專利名稱：：一種具有抗疲勞和免疫調(diào)節(jié)作用的天參口服液的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及保健食品，具體地說涉及一種利用中草藥為原料制備的具有抗疲勞和免疫調(diào)節(jié)作用的天參口服液，適用于各類人群日常保健和病后、產(chǎn)后康復(fù)。背影技術(shù)目前按照國(guó)家1996年3月頒布的《保健食品管理辦法》中的規(guī)定，保健品應(yīng)該是以健康人、患各種疾病的人以及亞健康狀態(tài)人群為主要適宜人群，無毒副作用，能調(diào)節(jié)機(jī)體某種功能,不以治療為目的。在本發(fā)明提出之前，中國(guó)專利局曾經(jīng)公開了一種名稱為"冬蟲夏草飲料"，申請(qǐng)?zhí)枮?3123595的發(fā)明專利申請(qǐng)。該專利申請(qǐng)主要針對(duì)于補(bǔ)腎、提高免疫力和排毒解疲等多種功能。更適合對(duì)病后康復(fù)和體弱多病者使用。相對(duì)于廣普保健來說，作用范圍略顯局限。用于養(yǎng)生保健適用人群略顯狹隘。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明目的是為了解決上述背影技術(shù)存在的不足，提出一種由純植物提取成份制成的不含激素及人工合成物，益于人體吸收，適合健康人、患各種疾病的人以及亞健康狀態(tài)人群日常保健和病后、產(chǎn)后康復(fù)使用的具有抗疲勞和免疫調(diào)節(jié)作用的天參口服液。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。一種具有抗疲勞和免疫調(diào)節(jié)作用的天參口服液，其特征是，該口服液是由下述重量份配比的原料冬蟲夏草0.4—0.6、人參0.1—0.3、紅景天0.4—0.6、靈芝0.4—0.6、枸杞子0.9—1.1，按下述制備方法制備的產(chǎn)品，將上述原料中的冬蟲夏草、人參和紅景天潤(rùn)軟、切片后用乙醇提取有效成份，制成密度d-1.20的醇提膏；將上述原料中的枸杞子、靈芝和上述乙醇提取后剩余的藥渣一起用水煮的方法提取有效成份，制成密度d-1.20的水提膏；將上述醇提膏和水提膏混合，加入95%乙醇，調(diào)醇至75%以上，靜止取上清液，濃縮至d=1.20成精制原膏備用；將精制原膏加水調(diào)成密度d4.10，過濾，除盡樹脂樹膠沉淀配置成原液；將原液加去離子水至配液量制成口服液。在上述方案中，所述用乙醇提取冬蟲夏草、人參和紅景天有效成份的方法為用70%乙醇8倍被提取原料重量常溫浸泡24hr，第一次回流6hr;第二次用70%乙醇6倍被提取原料重量回流6hr;第三次用70%乙醇6倍被提取原料重量回流6hr。在上述方案中，所述將原液加去離子水至配液量制成口服液后，可以再加熱至沸15-20分鐘。在上述方案中，將制成的口服液可以用稀NaoH溶液調(diào)至PH=5.57.5灌封。在上述方案中，所述原料重量份的優(yōu)選配比為冬蟲夏草0.5、人參0.2、靈芝0.5、紅景天0.5、枸杞子l.O。本發(fā)明在吸取傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論精華，結(jié)合現(xiàn)代科研成果的理論和實(shí)踐基礎(chǔ)上研制出來的。本發(fā)明所述口服液立足植物本身的藥用價(jià)值，從溫和平補(bǔ)作用于人體各大臟器、五大系統(tǒng)的整體觀念出發(fā)，具有平衡臟腑陰陽、調(diào)節(jié)系統(tǒng)功能、扶正祛邪、抗疲勞、提高人體免疫力的功效。同時(shí)，由于選用純中草藥提取成份，其各種原料自身所具有的藥用價(jià)值也會(huì)帶來增強(qiáng)人體的體力、耐力，改善睡眠，防輻射，安定神志，止驚明目，激活腦細(xì)胞活力，開發(fā)大腦智慧，增強(qiáng)記憶力，補(bǔ)元?dú)?，生津等的養(yǎng)生保健功效。本發(fā)明所述的口服液對(duì)各類人士均可用于日常保健，病后、產(chǎn)后康復(fù)口服，具有明顯抗疲勞、提高人體免疫力等功能。本發(fā)明所述的口服液為棕黃色至棕紅色透明液體，有冬蟲夏草和人參特有的藥香氣，味甜、微苦。食用方法直接飲用或加入湯、茶、酒等飲料中飲用。每日1-2次，每次10ml。早、晚各一次，也可根據(jù)需要增加用量。本發(fā)明所述口服液的制劑為水劑。實(shí)驗(yàn)例一種具有抗疲勞和免疫調(diào)節(jié)作用的天參口服液相關(guān)功能的檢驗(yàn)一、檢測(cè)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)例列舉的檢驗(yàn)項(xiàng)目為針對(duì)本發(fā)明所述天參口服液保健功能的檢驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)分別針對(duì)本發(fā)明所述天參口服液抗疲勞作用和免疫力調(diào)節(jié)作用進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為昆明種小白鼠。二、功能判定標(biāo)準(zhǔn)及實(shí)驗(yàn)方法檢驗(yàn)技術(shù)依據(jù)《保健食品的功能學(xué)評(píng)價(jià)程序和檢驗(yàn)方法》，選取一定量樣品，并對(duì)其進(jìn)行相應(yīng)處理，將棕褐色液體以水調(diào)制成不同濃度用于本發(fā)明所述天參口服液抗疲勞作用和免疫力調(diào)節(jié)作用的小鼠實(shí)驗(yàn)。三、實(shí)驗(yàn)步驟(一)抗疲勞實(shí)驗(yàn)本品人體推薦量為20ml/60Kg/日。本實(shí)驗(yàn)設(shè)高、中、低三個(gè)劑量組，分別為10ml/Kg、3.3ml/Kg和L7ml/Kg，另設(shè)空白對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)用昆明種小白鼠，18—22g，由上海醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物房提供。針對(duì)本發(fā)明所述天參口服液的抗疲勞作用，先后對(duì)小鼠在行負(fù)重游泳、爬桿等的時(shí)間影響，以及運(yùn)動(dòng)時(shí)血糖、運(yùn)動(dòng)時(shí)血乳酸、運(yùn)動(dòng)時(shí)血清尿素氮的影響進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。1、負(fù)重游泳試驗(yàn)取小白鼠40只，隨即分為四組，每組10只，按劑量設(shè)計(jì)連續(xù)喂養(yǎng)28天，于次末灌胃后30分鐘，將小鼠放入水中游泳，水深30cm，水溫25士0.5。C，鼠尾根部負(fù)荷5%體重的鉛皮，記錄小鼠自游泳開始至死亡的時(shí)間。2、爬桿試驗(yàn)取小鼠40只，隨機(jī)分為四組，每組10只。按劑量設(shè)計(jì)連續(xù)喂養(yǎng)28天。將爬桿置于水溫15度、深10cm的水盆中，于末次灌胃后30分鐘，將小鼠放在長(zhǎng)25cm，直徑15cm的有機(jī)玻璃圓棒上，使小鼠肌肉處于靜力緊張狀態(tài)，第三次落水時(shí)終止實(shí)驗(yàn)，累計(jì)記錄三次小鼠因肌肉疲勞而從玻璃棒圓棒上跌落下來的時(shí)間。3、血糖測(cè)定同負(fù)重游泳試驗(yàn)，于末次灌胃后30分鐘，將小鼠放入30。C水中游泳45分鐘，取出烘干，使安靜，取鼠眼血，離心，取出血清測(cè)血糖。4、血酸乳測(cè)定同血糖測(cè)定取鼠眼血測(cè)血乳酸。5、尿素氮測(cè)定同血糖測(cè)定取鼠血清尿素氮。(二)免疫力調(diào)節(jié)作用實(shí)驗(yàn)樣品為棕色透明液體，每項(xiàng)實(shí)驗(yàn)采用ICR雄性小白鼠40只，體重范圍18—22克。隨即平均分為4組，高劑量組為10ml/kg，中劑量組為3.3ml/kg，低劑量組為0.33ml/kg，分別相當(dāng)于人體推薦劑量的30倍、IO倍和推薦劑量，對(duì)照組飲用蒸餾水。1、血清溶血素試驗(yàn)動(dòng)物連續(xù)給樣四周后，頸椎脫臼處死，眼眶采血，分離血清。在96孔微量血凝板上加25(^1生理鹽水，再分別在第一排加25^1血清，以后各排對(duì)倍稀釋，每孔加1%SRBC1滴，振蕩后室溫放置1小時(shí)，當(dāng)血球?qū)φ粘霈F(xiàn)沉落后觀察結(jié)果。2、NK細(xì)胞活性測(cè)定動(dòng)物連續(xù)給樣品四周后，頸椎脫臼處死，取脾臟，制成脾細(xì)胞懸液，取傳代后24hYAC—l細(xì)胞加3H—TdlOCi/lxl06/ml，37。C培養(yǎng)2小時(shí)，每30分鐘震蕩1次，用培養(yǎng)液洗滌3次，配制成lxlO"mlYAC—l靶細(xì)胞加入96孔培養(yǎng)板，每孔加入100^1最大，試驗(yàn)孔加入100pllxl07/ml小鼠脾細(xì)胞懸液，空白對(duì)照孔加入lOO(il培養(yǎng)液，最大釋放孔加入100(il2.5%TritonX—100，每個(gè)樣品設(shè)3個(gè)復(fù)孔，37'C培養(yǎng)4h后用多頭細(xì)胞收集器將細(xì)胞收集在49型玻璃纖維過濾紙上，6(TC烤干后浸入閃爍液過夜，用液體閃爍儀器測(cè)量CPM。3、胸腺指數(shù)、脾指數(shù)的測(cè)定動(dòng)物連續(xù)給樣四周后，每鼠稱重，頸椎脫臼處死，取胸腺稱重，分別計(jì)算腺指數(shù)和脾指數(shù)(每10g小鼠體重的胸腺或脾臟的mg數(shù))。4、DTH測(cè)定動(dòng)物連續(xù)給樣四周后，每鼠腹部去毛，范圍約3x3cm，將1%的DNFB溶液50^1均勻涂抹致敏。5日后，用1%DNFB溶液10nl均勻涂抹于小鼠右耳(兩面)進(jìn)行攻擊。24小時(shí)后，頸椎脫臼處死小鼠，用打孔器取下直徑8mm的左右耳片，稱重并計(jì)算腫脹度。5、小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞試驗(yàn)動(dòng)物連續(xù)給樣四周后，每鼠腹腔注射20。/。雞紅細(xì)胞懸液lml，間隔30分鐘，頸椎脫臼處死，固定于鼠板上，剪開腹壁皮膚，注射生理鹽水2ml，轉(zhuǎn)動(dòng)鼠板1分鐘，吸出腹腔，洗液lml，分滴于2片玻璃片上，37'C孵箱濕孵30分鐘，用生理鹽水漂洗，晾干，以1:1丙酮甲醇溶液固定，4%Giemsa——磷酸緩沖液染色3分鐘，再用蒸餾水漂洗晾干，用油鏡鏡檢，計(jì)算吞噬％和吞噬指數(shù)。四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果(一)抗疲勞實(shí)驗(yàn)1、負(fù)重游泳試驗(yàn)表1本發(fā)明所述天參口服液對(duì)小負(fù)重游泳時(shí)間的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>**p<0.01由表1可見，經(jīng)口給予不同劑量的樣品28天，三劑量是組均能延長(zhǎng)小鼠游泳時(shí)間，與對(duì)照組相比，中、高劑量組有顯著性差異。2、爬桿試驗(yàn)表2本發(fā)明所述天參口服液對(duì)小鼠爬桿時(shí)間的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>*p<0.05**p<0.01由表2可見，經(jīng)口給予不同劑量的樣品28天，樣品中高劑量組均能延長(zhǎng)小鼠爬桿的時(shí)間，與對(duì)照組相比，有顯著性差異。3、血糖測(cè)定表3本發(fā)明所述天參口服液對(duì)小鼠運(yùn)動(dòng)時(shí)血糖的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>由表3可見，樣品中高劑量組小鼠血清葡萄糖含量略高于對(duì)照組，差別無顯著性意義。4、血酸乳測(cè)定表4本發(fā)明所述天參口服液對(duì)小鼠運(yùn)動(dòng)時(shí)血乳酸影響<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>*p<0.05由表4可見，樣品三劑量組均能降低小鼠運(yùn)動(dòng)時(shí)血乳酸含量，與對(duì)照組相比，高劑量有顯著性差異。5、尿素氮測(cè)定表5本發(fā)明所述天參口服液對(duì)小暑運(yùn)動(dòng)時(shí)血清尿素氮的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>*p<0.05**p<0,01由表5可見，中、高劑量組均能減少小鼠運(yùn)動(dòng)時(shí)尿素氮產(chǎn)生，與對(duì)照組相比，中、高劑量組有顯著性差異。(二)免疫力調(diào)節(jié)作用實(shí)驗(yàn)1、血清溶血素試驗(yàn)表1血清溶血素試驗(yàn)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>樣品各劑量組與對(duì)照組相比均無顯著性差異，P>0.05。2、NK細(xì)胞活性測(cè)定_表2NK細(xì)胞活性測(cè)定:_<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>*PO.05樣品高、低劑量組與對(duì)照組相比，有顯著性差異，P<0.05。3、胸腺指數(shù)、脾指數(shù)的測(cè)定腺指數(shù)、脾指數(shù)的測(cè)定<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，各組的胸腺指數(shù)、脾指數(shù)兩兩比較，均無顯著性差異，各組之間比較也無顯著性差異。4、DTH測(cè)定表4DTH測(cè)定<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>*P<0.05經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，中、高劑量組的腫脹度與對(duì)照組相比，有顯著性差異。5、小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞試驗(yàn)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>*PO.05樣品高、中劑量組吞噬％與對(duì)照組相比，存在顯著性差異，P<0.05。高、中、低三個(gè)劑量組的吞噬指數(shù)與對(duì)照組相比，均存在顯著差異。P<0.05。在本實(shí)驗(yàn)條件下，樣品能提高動(dòng)物巨噬細(xì)胞的吞噬能力。五、實(shí)驗(yàn)評(píng)估本品為棕褐色液體，人體推薦劑量為每天20ml/60Kg。本試驗(yàn)設(shè)高、中、低三個(gè)劑量組，分別為人體推薦量的30、10、5(或l)倍，經(jīng)口給樣28天，結(jié)果表明在本實(shí)驗(yàn)條件下，樣品能延長(zhǎng)小鼠爬桿的時(shí)間和負(fù)重游泳時(shí)間，降低小鼠運(yùn)動(dòng)時(shí)血乳酸和血清尿素氮含量；能提高動(dòng)物NK細(xì)胞活性和吞噬細(xì)胞的吞噬能力以及細(xì)胞免疫水平。六、結(jié)論經(jīng)上海市衛(wèi)生防疫站檢驗(yàn)，本品具有抗疲勞作用和免疫調(diào)節(jié)作用。圖1是本發(fā)明所述制備方法流程圖。圖中虛框內(nèi)是控制區(qū)。具體實(shí)施方式實(shí)施例1原料藥物配方冬蟲夏草0.5kg、人參0.2kg、靈芝0.5kg、紅景天0.5kg、枸杞子1.0kg。制備方法參見圖l。以上五種原材料中，冬蟲夏草、人參、紅景天潤(rùn)軟切片；熱回流三次，即用70%乙醇8倍被提取原料重量常溫浸泡24hr，第一次回流6hr;第二次用70%乙醇6倍被提取原料重量回流6hr;第三次用70%乙醇6倍被提取原料重量回流6hr;過濾，回收乙醇，合并，濃縮至密度d^.20(美波20。C),制成醇提膏備用。將以上五種原材料中的枸杞子、靈芝和醇提膏制備中產(chǎn)生的藥渣一起水煮三次，即第一次用8倍被提取原料重量的去離子水煮3小時(shí)；第二次用6倍被提取原料重量去離子水煮2小時(shí)；第三次用6倍被提取原料重量去離子水煮2小時(shí)，過濾，濃縮至密度c^1.20(美波20。C)，制成水提膏備用；將醇提膏和水提膏混合，加入95%乙醇，調(diào)醇至75%以上，靜止取上清液，濃縮至d=1.20備用(精制原膏)。將精制原膏加水調(diào)制成密度d4.10，自然過濾或壓濾，除盡樹脂樹膠沉淀，冷藏24小時(shí)，配液；將原液加去離子水至配液量，加熱至沸15-20分鐘。壓濾、冷藏12小時(shí)，壓濾、檢測(cè)合格即得；將檢測(cè)合格藥液，用稀NaoH溶液調(diào)至PH=5.57.5灌封，將灌封好的產(chǎn)品，至臥式蒸汽滅菌柜中，0.15Mpa，35分鐘-45分鐘滅菌，檢漏、檢查異物，燈檢合格者包裝即得。實(shí)施例2原料藥物配方冬蟲夏草0.4kg、人參0.1kg、靈芝0.4kg、紅景天0.4kg、枸杞子0.9kg。制備方法與實(shí)施例1相同，參見圖1。實(shí)施例3原料藥物配方冬蟲夏草0.6kg、人參0.3kg、靈芝0.6kg、紅景天0.6kg、枸杞子1.1kg。制備方法與實(shí)施例1相同，參見圖1。權(quán)利要求1.一種具有抗疲勞和免疫調(diào)節(jié)作用的天參口服液，其特征是，該口服液是由下述重量份配比的原料冬蟲夏草0.4-0.6、人參0.1-0.3、紅景天0.4-0.6、靈芝0.4-0.6、枸杞子0.9-1.1，按下述制備方法制備的產(chǎn)品，將上述原料中的冬蟲夏草、人參和紅景天潤(rùn)軟、切片后用乙醇提取有效成份，制成密度d＝1.20的醇提膏；將上述原料中的枸杞子、靈芝和上述乙醇提取后剩余的藥渣一起用水煮的方法提取有效成分，制成密度d＝1.20的水提膏；將上述醇提膏和水提膏混合，加入95％乙醇，調(diào)醇至75％以上，靜止取上清液，濃縮至d＝1.20成精制原膏備用；將精制原膏加水調(diào)成密度d＝1.10，過濾，除盡樹脂樹膠沉淀配置成原液；將原液加去離子水至配液量制成口服液。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種具有抗疲勞和免疫調(diào)節(jié)作用的天參口服液，其特征是所述用乙醇提取冬蟲夏草、人參和紅景天有效成份的方法為用70%乙醇8倍被提取原料重量常溫浸泡24hr，第一次回流6hr;第二次用70%乙醇6倍被提取原料重量回流6hr;第三次用70%乙醇6倍被提取原料重量回流6hr。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種具有抗疲勞和免疫調(diào)節(jié)作用的天參口服液，其特征是所述將原液加去離子水至配液量制成口服液后，再加熱至沸15-20分鐘。4、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種具有抗疲勞和免疫調(diào)節(jié)作用的天參口服液，其特征是將制成的口服液用稀NaoH溶液調(diào)至PH=5.57.5灌封。5、按照權(quán)利要求1至5中任一權(quán)利要求所述的一種具有抗疲勞和免疫調(diào)節(jié)作用的天參口服液，其特征是該口服液的原料重量份配比為冬蟲夏草0.5、人參0.2、靈芝0.5、紅景天0.5、枸杞子l.O。全文摘要一種具有抗疲勞和免疫調(diào)節(jié)作用的天參口服液，其特征是，該口服液是由下述重量份配比的原料冬蟲夏草0.4-0.6、人參0.1-0.3、紅景天0.4-0.6、靈芝0.4-0.6、枸杞子0.9-1.1，按下述制備方法制備的產(chǎn)品，將上述原料中的冬蟲夏草、人參和紅景天潤(rùn)軟、切片后用乙醇提取有效成份，制成密度d＝1.20的醇提膏；將上述原料中的枸杞子、靈芝和上述乙醇提取后剩余的藥渣一起用水煮的方法提取有效成分，制成密度d＝1.20的水提膏；將上述醇提膏和水提膏混合，加入95％乙醇，調(diào)醇至75％以上，靜止取上清液，濃縮至d＝1.20成精制原膏備用；將精制原膏加水調(diào)成密度d＝1.10，過濾，除盡樹脂樹膠沉淀配置成原液；將原液加去離子水至配液量制成口服液。本發(fā)明具有明顯抗疲勞、提高人體免疫力等功能。文檔編號(hào)A61P37/00GK101264170SQ20081004758公開日2008年9月17日申請(qǐng)日期2008年4月30日優(yōu)先權(quán)日2008年4月30日發(fā)明者晶于申請(qǐng)人:晶于