旋雙鏈dna的活性。

技術(shù)特征：

1.式(i)所示苯基氨基嘧啶化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備wrn抑制劑中的應(yīng)用：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，式(i)中，

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述式(i)所示苯基氨基嘧啶化合物選自如下結(jié)構(gòu)：

4.式(i)所示苯基氨基嘧啶化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備治療和/或預(yù)防m(xù)si癌癥的藥物中的應(yīng)用：

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，式(i)中，

6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述式(i)所示苯基氨基嘧啶化合物選自如下結(jié)構(gòu)：

7.根據(jù)權(quán)利要求4-6任一項所述的應(yīng)用，其特征在于，所述msi癌癥為dna錯配修復(fù)缺陷/微衛(wèi)星高度不穩(wěn)定癌癥。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于，所述dna錯配修復(fù)缺陷/微衛(wèi)星高度不穩(wěn)定癌癥為結(jié)直腸癌、子宮內(nèi)膜癌、胃癌、肝癌、甲狀腺癌、壺腹癌及皮膚癌、卵巢癌、宮頸癌、食管腺癌、軟組織瘤、頭頸癌、腎癌、鱗狀細(xì)胞皮膚癌、基底細(xì)胞皮膚癌、前列腺癌、肺癌、乳腺癌、骨肉瘤、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、胰腺導(dǎo)管腺瘤、膀胱癌或睪丸生殖細(xì)胞癌。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，公開了苯基氨基嘧啶化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備WRN抑制劑中的應(yīng)用和其在制備治療和/或預(yù)防MSI癌癥的藥物中的應(yīng)用。其中，所述苯基氨基嘧啶化合物特別為化合物2C2和14C9，可以直接與WRN蛋白結(jié)合，并抑制WRN蛋白解旋雙鏈DNA，因此其可以作為靶向WRN的小分子抑制劑。

技術(shù)研發(fā)人員：鄭明月,蔣華良,張素林,張柯柯,楊天標(biāo),楊瑞瑞,樊子生
受保護(hù)的技術(shù)使用者：中國科學(xué)院上海藥物研究所
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/10/21